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      苧麻根藥材的生藥學鑒定研究

      2019-09-04 09:00:52
      亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥 2019年8期
      關鍵詞:草酸鈣苧麻根莖

      田 靜

      (揚州市食品藥品檢驗檢測中心,江蘇 揚州 225009)

      苧麻Bochmerianivea(L.)Gaud.為蕁麻科苧麻屬多年生宿根性草本植物,是起源于我國的一種重要纖維作物,國際上又稱“中國草”[1]。苧麻根為苧麻的干燥根及根莖,又名苧根、野苧根、苧麻茹。苧麻根藥用歷史悠久,《本草綱目》中記載苧麻“甘,寒,無毒”,具有涼血、止血、散瘀的功效,主治跌撲瘀血、創(chuàng)傷出血等[2]。民間還常用于安胎、蛇蟲咬傷、乙型肝炎等。由于民間應用廣泛,苧麻根除了收載于《中國藥典》1977年版外,廣西、貴州、河南、新疆及內(nèi)蒙古等省地方標準均有收載[3]?,F(xiàn)代研究表明苧麻根主要化學成分為有機酸類、黃酮類及三萜酸類,并具有止血、抗病毒、抑菌、保肝等多藥理活性[4]。我國具有豐富的苧麻資源,產(chǎn)量占全世界總產(chǎn)量的90%以上,但苧麻根藥用資源的開發(fā)利用卻很薄弱。多局限于偏方驗方,制成的成藥較少[5],所以,為了更系統(tǒng)地對苧麻根進行開發(fā)利用,應進一步加強基礎性研究。本文對苧麻根的藥材性狀、根及根莖橫切面、粉末顯微及薄層色譜鑒定進行系統(tǒng)研究,以期為苧麻根的藥材鑒定和質量標準的完善提供參考依據(jù)。

      1 材料與儀器

      1.1 儀器

      光學顯微鏡配套顯微成像系統(tǒng)(OLYMPUS BX51 &DP73);薄層點樣儀(CAMAG LINOMAT5);自動輪轉切片機(LEICA RM 2235);電子分析天平(METTLER TOLEDO MS204S);超聲儀(KUDOS SK250LHC);烘箱(THERMO OGH60)。

      1.2 材料

      苧麻根實驗藥材三批,分別采集于江蘇省無錫市、揚州市、泰州市,經(jīng)揚州市食品藥品檢驗檢測中心房克慧主任中藥師鑒定為蕁麻科苧麻屬苧麻Bochmerianivea(L.)Gaud.的干燥根及根莖。硅膠G預制板;水為超純水;所用試劑均為分析純。

      2 方法與結果

      2.1 原植物形態(tài)

      多年生宿根性亞灌木,高0.5~2 m。莖青褐色,密被粗長毛。葉互生,葉片草質,闊卵形或卵圓形,長7~15 cm,寬5~12 cm;先端漸尖,基部渾圓或寬楔形,邊緣密生粗鋸齒;上表面綠色,粗糙,疏被短伏毛,下表面密被白色氈毛,基出脈3條。葉柄長2~10 cm,托葉2,分生,背面被毛。圓錐花序腋生,雌雄通常同株;雄花序通常位于雌花序之下;雄花小,無花梗,花被4片,雄蕊4;雌花簇球形,花被管狀,宿存,花柱1。瘦果細小,集合成小球狀,光滑,基部突縮成細柄。花期8-10月[6-7]。見圖1。

      圖1 苧麻原植物形態(tài)

      2.2 性狀鑒別

      根莖為不規(guī)則圓柱形,稍彎曲。表面灰棕色,有縱皺紋及多數(shù)皮孔,并有疣狀突起及殘留須根。質堅硬,不易折斷,斷面纖維性,皮部棕色,木部淡棕色或淡黃色,有的中間有數(shù)個同心環(huán)紋,中央有髓或中空。根略呈紡錘形,稍膨大,表面灰棕色,有縱皺紋及橫長皮孔。斷面粉性。氣微,味淡,有黏性。見圖2。

      圖2 苧麻根藥材性狀

      2.3 顯微鑒別

      2.3.1 根莖橫切面 木栓層為數(shù)列細胞,外側常破碎。皮層約十余列薄壁細胞。中柱鞘纖維壁極厚,胞腔??;韌皮部狹窄,韌皮纖維單個或數(shù)個成束;形成層成環(huán),明顯。木質部射線寬2~10列細胞,含草酸鈣方晶;導管單個散在或多個徑向排列。薄壁細胞中充滿淀粉粒,含草酸鈣簇晶。見圖3。

      1.木栓層;2.皮層;3.韌皮部;4.形成層;5.木質部;6.木射線

      圖3 橫切面顯微特征

      2.3.2 粉末顯微 本品粉末黃棕色。淀粉粒甚多,單粒類球形、橢圓形或卵圓形,直徑8~20 μm,臍點點狀;復粒由2~3分粒組成。草酸鈣簇晶眾多,直徑10~25 μm,單個散在或存在薄壁細胞中。草酸鈣方晶少見。分泌道細胞內(nèi)含紅棕色分泌物。纖維多成束,壁厚。見圖4。

      2.4 薄層色譜鑒別

      取本品粉末2 g(過2號篩),加二氯甲烷20 mL,超聲處理30 min,濾過,濾液蒸干,殘渣加甲醇2 mL使溶解,作為供試品溶液。另取苧麻根對照藥材2 g,同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法試驗,吸取上述兩種溶液各10 μL,分別點于同一硅膠G薄層板上,以正己烷-丙酮(3∶1)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%硫酸乙醇溶液,在105 ℃加熱至斑點顯色清晰。結果供試品色譜在與對照藥材色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點。見圖5。

      1.淀粉粒;2.草酸鈣簇晶;3.草酸鈣方晶;4.分泌道細胞;5.纖維

      S.苧麻根對照藥材;1-3.苧麻根藥材樣品

      2.5 高效液相色譜法鑒別

      2.5.1 色譜條件 Agilent Zorbax SB-C18(5 μm,4.6 mm×250 mm);流動相為乙腈(A)-0.1%磷酸溶液(B);梯度洗脫:0~10 min,6%A;10~35 min,6%~27%A;35~50 min,27%~55%A。流速1 mL/min;柱溫30 ℃;二極管陣列檢測器。

      2.5.2 對照品溶液的制備 精密稱取綠原酸對照品,以甲醇制成每1 mL含80 g的溶液。

      2.5.3 供試品溶液的制備 取樣品粉末約1.5 g(過3號篩),精密稱定,置平底燒瓶中,精密加入50%甲醇25 mL,稱定重量,水浴回流30 min,放冷,補足減失的重量,搖勻,濾過,取續(xù)濾液,即得。

      在查詢大量苧麻根化學成分研究文獻[8-9]后,采用上述色譜條件分離了包括黃酮類、酚酸類及蒽醌類的多種苧麻根中有效成分,如蘆丁、金絲桃苷、槲皮苷、槲皮素、山奈素、綠原酸、咖啡酸、兒茶素、表兒茶素、大黃素等,最終通過對照品保留時間結合對比對照品峰與供試品峰紫外吸收光譜,定性了苧麻根供試品色譜圖中綠原酸、金絲桃苷、槲皮苷、兒茶素四個有效成分,如圖6所示。但由于除綠原酸以外的其余3個成分含量極低,故最終采用綠原酸作為該藥材的定性鑒別特征峰。

      A.綠原酸對照品;B.苧麻根供試品 1.綠原酸;2.兒茶素;3.金絲桃苷;4.槲皮苷

      3 討論

      文中首次建立了苧麻根藥材的薄層色譜鑒別方法并進行了方法學研究,分離效果較好,斑點明顯。實驗研究中,采用不同的提取溶劑:石油醚(30~60℃)、二氯甲烷、甲醇,對不同提取方法和不同提取時間分別進行了考察,確定了樣品前處理方法。另對不同薄層板(國產(chǎn)硅膠G板、進口MN板、進口Merck板),不同點樣量(2、5、8、10 μL),不同展開劑(正己烷-丙酮(3∶1)、環(huán)己烷-乙酸乙酯-丙酮-甲醇(9∶1∶2∶0.2)以及石油醚(30~60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上層溶液),以及不同溫度、濕度(溫度在15~22℃、濕度在30%~65%)進行研究,優(yōu)化了薄層色譜條件。結果表明,按“2.4”的方法實驗,結果較好。另將供試品溶液放置24 h后考察穩(wěn)定性,結果供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定,點樣斑點清晰。

      苧麻為蕁麻科苧麻屬植物,全世界約有120種,其中我國有31種12變種,遍布華南、西南、河北、遼寧等地,多數(shù)種產(chǎn)自兩廣及云貴川等省區(qū)。在HPLC鑒別實驗中,一些文獻報道的成分如蘆丁、咖啡酸、大黃素等未能檢出,考慮與種(變種)及產(chǎn)地等因素相關。關于我國不同種苧麻屬植物根及根莖化學成分異同及不同產(chǎn)地苧麻根化學成分比較有待進一步研究。

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