氣相色譜法測定四川姜黃片中14種農(nóng)殘含量

黃錦波

（吉姆斯（廣州）實(shí)驗(yàn)技術(shù)有限公司，廣東 廣州 510000）

姜黃片主要產(chǎn)自廣東、四川等地。姜黃片既 可入藥也可作食品添加劑[1-2]。相關(guān)研究表明，國內(nèi)在2018年對姜黃片的需求量高達(dá)10萬噸以上，其中四川姜黃片預(yù)估產(chǎn)量約1400～1600噸。種植過程中使用的殺蟲劑中，有機(jī)氯為脂溶性物質(zhì)，耐熱耐酸，難分解，易在動植物內(nèi)聚集[3]。而姜黃片的色素含量高，成分復(fù)雜，容易污染儀器檢測器[4-5]，從而導(dǎo)致農(nóng)殘分離度不理想，檢測結(jié)果不準(zhǔn)確。本實(shí)驗(yàn)通過優(yōu)化前處理方法與儀器分析等條件，能有效解決這些問題，本實(shí)驗(yàn)將闡述并證實(shí)本方法的真實(shí)性與可行性。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器、試劑、標(biāo)準(zhǔn)品與樣品

儀器：GC-2010Plus島津氣相色譜儀。

試劑：濃硫酸、乙酸、乙腈、正己烷（分析純，廣州試劑廠）。

標(biāo)準(zhǔn)品：六六六（BHC）滴滴涕（DDT）有機(jī)氯農(nóng)殘混標(biāo)（上海安譜，批號 CDGG-111426-8，標(biāo)示含量1000 μg/ml）；五氯硝基苯，三氯殺螨醇（上海安譜，批號CDGG-113826-2，標(biāo)示含量1000 μg/ml）；氯菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氯菊酯混標(biāo)（上海安譜，批號CDGG-120016-4，標(biāo)示含量1000 μg/ml）；四川姜黃片（四川永祥，批號180910，規(guī)格：500 g/袋）。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)儲備液的制備 準(zhǔn)確量取14種有機(jī)氯標(biāo)準(zhǔn)品各0.1 ml，正己烷稀釋并定容至100 ml，配制成1000 μg/L標(biāo)準(zhǔn)儲備液，于冷凍中避光保存。

1.2.2 混合標(biāo)準(zhǔn)溶液制備 準(zhǔn)確量取標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液1 ml于同一個(gè)10 ml量瓶中，加正己烷稀釋成混合標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)溶液100 μg/L。

1.2.3 混合標(biāo)準(zhǔn)工作液配置 準(zhǔn)確量取一定量的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液于一組10 ml量瓶中，以正己烷稀釋并定容。此標(biāo)準(zhǔn)系列濃度范圍為0.5～20 μg/L。

1.2.4 樣品溶液的制備 粉碎適量樣品，準(zhǔn)確稱取樣品1 g于50 ml離心管中，加入約10 ml 1 %乙酸乙腈多次提取，50 ℃氮?dú)鉂饪s至近干，以正己烷稀釋并定容于10 ml離心管中，加入1 ml濃硫酸磺化，如此重復(fù)多次，直至濃硫酸層無色，有機(jī)層以氮?dú)鉂饪s至近干，用正己烷稀釋并定容至1 ml，過濾，上機(jī)待測。

1.2.5 色譜條件 采用Inert Cap 17（30 m×0.25 mm，0.25 μm）為分離柱， 電子捕獲檢測器，程序升溫為初始溫度60 ℃，30 ℃/min升至180 ℃，再以5 ℃/min 升至220 ℃ ，2 ℃/min 升至250 ℃，5 ℃/min升至270 ℃，保持35 min。

1.2.6 實(shí)驗(yàn)譜圖 采用1.2.5項(xiàng)色譜條件進(jìn)樣測定，10 μg/L的BHC-滴滴涕、五氯硝基苯與20 μg/L的三氯殺螨醇、擬除蟲菊酯的標(biāo)準(zhǔn)溶液譜圖見圖1。

圖1 混合農(nóng)殘標(biāo)準(zhǔn)溶液GC譜圖

由圖1可見，農(nóng)殘色譜峰的分離度均≥1.5，理論塔板數(shù)均≥10 000。色譜條件適用于四川姜黃片中農(nóng)殘的測定。

2 結(jié)果與討論

2.1 線性關(guān)系考察

按1.2.5項(xiàng)色譜條件，測定1.2.3項(xiàng)下系列濃度標(biāo)準(zhǔn)液，以峰面積（A）對濃度（C）進(jìn)行回歸，得回歸方程，結(jié)果見表1。

表1 農(nóng)殘標(biāo)準(zhǔn)曲線考察結(jié)果

通過對14種農(nóng)殘的色譜分析，各物質(zhì)均有穩(wěn)定的保留時(shí)間及良好的峰型，且本方法在配制各濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，適于14種農(nóng)殘（α-BHC、五氯硝基苯、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC、三氯殺螨醇、4, 4-DDE、4, 4-DDD、2, 4-DDT 、4, 4-DDT、氯菊酯、氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴氯菊酯）的含量測定。

2.2 儀器重現(xiàn)性試驗(yàn)

分別取濃度為5 μg/L的BHC，DDD，三氯殺螨醇與20.0 μg/L擬除蟲菊酯類標(biāo)準(zhǔn)品溶液1 μl，連續(xù)進(jìn)6針，記錄峰面積，計(jì)算峰面積的RSD，結(jié)果見表2。

表2 重現(xiàn)性試驗(yàn)結(jié)果

由表2可見，14種農(nóng)殘峰面積RSD范圍為0.3 %～4.6 %，表明本實(shí)驗(yàn)室的儀器的穩(wěn)定性良好，適用于四川姜黃片中14種農(nóng)殘的測定。

2.3 靈敏度試驗(yàn)

2.3.1 稱取樣品1 g，準(zhǔn)確加入10.0 μg/L有機(jī)氯混合標(biāo)準(zhǔn)溶液10.0 μl，按1.2.4項(xiàng)方法處理，按1.2.5項(xiàng)儀器條件進(jìn)行測試，信噪比≥3，即為α-BHC，五氯硝基苯和γ-BHC的方法檢出限。準(zhǔn)確加入10.0 μg/L有機(jī)氯混合標(biāo)準(zhǔn)溶液30.0 μl，按1.2.4項(xiàng)方法處理后，按1.2.5項(xiàng)儀器條件測試，信噪比≥3，即為β-BHC，δ-BHC，4, 4-DDE，4, 4-DDD，2, 4-DDT與4, 4-DDT的方法檢出限。

2.3.2 稱取樣品1 g，準(zhǔn)確加入10.0 μg/L擬除蟲菊酯類標(biāo)準(zhǔn)溶液0.2 ml，按1.2.4項(xiàng)方法處理后，按1.2.5項(xiàng)儀器條件測試，信噪比≥3，即為擬除蟲菊酯類的方法檢出限。準(zhǔn)確加入 10.0 μg/L三氯殺螨醇標(biāo)準(zhǔn)溶液0.1 ml，按1.2.4項(xiàng)方法處理后，按1.2.5項(xiàng)儀器條件測試，信噪比≥3，即為三氯殺螨醇標(biāo)準(zhǔn)溶液的方法檢出限，結(jié)果見表3。

結(jié)果表明，14種農(nóng)殘的方法檢出限均滿足現(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)對14種農(nóng)殘靈敏度的要求。

表3 農(nóng)殘靈敏度試驗(yàn)結(jié)果

2.4 加標(biāo)回收率試驗(yàn)

精確稱取四川姜黃片1 g，共9份，分別精密加入一定濃度的農(nóng)殘混合標(biāo)準(zhǔn)儲備液，按1.2.4項(xiàng)制備樣品溶液，按1.2.5項(xiàng)色譜條件進(jìn)行測試，記錄峰面積，計(jì)算14種農(nóng)殘的回收率，結(jié)果見表4。

結(jié)果表明，14種農(nóng)殘的回收率在70.3 %～118.5 %，均符合要求（回收率60 %～120 %）。

3 結(jié)論

按中華人民共和國衛(wèi)生部GB 5009.146-2008《植物性食品中有機(jī)氯和擬除蟲菊酯類農(nóng)藥多種殘留量的測定》中農(nóng)殘的氣相測定方法中并沒有五氯硝基苯、三氯殺螨醇與氯氰菊酯，過程繁瑣并耗時(shí)，同時(shí)靈敏度不佳，分離度并不能達(dá)到理想狀態(tài)，同時(shí)凝膠滲透色譜價(jià)格與氣質(zhì)聯(lián)用色譜儀昂貴，并不是每個(gè)常規(guī)實(shí)驗(yàn)室都有能力進(jìn)行配備。姜黃片的脂溶性物質(zhì)種類復(fù)雜，姜黃片素含量高，分離難度大，而本方法優(yōu)化了樣品的前處理與儀器分析條件，能很好分離農(nóng)殘。本操作方法簡便，溶劑簡單，僅用氣相色譜就可快速和準(zhǔn)確測定姜黃片中14種農(nóng)殘的含量，同時(shí)能達(dá)到理想的分離度與理論塔板數(shù)，能很好地優(yōu)化GB 5009.146-2008 《植物性食品中有機(jī)氯和擬除蟲菊酯類農(nóng)藥多種殘留量的測定》中農(nóng)殘的檢測方法，為廣大的檢測工作者提供一種檢測農(nóng)殘的參考技術(shù)。

表4 加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果