血清可溶性血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1在子宮內(nèi)膜癌患者中的表達(dá)及與疾病特征的關(guān)系

肖虹，郭健，潘曉蕾

北京市房山區(qū)中醫(yī)醫(yī)院婦產(chǎn)科，北京 102400

子宮內(nèi)膜癌是發(fā)生于子宮內(nèi)膜的上皮性惡性腫瘤，好發(fā)于圍絕經(jīng)期或絕經(jīng)后女性[1]。中國(guó)部分經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)地區(qū)子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病率逐年上升，居女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤的首位，嚴(yán)重威脅患者的生命健康[2]。近年來(lái)，早期子宮內(nèi)膜癌患者經(jīng)規(guī)范化治療后5年生存率有所升高，但晚期患者的預(yù)后極差[3]。目前，有關(guān)子宮內(nèi)膜癌的確切發(fā)病機(jī)制尚不明確，臨床尚無(wú)有效的預(yù)防策略，研究的重點(diǎn)仍是早期發(fā)現(xiàn)和早期治療。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子是參與血管生成的重要因子[4]，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子及其受體可以以自分泌的形式參與子宮內(nèi)膜癌的新生血管生成[5]。可溶性血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1（soluble vascular endothelial growth factor receptor 1，sVEGFR1）是血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的抑制性受體，與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子結(jié)合后可抑制血管生成[6-7]。迄今尚不明確sVEGFR1與子宮內(nèi)膜癌的關(guān)系。因此，本研究通過(guò)對(duì)比子宮內(nèi)膜癌患者和女性健康體檢者血清sVEGFR1水平，探討sVEGFR1在子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展中的潛在作用及其臨床意義。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

選取2016年5月至2018年5月于北京市房山區(qū)中醫(yī)醫(yī)院診治的82例子宮內(nèi)膜癌患者。納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)診斷性刮宮后組織病理學(xué)檢查確診為原發(fā)性子宮內(nèi)膜癌；初診病例。排除標(biāo)準(zhǔn)：有放化療史。納入的82例子宮內(nèi)膜癌患者（子宮內(nèi)膜癌組）中，年齡為46～72歲，平均年齡為（54.82±9.73）歲；病理類型：子宮內(nèi)膜樣癌64例，非子宮內(nèi)膜樣癌18例；臨床分期：Ⅰ期9例，Ⅱ期24例，Ⅲ期33例，Ⅳ期16例。選取75例同期女性健康體檢者（健康對(duì)照組），年齡為45～71歲，平均年齡為（53.92±10.64）歲。兩組研究對(duì)象的年齡比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，且所有研究對(duì)象均對(duì)本研究知情并簽署知情同意書。

1.2 檢測(cè)方法

采集兩組研究對(duì)象的空腹外周靜脈血2 ml，室溫下放置30 min，以離心半徑15 cm、轉(zhuǎn)速3000 r/min離心20 min后，分離上層血清，保存于-80℃冰箱中待測(cè)。采用人sVEGFR1酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）檢 測(cè)sVEGFR1表達(dá)水平（試劑盒購(gòu)自美國(guó)GTX公司，Multiskan FC酶標(biāo)儀購(gòu)自美國(guó)Thermo公司）。嚴(yán)格按照人sVEGFR1檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作，主要包括以下3個(gè)部分：①制備標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)血清樣品。將3000 ng/L的標(biāo)準(zhǔn)品分別制成3000、2000、1000、500、250、125 ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)樣品，并將待測(cè)血清2倍稀釋。②設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)品孔和待測(cè)血清樣品孔，每組設(shè)3個(gè)復(fù)孔，進(jìn)行ELISA檢測(cè)，并使用酶標(biāo)儀在450 nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的光密度（optical density，OD）值。③采用 Curve Expert軟件，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度（3孔平均值）為橫坐標(biāo)、OD值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，導(dǎo)出sVEGFR1濃度與OD值的擬合方程，根據(jù)擬合方程計(jì)算待測(cè)樣品的濃度，再乘樣品的稀釋倍數(shù)即為待測(cè)樣品的實(shí)際sVEGFR1濃度。

1.3 觀察指標(biāo)

比較兩組研究對(duì)象血清sVEGFR1表達(dá)水平，并分析不同基線特征的子宮內(nèi)膜癌患者的sVEGFR1表達(dá)情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 20.00統(tǒng)計(jì)軟件分析數(shù)據(jù)。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)或單因素方差分析；計(jì)數(shù)資料以例數(shù)表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組研究對(duì)象血清sVEGFR1表達(dá)水平的比較

子宮內(nèi)膜癌組患者的血清sVEGFR1表達(dá)水平為（213.52±77.46）ng/ml，低于健康對(duì)照組的（843.47±141.05）ng/ml，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=35.077，P＜0.05）。

2.2 不同基線特征的子宮內(nèi)膜癌患者血清sVEGFR1表達(dá)水平的比較

不同組織分化程度、TNM分期的子宮內(nèi)膜癌患者的血清sVEGFR1表達(dá)水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=26.457、34.712，P＜0.01）；有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、肌層浸潤(rùn)深度≥50%的子宮內(nèi)膜癌患者的血清sVEGFR1表達(dá)水平均明顯低于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、肌層浸潤(rùn)深度＜50%的患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=6.609、5.210，P＜0.01）；不同年齡、絕經(jīng)情況及病理類型的子宮內(nèi)膜癌患者的血清sVEGFR1表達(dá)水平比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。（表1）

表1 不同基線特征的子宮內(nèi)膜癌患者血清sVEGFR1表達(dá)水平（n=82）

3 討論

子宮內(nèi)膜癌是最常見的女性生殖系統(tǒng)腫瘤之一，其發(fā)病率約占中國(guó)女性生殖系統(tǒng)腫瘤的20%～30%[8]，且發(fā)病呈明顯的年輕化趨勢(shì)[9]，晚期預(yù)后極差[10-11]。研究顯示，子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病原因主要與長(zhǎng)期持續(xù)的雌激素刺激、子宮慢性炎癥及長(zhǎng)期高脂肪飲食等因素有關(guān)[12-14]，但確切的發(fā)病機(jī)制尚不明確。

血管生成是腫瘤生長(zhǎng)的必備條件，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子是促進(jìn)血管生成的關(guān)鍵因子[15-16]。研究顯示，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)水平明顯高于正常肌層組織[17]，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子及其受體與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病可能存在一定的關(guān)系[18-19]。目前，有關(guān)子血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的抑制性受體與子宮內(nèi)膜癌關(guān)系的報(bào)道較少。本研究結(jié)果顯示，子宮內(nèi)膜癌組患者的血清sVEGFR1表達(dá)水平低于健康對(duì)照組（P＜0.05），提示子宮內(nèi)膜癌患者的血清sVEGFR1表達(dá)水平降低可能與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病有關(guān)。本研究結(jié)果還顯示，子宮內(nèi)膜癌患者血清sVEGFR1表達(dá)水平與患者的組織分化程度、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、肌層浸潤(rùn)深度有關(guān)（P＜0.05），而與患者的年齡、絕經(jīng)情況、病理類型無(wú)關(guān)（P＞0.05），提示sVEGFR1可能與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)展及惡性程度有關(guān)。

綜上所述，與健康體檢者相比，子宮內(nèi)膜癌患者血清sVEGFR1表達(dá)水平較低，sVEGFR1可能與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展及惡性程度有關(guān)，可能成為子宮內(nèi)膜癌早期診斷的潛在生物學(xué)標(biāo)志物。由于子宮內(nèi)膜癌發(fā)病機(jī)制錯(cuò)綜復(fù)雜，后期研究需擴(kuò)大樣本量和受試人群，進(jìn)一步研究血清sVEGFR1與子宮內(nèi)膜癌的相關(guān)機(jī)制，以及血清sVEGFR1診斷子宮內(nèi)膜癌的參考范圍、靈敏度和特異度，以期為子宮內(nèi)膜癌患者的早期臨床診治提供參考依據(jù)。