快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn)中類風(fēng)濕因子對(duì)梅毒抗體的影響分析

韋旭敏

[摘要] 目的 探討分析快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片（Rapid plasma reacting ring card test，簡(jiǎn)稱RPR）試驗(yàn)中，類風(fēng)濕因子（Rheumatoid factor，簡(jiǎn)稱RF）對(duì)檢測(cè)結(jié)果及梅毒抗體的影響。方法 方便選取2017年5月—2018年11月該院收治的疑似及確診的梅毒患者945例，對(duì)所有入組研究患者的血清樣本分別進(jìn)行RPR試驗(yàn)、螺旋體明膠顆粒凝集（TPPA）試驗(yàn)及RF試驗(yàn)。所有945例樣本血液的RPR試驗(yàn)、TPPA試驗(yàn)及RF試驗(yàn)結(jié)果、RF水平與RPR試驗(yàn)陽性之間的相關(guān)性。結(jié)果 RPR試驗(yàn)結(jié)果：陽性：93例，TPPA試驗(yàn)結(jié)果：陽性：26例，RPR的實(shí)驗(yàn)陽性率高于TPPA試驗(yàn)（P<0.05）;RF試驗(yàn)結(jié)果：陽性：15例，RPR試驗(yàn)+RF試驗(yàn)：陽性：13例，TPPA試驗(yàn)+ RF試驗(yàn)：陽性：1例，結(jié)果提示，RF對(duì)RPR試驗(yàn)結(jié)果的影響高于TPPA試驗(yàn)（P<0.05）;對(duì)RPR驗(yàn)+RF試驗(yàn)結(jié)果呈陽性的13例樣本進(jìn)行遞倍增稀釋試驗(yàn)，結(jié)果提示，RF水平為8 IU/L的RPR假陽性患者約69.2%;RF水平為16IU/L的RPR假陽性患者約23.1%，RF水平為32 IU/L的RPR假陽性患者約7.7%，不同RF水平組間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），RF水平在8 IU/L時(shí)，對(duì)RPR試驗(yàn)結(jié)果的影響最為顯著。結(jié)論 RF能夠?qū)γ范净颊叩腞PR試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響，能夠使部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果呈現(xiàn)假陽性的現(xiàn)象;因此，臨床中給予疑似及確診的梅毒患者進(jìn)行診療的過程當(dāng)中，應(yīng)當(dāng)充分、全面的考慮可能影響試驗(yàn)結(jié)果的相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)因素，盡可能的降低甚至排除RF對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響，以提高梅毒患者的臨床診斷準(zhǔn)確率。

[關(guān)鍵詞] 快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片試驗(yàn);類風(fēng)濕因子;梅毒;試驗(yàn);RPR;TPPA;RF

[中圖分類號(hào)] R5? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A? ? ? ? ? [文章編號(hào)] 1674-0742（2019）05（a）-0189-04

[Abstract] Objective To study the analysis of the influence of rapid plasma reacting ring card （Rapid plasma reacting ring card test， RPR） experiment， rheumatoid factor （RF） on test results and syphilis antibody. Methods A total of 945 suspected and confirmed syphilis patients admitted to our hospital from May 2017 to November 2018 were convenient selected to conduct RPR test， TPPA test and RF test on serum samples. The correlation between RPR test， TPPA test and RF test results， RF level and positive RPR test was found in all 945 samples. Results RPR test results： 93 cases; TPPA test results： 26 cases; RPR test positive rate was higher than that of TPPA test （P<0.05）. RF test results： positive： 15 cases， RPR test +RF test： positive： 13 cases， TPPA test +RF test： positive： 1 case. The results indicated that the influence of RF on RPR test results was higher than that of TPPA test （P<0.05）. Thirteen samples tested positive by RPR +RF test were subjected to a recursive dilution test. The results indicated that approximately 69.2% of patients with false positive RPR were found to have a RF level of 8 IU/L. Patients with false positive RPR with RF level of 16 IU/L were about 23.1%， and those with RF level of 32 IU/L were about 7.7%. There were significant differences among the groups with different RF levels，RF level at 8 IU/L has the most signifficant effect on the RPR test results（P<0.05）. Conclusion RF can affect the results of RPR test in syphilis patients， and can lead to false positive results in some experiments. Therefore， in the process of clinical diagnosis and treatment of suspected and confirmed syphilis patients， sufficient and comprehensive consideration should be given to relevant risk factors that may affect the test results. And the influence of RF on the test results should be reduced or even excluded as far as possible， so as to improve the accuracy of clinical diagnosis of syphilis patients.

[Key words] Rapid plasma reactivity cyclic card test; Rheumatoid factors; Syphilis; The test; RPR; TPPA; The RF

目前臨床中診斷梅毒的主要及常用方法就是血清學(xué)試驗(yàn)，包括：快速血漿反應(yīng)素環(huán)狀卡片（Rapid plasma reacting ring card test，簡(jiǎn)稱RPR）試驗(yàn)、螺旋體明膠顆粒凝集（Treponema pallidum gelatin agglutination test，簡(jiǎn)稱TPPA）試驗(yàn)及酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）試驗(yàn)[1]。臨床中最常實(shí)用的就是RPR，該實(shí)驗(yàn)具有操作迅速、簡(jiǎn)便等特點(diǎn)，對(duì)梅毒患者的早期篩查具有較高的敏感性，能夠使用RPR試驗(yàn)來評(píng)估患者的病情變化及療效情況。但當(dāng)抗體含量過高時(shí)，易出現(xiàn)假陰性反應(yīng)，即前帶現(xiàn)象（promne phenomenon），會(huì)有漏檢[2]。但由于RPR試驗(yàn)過程過程中所使用的心磷脂抗原并不包括菌體成分及梅毒螺旋體，因此，疾病可能會(huì)導(dǎo)致RPR試驗(yàn)出現(xiàn)假陽性而發(fā)生誤診。目前相關(guān)文獻(xiàn)中提到可能會(huì)對(duì)梅毒血清試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響的疾病主要有：自身免疫類疾病、非梅毒螺旋體感染、靜脈吸毒、妊娠及老年人群體[3]。為了有效避免臨床中對(duì)梅毒患者誤診，該院方便選取2017年5月—2018年11月收治的疑似及確診梅毒的患者945例，分別進(jìn)行RPR試驗(yàn)、TPPA試驗(yàn)及RF試驗(yàn)，觀察RF對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響情況，旨在為提高臨床對(duì)梅毒患者的診斷準(zhǔn)確率提供更多依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1? 資料與方法

1.1? 一般資料

方便選取該院收治的疑似及確診的梅毒患者945例，年齡45～60歲，平均年齡（52.3±0.7）歲，其中男性593例，女性352例，并獲取該院倫理委員會(huì)的許可。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①存在不潔性生活史者。②性伴侶或配偶存在梅毒史者。③母親有梅毒史者。④既往存在或現(xiàn)有梅毒癥狀者。⑤年齡45～60歲。⑥患者及其家屬均知情，并簽署同意知情書。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并精神異常者。②合并惡性腫瘤者。③不愿配合研究者。

1.2? 方法

1.2.1? 采集血液樣本? 抽取所有945例的靜脈樣本血液約4 mL，常規(guī)離心（3 000 r/min，5 min）取上層清液，冷凍待檢。

1.2.2? 試劑? RF試劑購自：Spain SPINREACT公司，TPPA試劑購自：ZHU HAI LIVZON DIAGNOSTICS INC.，RPR試劑購自：上?？迫A生物工程股份有限公司。

1.2.3? 儀器? 酶標(biāo)儀（安圖 PHOMO），全自動(dòng)酶標(biāo)洗板機(jī)（PW-960），酶聯(lián)免疫反應(yīng)加速儀（NY/MMJ）。

1.2.4? 試驗(yàn)方法? RPR試驗(yàn)：使用活性炭分別吸附待檢血清樣本及抗原，凝集反應(yīng)之后確認(rèn)是否出現(xiàn)凝集物，如果有凝集物時(shí)提示為RPR陽性[4]。TPPA試驗(yàn)：將待檢樣本血清內(nèi)的TP-Ab（梅毒螺旋體抗體）與試劑中的明膠顆粒進(jìn)行凝集反應(yīng)，TPPA陽性標(biāo)準(zhǔn)：樣本血清稀釋倍數(shù)≥1∶80時(shí)發(fā)生凝集[5]。RF試驗(yàn)：取約50 μL的冷凍血清樣本，常溫解凍后在血清中加入乳膠試劑，并進(jìn)行充分混勻，在使用反應(yīng)板搖動(dòng)約120 s（搖動(dòng)速度：100 r/min）。使用相同方法加入陰性陽性對(duì)照，等陽性對(duì)照發(fā)生凝集之后進(jìn)行判定，RF陽性判定標(biāo)準(zhǔn)：≥8IU/L[6]。

1.3? 觀察指標(biāo)

觀察所有945例樣本血液的RPR試驗(yàn)、TPPA試驗(yàn)及RF試驗(yàn)結(jié)果。

觀察RF水平與RPR試驗(yàn)陽性之間的相關(guān)性。

1.4? 統(tǒng)計(jì)方法

數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，其中計(jì)數(shù)進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，計(jì)量進(jìn)行t檢驗(yàn)， P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2? 結(jié)果

2.1? 945例樣本血液的RPR試驗(yàn)、TPPA試驗(yàn)及RF試驗(yàn)結(jié)果

RPR試驗(yàn)結(jié)果：陽性：93例，TPPA試驗(yàn)結(jié)果：陽性：26例，RPR的實(shí)驗(yàn)陽性率高于TPPA試驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;RF試驗(yàn)結(jié)果：陽性：15例，RPR試驗(yàn)+RF試驗(yàn)：陽性：13例，TPPA試驗(yàn)+ RF試驗(yàn)：陽性：1例，結(jié)果提示，RF對(duì)RPR試驗(yàn)結(jié)果的影響高于TPPA試驗(yàn)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表1。

2.2? RF水平與RPR試驗(yàn)陽性之間的相關(guān)性

對(duì)RPR驗(yàn)+RF試驗(yàn)結(jié)果呈陽性的13例樣本進(jìn)行遞倍增稀釋試驗(yàn)，結(jié)果提示，RF水平為8 IU/L的RPR假陽性患者約69.2%;RF水平為16 IU/L的RPR假陽性患者約23.1%，RF水平為32 IU/L的RPR假陽性患者約7.7%，不同RF水平組間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），RF水平在8 IU/L時(shí)，對(duì)RPR試驗(yàn)結(jié)果的影響最為顯著，具體見表2。

3? 討論

梅毒檢測(cè)目前在臨床的診療過程當(dāng)中是十分常用的一項(xiàng)檢查指標(biāo)及項(xiàng)目，在梅毒臨床診斷、產(chǎn)檢、獻(xiàn)血及輸血時(shí)都有十分重要的臨床參考意義[7]。梅毒螺旋體在進(jìn)入到機(jī)體當(dāng)中之后，能夠根據(jù)血清學(xué)試驗(yàn)將其分成兩種不同的類型，一種特異性抗體，其對(duì)機(jī)體中的梅毒螺旋體具有直接的針對(duì)作用;另外一種就是非特異性抗體，其主要是對(duì)機(jī)體中的類脂類抗體產(chǎn)生作用[8]。其中，特異性抗體的在機(jī)體中能夠長時(shí)間存在，即便梅毒患者在經(jīng)過臨床各種抗梅毒干預(yù)之后，對(duì)血清進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)仍然能夠檢測(cè)到特異性抗體的存在。而類脂類抗體，對(duì)梅毒檢測(cè)具有較高的靈敏度，但其特異度較低，且類脂類抗體在機(jī)體內(nèi)的出現(xiàn)時(shí)間要晚于特異性抗體[9]。