中藥方劑聯(lián)合西藥口服治療慢性牙周炎的效果及對(duì)牙齦組織中ICAM-1表達(dá)的影響

胡運(yùn)苑　蘇黎　梁惠均　黎惠茹

【摘要】 目的：探討中藥方劑聯(lián)合西藥口服治療慢性牙周炎的效果及對(duì)牙齦組織中細(xì)胞間黏附分子-1（ICAM-1）表達(dá)的影響。方法：選擇2017年1月-2018年1月東莞市石碣醫(yī)院口腔門(mén)診收治的慢性牙周炎患者80例為研究對(duì)象，按照隨機(jī)數(shù)字表法分成觀察A組和觀察B組，每組40例;另選擇同期性別年齡相匹配的健康牙齦患者40例為對(duì)照組。觀察B組采用常規(guī)牙周基礎(chǔ)及西藥口服治療，觀察A組在此基礎(chǔ)上，根據(jù)患者的中醫(yī)辨證分型自擬方劑輔助治療，觀察比較兩組慢性牙周炎患者的臨床療效，采用免疫組化Elivsion法檢測(cè)比較三組患者牙齦組織中ICAM-1表達(dá)水平。結(jié)果：觀察A組的治療總有效率（92.50%）明顯高于觀察B組（72.50%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。觀察A組和觀察B組患者的牙齦組織中ICAM-1表達(dá)均顯著高于對(duì)照組（P<0.05），而觀察A組和觀察B組患者治療前牙齦組織中ICAM-1陽(yáng)性表達(dá)率比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。治療后，觀察A組患者牙齦組織中ICAM-1陽(yáng)性表達(dá)率明顯較治療前下降（P<0.05），而觀察B組患者牙齦組織中ICAM-1陽(yáng)性表達(dá)率變化不明顯，觀察A組牙齦組織中ICAM-1陽(yáng)性表達(dá)率明顯低于觀察B組（P<0.05）。結(jié)論：中藥方劑聯(lián)合西藥口服治療能有效提高慢性牙周炎的治療效果;慢性牙周炎患者的牙齦組織中存在ICAM-1過(guò)表達(dá)，中藥方劑能抑制ICAM-1的表達(dá)，進(jìn)而減少炎癥反應(yīng)和組織破壞。

【關(guān)鍵詞】 中藥; 牙周炎; 細(xì)胞間黏附分子-1; 免疫組織化學(xué)

【Abstract】 Objective：To explore the curative effect of traditional Chinese medicine prescription combined with western medicine on chronic periodontitis and the expression of ICAM-1 in gingival tissue.Method：A total of 80 patients with chronic periodontitis of Shijie Hospital of Dongguan City from January 2017 to January 2018 were selected as study objects，and they were randomly divided into observation group A and observation group B，40 cases in each group.Another 40 healthy gingival patients with matching gender and age at the same time were selected as the control group.Observation group B was treated with conventional periodontal and oral administration of western medicine.On the basis of observation group B，observation group A was treated with traditional Chinese medicine prescription.The clinical efficacy of two groups was observed and the ICAM-1 expression level in the gingival tissue of three groups were detected by Elivsion method.Result：The treatment efficiency of the observation group A（92.50%）was significantly higher than that of the observation group B（72.50%），there was statistical significance（P<0.05）.ICAM-1 expression in the gingival tissues of both observation group A and B were significantly higher than that of the control group（P<0.05），while the positive expression rate of ICAM-1?in the gingival tissues of observation group A and B before treatment showed no significant difference（P>0.05）.After treatment，the positive expression of ICAM-1 rate of the observation group A reduced significantly than that of before treatment（P<0.05），while the positive expression of ICAM-1 rate of the observation group B changed a little，and the positive expression rate of ICAM-1 of the observation group A was significantly lower than that of the observation group B（P<0.05）.Conclusion：The combination of traditional Chinese medicine prescription and western medicine periodontal can effectively improve the therapeutic effect of chronic periodontitis.ICAM-1?overexpression exists in gingival tissue of patients with chronic periodontitis.Traditional Chinese medicine prescription can inhibit the expression of ICAM-1 and thus reduce the inflammatory reaction and tissue destruction.

【Key words】 Traditional Chinese medicine; Periodontitis; ICAM-1; Immunohistochemistry

First-authors address：Shijie Hospital of Dongguan City，Dongguan 523290，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2019.03.016

流行病學(xué)研究顯示，慢性牙周炎是成年人牙齒缺失的主要原因，嚴(yán)重影響患者的日常生活質(zhì)量。目前臨床西醫(yī)治療主要采用齦上潔治、齦下刮治及根面平整等基礎(chǔ)治療術(shù)及抗感染對(duì)癥治療，癥狀改善短期內(nèi)顯著，極易復(fù)發(fā)，且隨之帶來(lái)的耐藥菌群發(fā)生及全身不良反應(yīng)等問(wèn)題仍無(wú)法解決[1-2]。近年來(lái)中醫(yī)藥以療效穩(wěn)定、毒副作用小、彌補(bǔ)西醫(yī)偏重局部的缺陷及改善生活質(zhì)量等優(yōu)勢(shì)逐漸被應(yīng)用輔助治療牙周炎，受到臨床醫(yī)師的關(guān)注[3-4]。本研究采用自制中藥方劑輔助治療慢性牙周炎，觀察其治療效果及對(duì)牙齦組織中ICAM-1表達(dá)的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2017年1月-2018年1月東莞市石碣醫(yī)院口腔門(mén)診收治的慢性牙周炎患者80例為研究對(duì)象，另選擇同期性別年齡相匹配的健康牙齦患者（因正畸需要拔牙）40例為對(duì)照組。慢性牙周炎入選對(duì)象納入標(biāo)準(zhǔn)：均符合中重度牙周炎診斷標(biāo)準(zhǔn)[10];口內(nèi)余留牙≥20顆。排除標(biāo)準(zhǔn)：伴有全身系統(tǒng)性疾病;食物、藥物過(guò)敏史;近1年內(nèi)做過(guò)牙周治療及近2個(gè)月服用過(guò)抗生素、非甾體抗炎藥及免疫抑制劑等藥物，孕婦或使用避孕藥的女性。本研究通過(guò)東莞市石碣醫(yī)院倫理委員會(huì)審查，所有研究對(duì)象均知情同意并簽署知情同意書(shū)。80例慢性牙周炎患者按照隨機(jī)數(shù)字表法分為觀察A組和觀察B組，每組40例。

1.2 治療方法 觀察B組采用常規(guī)牙周基礎(chǔ)治療，包括潔治術(shù)、刮治術(shù)、根面平整術(shù)等常規(guī)治療，雙氧水、生理鹽水反復(fù)交替沖洗牙周袋，并給予抗生素口服。觀察A組在此基礎(chǔ)上，加用自制中藥方劑輔助治療。根據(jù)患者的中醫(yī)辨證分型自擬方劑，基本方自擬：苦參15 g、蒲公英30 g、當(dāng)歸12 g、茯苓15 g、甘草5 g。無(wú)明顯伴證用本方。常見(jiàn)伴證有：風(fēng)火者加銀花、蘆根、薄荷，風(fēng)寒者加細(xì)辛、防風(fēng)、麻黃，虛火、腎虛者加六味地黃丸，氣虛者加補(bǔ)中益氣湯，胃熱者加玉女煎或清胃散，牙齦紅腫出血屬血分前方加重升麻、丹皮用量升透血分郁熱，牙齦不腫偏于氣分者加荊芥、防風(fēng)、細(xì)辛以散氣分之熱，等隨證加減運(yùn)用。1劑/d，水煎服，煎二次服二次，7 d為一療程，共治療2個(gè)療程。

1.3 觀察指標(biāo)與評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)

1.3.1 療效 治療結(jié)束后，進(jìn)行療效評(píng)估。治愈：牙齦充血紅腫消失，牙周袋消失，牙齒穩(wěn)固，恢復(fù)咀嚼功能，X線片顯示牙槽骨吸停止，出現(xiàn)硬骨板;好轉(zhuǎn)：牙齦充血腫脹消失，牙周袋消失，牙齒松動(dòng)度減輕，咀嚼功能有改善，X線片顯示牙槽骨吸收停止;無(wú)效：經(jīng)治療癥狀仍存在，牙周袋存在或牙周溢服，牙松動(dòng)，X線片顯示牙槽骨繼續(xù)吸收。總有效=治愈+好轉(zhuǎn)。

1.3.2 ICAM-1 治療前和治療結(jié)束后，取觀察A組和觀察B組患者患牙周邊深3 mm，長(zhǎng)2 mm的牙齦組織（以不影響治療為準(zhǔn)），對(duì)照組于拔牙時(shí)切除的沿齦緣至根方深長(zhǎng)的正常牙齦組織，4%甲醛溶液固定后進(jìn)行蠟塊包埋，3 μm厚連續(xù)切片。采用Elivsion免疫組織化學(xué)法檢測(cè)對(duì)照組、觀察A組及觀察B組患者治療前后牙齦組織中ICAM-1表達(dá)水平。Elivsion試劑盒與DAB顯色試劑盒均購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司，多克隆兔抗人ICAM-1抗體購(gòu)自丹麥Doka公司。嚴(yán)格按照二步法免疫組化試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。結(jié)果判斷：ICAM-1蛋白染色陽(yáng)性均以細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞膜出現(xiàn)棕黃色顆粒且顏色濃度高于背景非特異性染色為準(zhǔn)。每張切片隨機(jī)選取5個(gè)高倍視野（×400），每個(gè)視野數(shù)100個(gè)細(xì)胞，按陽(yáng)性細(xì)胞所占百分比評(píng)分，陽(yáng)性細(xì)胞<10%為（-），10%～50%為（+），>50%～80%為（++），>80%為（+++），（+）、（++）及（+++）者判定為陽(yáng)性表達(dá)，陽(yáng)性率=陽(yáng)性表達(dá)/總例數(shù)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 21.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用（x±s）表示，比較采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組一般資料比較 觀察A組男16例，女24例;年齡24～66歲，平均（41.59±4.75）歲;中度牙周炎21例，重度牙周炎19例。觀察B組男17例，女23例;年齡25～65歲，平均（40.05±3.16）歲;中度牙周炎22例，重度牙周炎18例。對(duì)照組男16例，女24例;年齡23～64歲，平均（40.82±3.15）歲。三組患者一般資料比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 兩組臨床療效比較 觀察A組的治療總有效率（92.50%）明顯高于觀察B組（72.50%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（字2=5.54，P<0.05），見(jiàn)表1。

2.3 三組牙齦組織中ICAM-1表達(dá)的比較 治療前，觀察A組和觀察B組牙齦組織中ICAM-1表達(dá)均顯著高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），而觀察A組和觀察B組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。治療后，觀察A組牙齦組織中ICAM-1陽(yáng)性表達(dá)率較治療前明顯下降（P<0.05），而觀察B組變化不明顯（P>0.05），觀察A組明顯低于觀察B組（P<0.05）。見(jiàn)表2。

3 討論

在我國(guó)中醫(yī)藥治療牙周炎已經(jīng)有悠久的歷史?！秲?nèi)經(jīng)》認(rèn)為慢性牙周炎與胃火以及腎氣等臟器關(guān)系密切，歸于“牙宣”“齒衄”及“食床”范疇?！端貑?wèn)·上古天真論》和《雜病源流犀燭·口齒唇舌病源流》均證實(shí)了牙齒與腎和胃等臟器相關(guān)的理論[5]。本研究根據(jù)中醫(yī)辨證施治理論，采用自制中藥方劑輔助治療牙周炎，通過(guò)觀察治療前后牙周組織狀況指標(biāo)變化情況對(duì)比，來(lái)評(píng)價(jià)中西結(jié)合治療方案的臨床療效。本研究研究結(jié)果顯示，觀察A組的治療總有效率（92.50%）明顯高于觀察B組（72.50%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），提示中藥方劑結(jié)合西藥牙周基礎(chǔ)治療慢性牙周炎的臨床療效顯著，自制中藥方劑輔助治療能夠彌補(bǔ)西藥的缺陷，治療上以苦參、蒲公英為主清熱解毒，利濕排膿，消腫止痛為主藥;當(dāng)歸、茯苓活血健脾扶正，增強(qiáng)主藥功效為輔佐;甘草調(diào)和諸藥，再加臨床辨證運(yùn)用能夠顯著改善患者的臨床療效，促進(jìn)牙周組織健康恢復(fù)[6-7]。

大量動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及臨床研究顯示，慢性牙周炎發(fā)生發(fā)展可能與局部牙菌斑細(xì)菌、遺傳、免疫、細(xì)胞因子合成和釋放、慢性系統(tǒng)性疾病及異常精神狀態(tài)均存在密切關(guān)系[8-12]。ICAM-1是免疫球蛋白超家族中的一員，介導(dǎo)細(xì)胞間黏附，維持組織正常結(jié)構(gòu)，一旦受到病原菌、內(nèi)毒素等刺激后，ICAM-1可過(guò)度表達(dá)于多種細(xì)胞上，在促進(jìn)炎性細(xì)胞聚集和滯留和損傷修復(fù)等方面起著重要的作用[13-15]。近年來(lái)ICAM-1被認(rèn)為在牙周炎的病理過(guò)程中起著重要的生理病理作用。有研究發(fā)現(xiàn)牙周膜細(xì)胞上ICAM-1的高表達(dá)，誘導(dǎo)炎癥細(xì)胞在牙齦組織中的聚集和滯留，促進(jìn)牙槽骨的吸收，加重牙周組織的破壞[16-17]。在本研究中，觀察到正常牙齦組織中幾乎沒(méi)有ICAM-1的陽(yáng)性表達(dá)，而兩組慢性牙周炎患者治療前牙齦組織中均有不同程度的ICAM-1陽(yáng)性表達(dá)，且兩組慢性牙周炎患者牙齦組織中ICAM-1表達(dá)均顯著高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。證明了ICAM-1在牙周炎發(fā)生過(guò)程中的作用不可忽視，這與其他實(shí)驗(yàn)結(jié)果相符。病原菌、內(nèi)毒素等刺激ICAM-1的合成與釋放，促進(jìn)炎性細(xì)胞聚集和炎癥介質(zhì)的分泌，進(jìn)一步加劇了牙齦的炎癥反應(yīng)和牙齦組織的破壞，從而引起一系列慢性牙周炎的病理變化。這也提示了ICAM-1與作為牙周炎藥物治療的靶點(diǎn)的可能性，在牙周炎發(fā)生發(fā)展過(guò)程中對(duì)ICAM-1進(jìn)行調(diào)控，抑制其異常表達(dá)，有可能為牙周炎的治療提供一條新途徑——抗黏附治療。

本研究觀察了自制中藥方劑輔助治療前后牙齦組織的ICAM-1表達(dá)變化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)治療后，觀察A組牙齦組織中ICAM-1陽(yáng)性表達(dá)率明顯低于觀察B組（P<0.05）。提示牙齦組織中ICAM-1的表達(dá)受到了中藥方劑的抑制，中藥方劑通過(guò)對(duì)全身整體臟腑的調(diào)節(jié)作用，穩(wěn)定牙齦組織中成纖維細(xì)胞，抑制其釋放ICAM-1，進(jìn)而減少炎癥反應(yīng)和組織破壞，促進(jìn)牙齦的健康恢復(fù)[18-19]，這也為臨床使用中藥方劑輔助治療慢性牙周炎提供可靠的理論依據(jù)。

綜上所述，中藥方劑聯(lián)合西藥口服治療能有效提高慢性牙周炎的治療效果;慢性牙周炎患者牙齦組織中存在ICAM-1過(guò)表達(dá)，中藥方劑能抑制ICAM-1的表達(dá)，進(jìn)而減少炎癥反應(yīng)和組織破壞。

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（收稿日期：2018-11-06） （本文編輯：程旭然）