大白杜鵑的化學(xué)成分研究△

歷明輝，陳新濤，呂光輝，陳黎

十堰市太和醫(yī)院/湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬醫(yī)院 藥學(xué)部，湖北 十堰 442000

大白杜鵑Rhododendrondecorum為杜鵑花科杜鵑花屬植物，為常綠灌木或小喬木，花期為4—6月，在中國四川、貴州、云南、西藏以及緬甸東北部均有分布。大白杜鵑的花朵非常漂亮，具有較高的園藝價(jià)值，但是大白杜鵑毒性大，誤食常引起人、畜的中毒，木藜蘆毒素類I和IV是其主要毒性物質(zhì)，民間常用其干燥的根和葉來用于活血止痛、風(fēng)濕疼痛以及跌打損傷[1]。對杜鵑花屬植物的化學(xué)成分及藥理活性的研究一直很多，但是對大白杜鵑化學(xué)成分的研究僅僅報(bào)道了少量的萜、黃酮類等化合物[2-5]，在以前的研究基礎(chǔ)上，我們對大白杜鵑的化學(xué)成分進(jìn)行了深一步研究，從大白杜鵑的95%乙醇水提取物中分離鑒定了8個(gè)化合物，分別是(7S，8S)-3-甲氧基-3′，7-環(huán)氧-8，4′-氧代新木脂素-4，9，9′-三醇[(7S，8S)-3-Methoxy-3′，7-epoxy-8，4′-oxyneoligna-4，9，9′-triol，1]，(+)-8-羥基松脂醇[(+)-8-Hydroxypinoresinol，2]，異阿魏酸(Isoferulic acid，3)，二氫紫丁香苷(Dihydrosyringenin，4)，山楂葉苷元B(Shanyegenin B，5)，反烷-4(15)-烯-1β，11-二醇[Opposit-4(15)-en-1β，11-diol，6]，1，10-裂環(huán)-4-羥基-衣蘭醇-5-烯-1，10-二酮(1，10-Seco-4-hydroxy-muurol-5-ene-1，10-diketone，7)，(-)-黑麥草內(nèi)酯[(-)-Loliolide，8]。

1 儀器與材料

核磁共振譜(Bruker AM-400)，半制備液相(Agilent 1100)，色譜柱為YMC(5 μm，RP-C18，100 mm×250 mm)，旋光儀(Perkin-Elmer PE-341LC)。ODS(YMC GEL ODS-AS 50 μm)；氘代試劑(J&K Chemical Ltd、Cambridge Isotope Laboratories，Inc.)；正相硅膠(青島海洋化工廠)；高效硅膠板GF254(煙臺化工研究所)，色譜純甲醇，分析純甲醇、三氯甲烷、二氯甲烷、正丁醇、乙酸乙酯、丙酮、石油醚，均購自上海國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；純凈水(杭州娃哈哈)；植物材料于2016年從四川寶興海拔1400 m左右采摘，由湖北醫(yī)藥學(xué)院藥學(xué)院葉方教授鑒定為杜鵑花屬植物大白杜鵑Rhododendrondecorum，植物樣本現(xiàn)保存在湖北十堰市太和醫(yī)院武當(dāng)中藥研究所標(biāo)本室(No.20170725)。

2 提取與分離

取干燥的大白杜鵑枝葉12 kg粉碎，在室溫條件下用95%乙醇水冷提4次，真空濃縮后合并得到大白杜鵑枝葉的總提取物。將總提取物用熱水混懸后用石油醚和乙酸乙酯依次萃取，分別濃縮后得到石油醚萃取部位180 g，乙酸乙酯萃取部位102 g。將乙酸乙酯萃取部位用正相柱(CHCl3-MeOH，50∶1→1∶1)分成4個(gè)組分(A～D)。B組分用ODS柱分成5個(gè)子組分(MeOH-H2O，30%→90%)。各子組分又經(jīng)凝膠、正相以及半制備HPLC分離純化得到化合物1(10.5 mg)、2(7.5 mg)。C組分先用RP-C18柱分成3個(gè)子組分(MeOH-H2O，30%→90%)，各子組分又經(jīng)正相以及半制備HPLC分離純化得到化合物3(17.4 mg)、7(16.4 mg)、8(8.5 mg)。D組分依次用RP-C18柱、正相洗脫以及半制備HPLC分離純化得到化合物4(9.8 mg)、5(11.3 mg)、6(14.3 mg)?；衔?～8的化學(xué)結(jié)構(gòu)見圖1。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：無色油狀物；ESI-MSm/z：407.43 [M+H]+；1H-NMR(CDCl3，400 MHz)δ：1.84(1H，m，H-8′)，2.60(1H，dd，J=8.0，7.3 Hz，H-7′)，3.54(1H，dd，J=12.6，3.6 Hz，H-9a)，3.85(1H，dd，J=12.6，2.7 Hz，H-9b)，3.65(1H，t，J=6.4 Hz，H-9′)，3.87(3H，s，5′-OCH3)，3.90(6H，s，3-OCH3，5-OCH3)，3.92(1H，ddd，J=

圖1 大白杜鵑中化合物1～8的化學(xué)結(jié)構(gòu)

8.2，3.6，2.7 Hz，H-8)，4.93(1H，d，J=8.2 Hz，H-7)，6.40(1H，d，J=1.8 Hz，H-6′)，6.48(1H，d，J=1.8 Hz，H-2′)；13C-NMR(CDCl3，100 MHz)δ：127.4(C-1)，104.7(C-2)，147.5(C-3)，135.7(C-4)，147.5(C-5)，104.4(C-6)，76.4(C-7)，78.5(C-8)，61.7(C-9)，134.5(C-1′)，109.8(C-2′)，144.5(C-3′)，131.2(C-4′)，148.1(C-5′)，104.9(C-6′)，32.1(C-7′)，34.4(C-8′)，62.2(C-9′)，56.4(3-OCH3，5-OCH3)，56.3(5′-OCH3)。結(jié)合文獻(xiàn)[6]推斷化合物1為(7S，8S)-3-甲氧基-3′，7-環(huán)氧-8，4′-氧代新木脂素-4，9，9′-三醇。

化合物2：無定形粉末；ESI-MSm/z：387.38 [M+Na]+；1H-NMR(CD3OD，400 MHz)δ：3.04(1H，ddd，J=8.7，6.3，5.3 Hz，H-8′)，3.75(1H，dd，J=9.1，6.3 Hz，H-9′β)，3.86(1H，d，J=9.3 Hz，H-9α)，3.85(3H，s，3-OCH3)，3.84(3H，s，3′-OCH3)，4.01(1H，d，J=9.3 Hz，H-9β)，4.42(1H，dd，J=9.1，8.7 Hz，H-9′α)，4.61(1H，s，H-7)，4.86(1H，d，J=5.3 Hz，H-7′)，6.80(2H，d，J=8.1 Hz，H-7，H-7′)，6.85(1H，dd，J=8.1，1.8 Hz，H-6)，6.88(1H，dd，J=8.1，1.8 Hz，H-6′)，7.05(2H，t，J=1.9 Hz，H-2，H-2′)；13C-NMR(CD3OD，400 MHz)δ：129.7(C-1)，113.0(C-2)，149.0(C-3)，147.5(C-4)，115.7(C-5)，121.8(C-6)，89.4(C-7)，92.7(C-8)，76.3(C-9)，133.8(C-1′)，111.6(C-2′)，149.4(C-3′)，147.6(C-4′)，116.4(C-5′)，120.7(C-6′)，88.2(C-7′)，62.6(C-8′)，72.4(C-9′)，56.6(3-OCH3，3′-OCH3)。結(jié)合文獻(xiàn)[7]推斷化合物2為(+)-8-羥基松脂醇。

化合物3：無色針晶；ESI-MSm/z：195.19 [M+H]+；1H-NMR(DMSO-d6，400 MHz)δ：3.80(3H，s，4-OCH3)，6.25(1H，d，J=15.9 Hz，H-8)，6.94(1H，d，J=8.2 Hz，H-5)，7.07(1H，d，J=2.0 Hz，H-2)，7.10(1H，dd，J=8.2，2.0 Hz，H-6)，7.49(1H，d，J=15.9 Hz，H-7)；13C-NMR(DMSO-d6，100 MHz)δ：127.1(C-1)，114.4(C-2)，146.5(C-3)，149.8(C-4)，112.0(C-5)，121.0(C-6)，144.4(C-7)，116.2(C-8)，167.8(C-9)，55.4(4-OCH3)。結(jié)合文獻(xiàn)[8-9]推斷化合物3為異阿魏酸。

化合物4：無色油狀；ESI-MSm/z：235.23 [M+Na]+；1H-NMR(CDCl3，400 MHz)δ：1.83(2H，m，H-8)，2.61(2H，t，J=7.6 Hz，H-7)，3.62(2H，t，J=6.3 Hz，H-9)，3.84(6H，s，3-OCH3，5-OCH3)，6.40(2H，s，H-2，H-6)；13C-NMR(CDCl3，100 MHz)δ：133.2(C-1)，105.5(C-2，C-6)，147.3(C-3，C-5)，132.9(C-4)，32.6(C-7)，34.6(C-8)，62.4(C-9)，56.8(3-OCH3，5-OCH3)。結(jié)合文獻(xiàn)[10]推斷化合物4為二氫紫丁香苷。

化合物5：無色粉末；ESI-MSm/z：255.37 [M+H]+；1H-NMR(CDCl3，400 MHz)δ：1.10(3H，s，H-13)，1.20(3H，s，H-12)，1.23(3H，d，J=1.5 Hz，H-15)，1.27(3H，s，H-14)，2.20(2H，m，H-4)，3.72(1H，td，J=7.1，2.7 Hz，H-10)，5.01(1H，dd，J=10.7，1.4 Hz，H-1a)，5.14(1H，dt，J=17.3，1.4 Hz，H-1b)，5.53(2H，m，H-5，H-6)，5.85(1H，dd，J=17.3，10.7 Hz，H-2)；13C-NMR(CDCl3，100 MHz)δ：112.4(C-1)，145.0(C-2)，73.0(C-3)，45.4(C-4)，122.5(C-5)，140.5(C-6)，83.1(C-7)，38.1(C-8)，26.6(C-9)，85.4(C-10)，71.4(C-11)，27.4(C-12)，24.4(C-13)，27.4(C-14)，27.6(C-15)。結(jié)合文獻(xiàn)[11]推斷化合物5為山楂葉苷元B。

化合物6：無色粉末；ESI-MSm/z：239.37 [M+H]+；1H-NMR(CDCl3，400 MHz)δ：0.62(3H，s，H-14)，1.20(3H，s，H-12)，1.22(3H，s，H-13)，2.0(1H，overlap，H-3a)，2.28(1H，ddd，J=13.8，5.3，1.8 Hz，H-3b)，3.51(1H，dd，J=11.4，4.7 Hz，H-1)，4.55(1H，d，J=1.5 Hz，H-15a)，4.84(1H，d，J=1.5 Hz，H-15b)；13C-NMR(CDCl3，100 MHz)δ：79.7(C-1)，32.2(C-2)，34.8(C-3)，146.1(C-4)，58.0(C-5)，32.4(C-6)，49.8(C-7)，30.7(C-8)，37.6(C-9)，47.9(C-10)，71.8(C-11)，30.2(C-12)，30.3(C-13)，12.1(C-14)，106.5(C-15)。結(jié)合文獻(xiàn)[12]推斷化合物6為反烷-4(15)-烯-1β，11-二醇。

化合物7：無色粉末；ESI-MSm/z：253.36 [M+H]+；1H-NMR(CDCl3，400 MHz)δ：0.75(3H，d，J=6.7 Hz，H-13)，0.87(3H，d，J=6.7 Hz，H-12)，1.44(3H，s，H-15)，2.06(3H，s，H-14)，2.09(2H，m，H-3)，2.40(1H，ddd，J=17.0，8.0，6.6 Hz，H-2a)，2.61(1H，ddd，J=17.0，6.6，5.5 Hz，H-2b)，6.34(1H，s，H-5)；13C-NMR(CDCl3，100 MHz)δ：198.4(C-1)，35.4(C-2)，37.4(C-3)，69.4(C-4)，150.2(C-5)，139.5(C-6)，44.6(C-7)，25.2(C-8)，42.4(C-9)，209.4(C-10)，31.3(C-11)，20.4(C-12)，21.0(C-13)，30.1(C-14)，27.9(C-15)。結(jié)合文獻(xiàn)[13]推斷化合物7為1，10-裂環(huán)-4-羥基-衣蘭醇-5-烯-1，10-二酮。

化合物8：白色無定形粉末；ESI-MSm/z：197.25 [M+H]+；1H-NMR(CD3OD，400 MHz)δ：1.3(3H，s，H-9)，1.45(3H，s，H-10)，1.54(1H，dd，J=14.4，3.7 Hz，H-2a)，1.75(1H，dd，J=13.0，4.0 Hz，H-4a)，1.77(3H，s，H-11)，1.97(1H，ddd，J=14.4，2.9，2.4 Hz，H-2b)，2.45(1H，ddd，J=13.0，2.8，2.4 Hz，H-4b)，4.23(1H，m，H-3)，5.75(1H，s，H-7)；13C-NMR(CD3OD，100 MHz)δ：37.3(C-1)，48.1(C-2)，67.4(C-3)，46.6(C-4)，89.3(C-5)，185.8(C-6)，113.6(C-7)，174.6(C-8)，31.5(C-9)，27.1(C-10)，27.4(C-11)。結(jié)合文獻(xiàn)[14]推斷化合物8為(-)-黑麥草內(nèi)酯。

4 討論

文獻(xiàn)中對大白杜鵑化學(xué)成分和生物活性的報(bào)道目前集中在萜、黃酮、多糖等類成分，杜鵑花屬植物次級代謝產(chǎn)物千變?nèi)f化，結(jié)構(gòu)新穎的化合物集中在二萜、三萜類等成分。文獻(xiàn)中結(jié)構(gòu)新穎的二萜主要是木藜蘆烷型，此次實(shí)驗(yàn)也未分離得到大白杜鵑主要毒性物質(zhì)木藜蘆毒素類I和IV，可能與植物采收季節(jié)與產(chǎn)地有很大關(guān)系，也可能是木藜蘆烷型二萜在大白杜鵑中含量較小，探索大白杜鵑中結(jié)構(gòu)新穎的二萜還需加大植物原材料的提取量。

本實(shí)驗(yàn)從大白杜鵑的95%乙醇水提取物中分離鑒定了8個(gè)化合物，包括2個(gè)木脂素和2個(gè)苯丙素類物質(zhì)，3個(gè)倍半萜和1個(gè)降倍半萜，均為首次從大白杜鵑枝葉中分離得到。該實(shí)驗(yàn)豐富了杜鵑花屬植物中化合物的結(jié)構(gòu)類型，為大白杜鵑的化學(xué)成分和藥理活性的研究提供了一定參考依據(jù)。