測(cè)量富硒花生中硒蛋白含量的研究

鐘洪祿

摘要：硒是人體必需的微量元素Z一，花生是我國(guó)重要的油料作物，被稱作“長(zhǎng)壽果”，富硒效果好。本文以黑花生作為研究對(duì)象，通過(guò)葉面噴硒對(duì)黑花生籽粒中的不同形態(tài)的硒進(jìn)行分析以及蛋白硒含量的測(cè)定，利用考馬斯亮藍(lán)法微波消解一氫化物發(fā)生一原子熒光光譜法分別測(cè)定樣品中蛋白硒、總硒的含量。

一、硒及其生物效應(yīng)

硒是生態(tài)環(huán)境中的重要微量元素，1973年，世界衛(wèi)生組織宣布“硒是人體必需的微量元素之一”。我國(guó)食品營(yíng)養(yǎng)學(xué)會(huì)提出成人補(bǔ)硒標(biāo)準(zhǔn)是每天攝入50-200μg，然而我國(guó)六成以上的人口出現(xiàn)不同程度的微量元素?cái)z入不足的現(xiàn)象，特別是硒攝入量不足，這是由于我國(guó)大部分地區(qū)土壤等環(huán)境中的硒含量不足，導(dǎo)致人們主要攝入硒的方式（富硒植物的食用）存在缺陷。

由于無(wú)機(jī)硒對(duì)人體的作用不大且會(huì)對(duì)人體造成毒害作用，所以我們常采用土壤基施硒或農(nóng)作物葉面噴硒，使無(wú)機(jī)硒轉(zhuǎn)化為有機(jī)硒供人體吸收利用。

二、富硒花生的國(guó)內(nèi)外研究進(jìn)展

花生是我國(guó)重要的油料作物和經(jīng)濟(jì)作物，被民間被譽(yù)為“長(zhǎng)生果”，可種植區(qū)域大且產(chǎn)量高，備受人們喜愛(ài)。與一般的糧食作物相比，花生的生物功能性更高，特別是其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，花生含有大量的蛋白質(zhì)和脂肪，對(duì)于降低人體的膽固醇有很大效用，可以延緩衰老、預(yù)防過(guò)早衰老。使用花生作為富硒載體是可行的，這不僅是因?yàn)槠浞植紡V、產(chǎn)量大，更重要的是花生可以將七成以上的無(wú)機(jī)硒轉(zhuǎn)化為有機(jī)硒?；ㄉ鷮?duì)于環(huán)境的適應(yīng)能力強(qiáng)，對(duì)硒元素的富集能力也很強(qiáng)，并且有利于大范圍推廣，開發(fā)前景很好。根據(jù)李娟等人研究，硒在花生籽粒中的主要存在形式是蛋白質(zhì)結(jié)合硒，脂肪態(tài)結(jié)合硒含量較少。

三、硒的分析檢測(cè)技術(shù)

總硒含量的測(cè)定。為了確定樣品中的硒含量，必須選擇合適的預(yù)處理方法，以保證樣品中硒含量的準(zhǔn)確性、嚴(yán)謹(jǐn)性。樣品的消化過(guò)程是預(yù)處理步驟，也是測(cè)定無(wú)機(jī)硒的必要環(huán)節(jié)，在樣品消化過(guò)程中，樣品中的無(wú)機(jī)硒必須全部轉(zhuǎn)化為可用于測(cè)定的形式，而且不能造成硒的損耗。對(duì)植物中硒含量的測(cè)定，最常用的消化方法是濕法消化法。作為目前較廣泛的元素消解方法，微波消解法是利用微波將溫度提升到一定程度，將密閉中的樣品進(jìn)行消解，其操作簡(jiǎn)單且能夠同時(shí)控制溫度和壓力。

目前痕量元素硒的測(cè)定方法主要有光學(xué)分析法、電化學(xué)分析法、色譜法以及其他的聯(lián)用技術(shù)。光學(xué)分析法主要包括分光光度法、原子熒光光譜法（AFS）和原子吸收光譜法（AAS）;電化學(xué)分析法主要包括電位滴定法和極譜法等;色譜法主要包括高效液相色譜法（HPLC）和氣相色譜法（GC）;目前各種聯(lián)用技術(shù)日益受到人們的重視和關(guān)注，如電感耦合等離子體質(zhì)譜法（ICP-MS）。

四、可溶性蛋白質(zhì)的測(cè)定方法

考馬斯亮藍(lán)染料G250在酸性溶液中，主要是與蛋白質(zhì)中的堿性氨基酸以及芳香族氨基酸的殘基，通過(guò)疏水力來(lái)結(jié)合，從而讓染料的最大吸收峰（lmax）由波長(zhǎng)465 nm提高到波長(zhǎng)595 nm，溶液的顏色從棕紅色變?yōu)樗{(lán)色。在一定蛋白質(zhì)濃度范圍內(nèi)（1 - 1000μg/mL），溶液在波長(zhǎng)595 nm處的吸光度與蛋白質(zhì)濃度會(huì)呈線性相關(guān)的關(guān)系。考馬斯亮藍(lán)在游離狀態(tài)下呈現(xiàn)紅色，而當(dāng)其與蛋白質(zhì)結(jié)合的時(shí)候就會(huì)呈現(xiàn)出藍(lán)色，顏色深淺與蛋白質(zhì)的含量成正比。使用考馬斯亮藍(lán)法測(cè)量水溶液中的蛋白質(zhì)含量，靈敏度高、操作簡(jiǎn)便、效果明顯。

五、富硒花生的研究意義

人體每天都需要攝入硒，以維持體內(nèi)機(jī)制的正常運(yùn)轉(zhuǎn)，有效的抗癌、免疫系統(tǒng)免疫能力的提升、解毒排毒、防止心腦血管疾病等都要求體內(nèi)保持適量的硒。人類的主要攝硒方式是通過(guò)植物獲得，而植物大體上經(jīng)過(guò)兩種途徑吸收硒，一是通過(guò)葉面吸收，二是通過(guò)土壤吸收，然而我國(guó)絕大部分地區(qū)屬于貧硒地帶，無(wú)法從環(huán)境中獲得適量的硒。因此，富硒產(chǎn)品的開發(fā)有著非常重要的意義。

花生的產(chǎn)品形態(tài)多樣，如花生油、花生粒、生花生以及可用作牲畜飼料的花生秧，有利于硒通過(guò)多種途徑進(jìn)入人體，有效地提高硒的利用率，這對(duì)于一個(gè)貧硒國(guó)家來(lái)說(shuō)具有重大意義。