曾乙心,金福財(cái),熊正興,何永宏*
(1.文山州煙草公司 丘北縣分公司,云南 丘北 663299; 2.云南農(nóng)業(yè)大學(xué) 植物保護(hù)學(xué)院,云南 昆明 650100)
煙草黑脛病主要是由于土壤中的越冬病原菌通過(guò)雨水、風(fēng)、農(nóng)事操作等進(jìn)行傳播[1-2]。從煙苗移栽至煙株發(fā)病存在一定的時(shí)間,這段時(shí)間即為煙草黑脛病病原菌的潛育期。前人對(duì)煙草黑脛病潛育期的研究已過(guò)去較長(zhǎng)時(shí)間,不能很好地指導(dǎo)現(xiàn)在黑脛病防治工作。本試驗(yàn)以云南主要栽培品種為材料,獲取不同煙草品種發(fā)生煙草黑脛病的潛育期,為煙草黑脛病的防治提供時(shí)間推算依據(jù)。
煙草黑脛病菌采用土豆培養(yǎng)基培養(yǎng)。參試煙草品種有云煙85、云煙87、紅花大金元、K 326等4個(gè),苗齡一致。
取實(shí)驗(yàn)室提供的菌絲接種于土豆培養(yǎng)基上,28 ℃恒溫培養(yǎng)5~7 d,-4 ℃保存?zhèn)溆?。參考楊建卿的游?dòng)孢子制作方法制作煙草黑脛病病菌游動(dòng)孢子[3-5]。
將4個(gè)品種的煙苗移栽在裝有1.5 kg無(wú)菌土壤的花盆中,并每株澆灌1萬(wàn)·mL-1煙草黑脛病病菌游動(dòng)孢子懸浮液1.5 L,于30 ℃人工氣候箱中培養(yǎng)。每個(gè)品種澆灌10株煙苗。每天觀察記錄發(fā)病情況。
肉眼觀察分離純化培養(yǎng)的煙草黑脛病病菌,可看到培養(yǎng)基上有大量乳白色菌絲,表面凸起,質(zhì)地黏稠。在顯微鏡下觀察,菌絲無(wú)色透明,無(wú)隔膜,粗細(xì)不一,梨形或橢圓形,內(nèi)含顆粒,頂端有一乳頭狀突起,無(wú)色透明(圖1)。
圖1 煙草黑脛病病菌形態(tài)
煙草苗用灌根法接種煙草黑脛病,紅花大金元在接種后6 d就發(fā)病,9 d發(fā)病率迅速達(dá)50%(表1);云煙87在接種后12 d開(kāi)始發(fā)病,15 d發(fā)病率迅速達(dá)50%;云煙85在接種后15 d發(fā)病,18 d發(fā)病率達(dá)50%;K326在接種后18 d發(fā)病,到21 d發(fā)病率達(dá)50%。紅花大金元的潛育期為9 d;云煙87為15 d;云煙85為18 d;K326為21 d。
表1 不同煙草品種接種煙草黑脛病菌的發(fā)病率
相較于噴施法和針灌法,灌根法對(duì)煙苗的損傷較小,澆灌量大,能使煙苗在最快時(shí)間感染煙草黑脛病。本試驗(yàn)結(jié)果表明,紅花大金元屬于易感品種,云煙87屬于中抗品種,云煙85和K326屬于高抗品種,結(jié)論與前人研究結(jié)果一致[4-5]。
煙草品種對(duì)煙草黑脛病的潛育期的影響很大,紅花大金元在適宜發(fā)病條件下潛育期只有9 d,K326潛育期長(zhǎng)達(dá)21 d,潛育期的跨度很大。此結(jié)果與田間發(fā)病規(guī)律非常相似,田間病情從移栽后要30 d左右才穩(wěn)定即達(dá)到發(fā)病率最高值[2]。但試驗(yàn)中人工氣候箱中的小環(huán)境與實(shí)際生產(chǎn)有差異,研究結(jié)果可作為生產(chǎn)實(shí)際的參考。