ELISA法在感染性疾病甲肝、戊肝早期診斷中的應用

李延志

[摘要]目的：探究酶聯(lián)免疫吸附測定法（ELISA法）在感染性疾病甲肝、戊肝早期診斷中的應用。方法：選取2015年1月-2019年1月我們體檢中心接收的甲肝、戊肝患者90例，臨床診斷出甲肝患者45例，納為甲肝組;戊肝患者45例，納為戊肝組。兩組患者均采用ELISA法進行血清免疫球蛋白M（IgM）抗體檢測，將兩組ELISA法檢測陽性率與臨床診斷結果進行對比。結果：甲肝組ELISA法檢測44例陽性，陽性率（97.78%），與臨床診斷結果相比，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）;戊肝組ELISA法檢測42例陽性，陽性率（93.33%），與臨床診斷結果相比，差異無統(tǒng)計學意義（p>0.05）。結論：ELISA法檢測感染性疾病甲肝、戊肝陽性率均相對較高，可以作為早期臨床診斷甲肝、戊肝的參考依據(jù)。

[關鍵詞]酶聯(lián)免疫吸附測定法，甲肝，戊肝，陽性率

[中圖分類號]RA46.6：R512.6 [文獻標識碼]A [文章編號]2096-5249（2019）20-0167-02

肝炎是肝臟炎癥的總稱，發(fā)病原因較為復雜，病毒、細菌、寄生蟲、藥物等均可能導致患者肝臟發(fā)生炎癥反應，其中以病毒性感染為最主要的發(fā)病原因，患者肝細胞受到損傷，肝功能表現(xiàn)異常。根據(jù)致病病毒的不同，臨床上將肝炎分為甲肝、乙肝、丙肝、戊肝等臨床癥型。因肝炎患者攜帶的病毒具有較高的傳染率，因此臨床只有進行有效的診斷才能進行有效的治療和預防傳染。臨床診斷肝炎的方法主要由ELISA法、膠體金法、病毒DNA檢測法、組織穿刺活檢法，其中ELISA法運用較為廣泛。本次研究旨在探究ELISA法在感染性疾病甲肝、戊肝早期診斷中的應用。具示如下。

1資料與方法

1.1一般資料選取2015年1月～2019年1月我們體檢中心接收的甲肝、戊肝患者90例，臨床診斷出甲肝患者45例，納為甲肝組，男性26例，女性19例;年齡24～58歲，平均年齡（40.35±4.82）歲;病程2-6月，平均病程（3.89±0.87）月。戊肝患者45例，納為戊肝組，男性24例，女性21例;年齡23-59歲，平均年齡（39.73±5.14）歲;病程1-6月，平均病程（3.64±0.82）月。兩組患者一般資料對比，差異無統(tǒng)計學意義（p>0.05），具有可對比性。此次關于ELISA法診斷甲肝、戊肝研究經(jīng)我體檢中心醫(yī)學倫理委員會批準。

1.2入選標準（1）納入標準：所有患者均符合《WHO關于甲型病毒性肝炎疫苗的意見書（2012年6月）》、《戊型病毒性肝炎防治教育手冊》診斷標準并經(jīng)HAV-DNA、HEV-DNA檢測確診為甲肝或戊肝;均為年齡≥18歲成人患者;患者及家屬簽署知情同意書;（2）排除標準：其他類型肝炎患者;精神異?；颊?合并惡性腫瘤患者;肝癌患者。

1.3方法抽取兩組患者接受甲肝、戊肝治療前清晨空腹靜脈血5ml，3500r/min離心處理后分離出血清，甲肝組使用甲型肝炎病毒IgM抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）（濰坊市康華生物技術有限公司，國食藥監(jiān)械（準）字2012第3400083號，規(guī)格：48人份/盒）、酶標儀（上海永創(chuàng)醫(yī)療器械有限公司，滬食藥監(jiān)械（準）字2013第2400984號，規(guī)格：SM600）進行血清IgM檢測，酶標儀設定450mm波長630mm副波長;戊肝組使用戊型肝炎病毒IgM抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）（濰坊市康華生物技術有限公司，國食藥監(jiān)械（準）字2011第3401620號，規(guī)格：48人份/盒）、酶標儀進行血清IgM檢測。

1.4質量控制若不能同時滿足以下兩點，則實驗無效：①陰性對照：正常情況下，陰性對照孔OD值≤0.10。②陽性對照：正常情況下，陽性對照孔OD值≤0.80。不滿足情況下必須重新進行檢測。

1.5觀察指標陽性率：將兩組ELISA法檢測陽性率與臨床診斷結果進行對比。陽性診斷依據(jù)：甲型肝炎病毒IgM抗體檢測：①臨界值（cUTOFF）=陰性對照孔A均值1.6統(tǒng)計學方法采用SPSS 20.0軟件進行數(shù)據(jù)處理，計量資料以（x±s）表示，組間比較用獨立樣本t檢驗，組內(nèi)比較用配對樣本t檢驗，計數(shù)資料用百分比表示，采用x檢驗，P<0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2結果

甲肝組ELISA法檢測44例陽性，陽性率（97.78%），與臨床診斷結果相比，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）;戊肝組ELISA法檢測42例陽性，陽性率（93.33%），與臨床診斷結果相比，差異無統(tǒng)計學意義（p>0.05）。見表1。

3討論

甲肝、戊肝均屬于傳染性肝炎疾病，甲肝主要由HAV感染引起，可以通過糞一口感染，患者臨床常表現(xiàn)出疲憊、食欲減退、肝腫大、肝區(qū)痛、肝功能異常，部分患者出現(xiàn)黃疸。戊肝主要由HEV感染引起，患者臨床表現(xiàn)與甲肝患者類似。臨床治療甲肝、戊肝患者以早發(fā)現(xiàn)、早隔離、早治療為主要原則，因此對診斷方法要求較高。ELISA法因其操作相對簡單、耗時短、費用少等優(yōu)點，臨床運用較為廣泛，本次研究選取我體檢中心已確診的45例甲肝、45例戊肝患者進行ELISA法檢測，臨床表現(xiàn)較好。

本次研究中，甲肝組ELISA法檢測44例陽性，陽性率97.78%，戊肝組ELISA法檢測42例陽性，陽性率93.33%，均與臨床診斷結果相近，表明ELISA法檢測感染性疾病甲肝、戊肝陽性率均相對較高，可以作為早期臨床診斷甲肝、戊肝的參考依據(jù)。血清中甲型肝炎病毒IgM抗體和戊型肝炎病毒IgM抗體均在感染早期就會出現(xiàn)。尤其是甲型肝炎病毒IgM抗體往往在甲肝發(fā)病數(shù)日后就會在患者血液中出現(xiàn)，并且會在較短時間內(nèi)快速升高，2-4周即會上升到峰值，并且甲型肝炎病毒IgM抗體存在時間較長，臨床研究發(fā)現(xiàn)抗HAvIgM可以持續(xù)1-2個月，其抗體的效價和陽性率依然不會降低，3個月后才會逐漸降低，因此ELlsA法檢測甲型肝炎病毒IgM抗體結果是甲肝患者早期診斷的有效依據(jù)，同時也是區(qū)別急性感染還是慢性感染的有效方式。急性期戊肝患者血清中可測出高滴度的戊型肝炎病毒IgM抗體，在潛伏期末期患者表現(xiàn)出戊肝感染臨床病癥之前就可以檢測出，戊肝感染癥狀最典型期患者戊型肝炎病毒IgM抗體滴度達到峰值，研究發(fā)現(xiàn)峰值狀態(tài)可以持續(xù)1個月左右，而治療恢復期戊型肝炎病毒IgM抗體滴度會下降甚至消失，因此戊型肝炎病毒IgM抗體檢測陽性往往代表患者處于急性期感染。

綜上所述，EusA法檢測感染性疾病甲肝、戊肝陽性率均相對較高，可以作為早期臨床診斷甲肝、戊肝的參考依據(jù)。