綠原酸包埋工藝優(yōu)化及其包埋物腸胃緩釋性

劉沙彥　彭曙光　羅井清　周志成　王征

摘要：為提高綠原酸的生物利用度，采用多孔淀粉對(duì)綠原酸進(jìn)行包埋，再用卵磷脂對(duì)綠原酸-多孔淀粉包埋物進(jìn)行包裹，形成復(fù)合包埋物。通過單因素和正交試驗(yàn)對(duì)其吸附綠原酸的條件進(jìn)行優(yōu)化，得到最佳包埋條件：芯壁比為 1 ∶ 10，pH值為3，溫度為30 ℃，時(shí)間為2.0 h，包埋效率達(dá)到82.5%，包埋量為82.4 mg/g。通過攪拌將卵磷脂和綠原酸-多孔淀粉包埋物混合形成卵磷脂復(fù)合包埋物，其包埋效率仍為82.5%。分別利用傅里葉紅外、掃描電鏡和紫外掃描對(duì)包埋物進(jìn)行了分析和確證。將2種包埋物分別于人工模擬胃液和腸液環(huán)境中進(jìn)行綠原酸釋放研究，結(jié)果顯示卵磷脂復(fù)合包埋物在人工模擬胃液中的最高釋放率為16.3%，在人工模擬腸液中的最高釋放率為59.2%，而綠原酸-多孔淀粉包埋物在上述2種環(huán)境下的釋放率分別為64.3%和35.2%。表明卵磷脂復(fù)合物能更好地經(jīng)受胃液環(huán)境，到達(dá)腸液中釋放綠原酸，也表明該包埋工藝可以提高綠原酸的生物利用度。

關(guān)鍵詞：綠原酸;包埋;多孔淀粉;卵磷脂;緩釋性

中圖分類號(hào)：S188? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A? 文章編號(hào)：1002-1302（2019）04-0171-05

綠原酸（chlorogenic acid）是一種植物體在有氧呼吸過程中合成的苯丙素類物質(zhì)，是由咖啡酸和奎尼酸縮合而成的，綠原酸的分布廣泛，在食物和中藥材中，如杜仲、金銀花和咖啡豆等均含有綠原酸。綠原酸具有多種功效，其中包括抗菌消炎、抗病毒、清除自由基、降糖、降脂和保肝利膽等[1-2]。彭冰潔等研究發(fā)現(xiàn)，用綠原酸飼喂SD大鼠，能夠顯著減緩高脂飼喂的SD鼠質(zhì)量的增加，并通過調(diào)節(jié)PI3K/Akt途徑、AMPK途徑和胰島素敏感性，改善骨骼肌中糖代謝[3]。此外，高純度的綠原酸也被廣泛應(yīng)用于保健產(chǎn)品、片劑、膠囊藥品和中藥注射藥品等。但由于綠原酸本身性質(zhì)不夠穩(wěn)定，在陽光照射、高溫、潮濕、強(qiáng)酸堿等條件下極易發(fā)生氧化反應(yīng)從而失去活性[4]，這使得綠原酸的生物利用度受到了限制。因此，實(shí)現(xiàn)綠原酸包埋后的可控釋放是提高綠原酸生物利用度的有效途徑之一。

多孔淀粉（porous starch），又名微孔淀粉，是一種新型變性淀粉，是指具有生淀粉酶活力的酶，在低于淀粉糊化溫度下作用于生淀粉后形成的產(chǎn)物[5]。多孔淀粉在本質(zhì)上仍是淀粉，應(yīng)與原淀粉有類似的性能，但與之相比，最明顯的區(qū)別在于多孔淀粉具有十分強(qiáng)大的吸附能力，多孔淀粉具有一種特殊的中空的空間結(jié)構(gòu)，有大量的糖環(huán)羥基存在于這些結(jié)構(gòu)表面，這些羥基是氫原子供體，可以與綠原酸上氧原子形成牢固的氫鍵，綠原酸上的氫原子具有酸性，電子云密度低，所以也是氫供體，而糖環(huán)分子的橋頭氧原子，電負(fù)性較低，電子云密度高，可以與綠原酸中的氫原子形成牢固的氫鍵，如此便形成了一個(gè)穩(wěn)定的六元環(huán)效應(yīng)，從而使得多孔淀粉對(duì)綠原酸有良好的吸附作用[6]。

卵磷脂（lecithin）是人體組織中含量最高的磷脂，是構(gòu)成神經(jīng)組織的重要成分，屬于高級(jí)神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素[7]，又稱為蛋黃素，被譽(yù)為與蛋白質(zhì)、維生素并列的“第三營(yíng)養(yǎng)素”，因其無毒無害，且具有良好的附著性而被廣泛應(yīng)用于食品以及醫(yī)藥研究領(lǐng)域[8]。

盧曉霆等曾利用多孔淀粉、海藻酸鈉和殼聚糖制備綠原酸微膠囊，在一定程度上提高了穩(wěn)定性[9]。本試驗(yàn)擬用多孔淀粉對(duì)綠原酸進(jìn)行包埋吸附，最后再用卵磷脂對(duì)綠原酸-多孔淀粉包埋物進(jìn)行進(jìn)一步的包裹，形成性質(zhì)更加穩(wěn)定的綠原酸-多孔淀粉-卵磷脂復(fù)合包埋物，得到的包埋物包埋率較高且制備工藝較簡(jiǎn)單實(shí)用，可為有效應(yīng)用綠原酸提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1.1.1 材料 綠原酸普通品（純度98%），購(gòu)自源葉生物有限公司（上海）;多孔淀粉，購(gòu)自龍?jiān)伾锟萍加邢薰荆ㄩL(zhǎng)沙）;磷酸二氫鉀，購(gòu)自西隴化工股份有限公司;胃蛋白酶（10 000 NFU/mg）、胰蛋白酶（250 NFU/mg），購(gòu)自合肥博美生物科技有限責(zé)任公司;其他試劑如卵磷脂、鹽酸和氫氧化鈉均為分析純，購(gòu)自國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

1.1.2 人工模擬胃腸液的配制[10] 人工模擬胃液：取9 mL濃HCl，加水約800 mL及胃蛋白酶10 g，充分溶解后，調(diào)節(jié)pH值至1.3，定容至1 000 mL，即為人工模擬胃液。

人工模擬腸液：稱取6.8 g KH2PO4溶于約500 mL水中，另稱取10 g胰蛋白酶加水溶解，定容至1 000 mL，用NaOH調(diào)pH值至7.6，即為人工模擬腸液。

1.2 儀器

ZWM-uT1-10型超純水機(jī)，湖南中沃水務(wù)環(huán)?？萍加邢薰?PL303型電子天平，梅特勒-托利多儀器有限公司（上海）;DTJ-2磁力攪拌器，鼎泰恒盛生化科技設(shè)備制造有限公司;SHZ-D（Ⅲ）型循環(huán)水真空泵，邦西儀器科技有限公司（上海）;Lab-1A-50E型冷凍干燥機(jī)，北京博醫(yī)康實(shí)驗(yàn)儀器有限公司;UV1802G型紫外分光光度計(jì)，天津冠澤科技有限公司;1260型高效液相色譜儀，安捷倫科技有限公司（美國(guó)）;S-3700掃描電子顯微鏡（日本日立公司）;VECTOR-22型傅里葉紅外光譜儀（德國(guó)布魯克公司）。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 精確稱取10 mg綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品，用超純水定容至100 mL容量瓶中，即制成100 μg/mL綠原酸標(biāo)液。分別吸取原液33.3、20.0、16.7、10.0、8.3、6.7 mL定容至100 mL，配制成以下濃度的綠原酸標(biāo)準(zhǔn)液：3、5、6、10、12、15 μg/mL，空白為超純水。利用紫外-可見分光光度計(jì)在327 nm波長(zhǎng)處測(cè)定綠原酸濃度和對(duì)應(yīng)的吸光度[11]。

精確稱取20 mg綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品，在超聲條件下溶解于95%甲醇中，定容至50 mL，制成濃度為400 μg/mL的綠原酸標(biāo)液。分別吸取原液0.5、1.5、2.5、3.5、5.0 mL定容至 10 mL，配制成以下濃度的綠原酸標(biāo)準(zhǔn)液：20、60、100、140、200 μg/mL，經(jīng)0.45 μm濾膜過濾后進(jìn)行高效液相色譜法（HPLC）檢測(cè)。

1.3.2 包埋物的制備

1.3.2.1 多孔淀粉-綠原酸包埋物的制備 精確稱取定量的綠原酸溶于一定pH值的緩沖液中，超聲波控溫處理作用于綠原酸15 min后，加入不同質(zhì)量的多孔淀粉，設(shè)置不同溫度、時(shí)間，在電磁攪拌器上勻速攪拌下作用一段時(shí)間;攪拌反應(yīng)后將混合液抽濾，得到過濾物，在冷凍干燥機(jī)中干燥即得到多孔淀 粉- 綠原酸包埋物的樣品。

1.3.2.2 綠原酸-多孔淀粉-卵磷脂包埋物的制備 取多孔淀粉-綠原酸包埋物樣品溶解于10 mL一定pH值的緩沖液中，再取250 mg卵磷脂，溶解于10 mL乙醇溶液中，超聲混勻后，將其緩慢加入多孔淀粉-綠原酸溶液中，低速反應(yīng)一定時(shí)間后，在50 ℃條件下用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀除去乙醇溶液，將濃縮后的樣品處理后冷凍干燥，即得到綠原酸-多孔淀粉-卵磷脂復(fù)合包埋物。

1.3.3 包埋效率的測(cè)定 先將冷凍干燥得到的樣品取出，稱質(zhì)量后，將其置于燒杯中，先加乙醇溶液溶解卵磷脂，靜置 15～20 min后，抽濾除去乙醇和卵磷脂，隨后取多孔淀粉-綠原酸包埋物溶解到50 mL超純水中，置于電磁攪拌機(jī)上，于高轉(zhuǎn)速、高溫條件（600 r/min以上，50 ℃）下反應(yīng)2 h后，取樣，稀釋100倍左右，于紫外分光光度計(jì)下波長(zhǎng)327 nm處檢測(cè)樣品吸光度，并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算其綠原酸濃度，再根據(jù)公式計(jì)算出包埋效率。

1.3.4 單因素試驗(yàn)對(duì)包埋條件的優(yōu)化

1.3.4.1 包埋效率和包埋量的定義 包埋效率是指包埋進(jìn)去的綠原酸量與總共投入的綠原酸量的比值，計(jì)算公式為：包埋效率=（包埋進(jìn)去的綠原酸量/投入綠原酸總量）×100%。其中，包埋量是指單位壁材中包埋進(jìn)去的綠原酸量;此處包埋進(jìn)去的綠原酸含量為包埋物釋放出來的綠原酸量的最大值，即在高轉(zhuǎn)速高溫條件下釋放2 h時(shí)達(dá)到的最大釋放值。

1.3.4.2 芯壁比對(duì)包埋效率的影響 分別以芯壁比（芯材為綠原酸，壁材為多孔淀粉，芯材與壁材的質(zhì)量比即為芯壁比）為1 ∶ 20、1 ∶ 10、3 ∶ 20、1 ∶ 5，1 ∶ 4，3 ∶ 10反應(yīng)，pH值為4，溫度為35 ℃，時(shí)間為2 h，轉(zhuǎn)速為200 r/min，測(cè)定包埋效率與包埋量。

1.3.4.3 pH值對(duì)包埋效率的影響 調(diào)節(jié)反應(yīng)的pH值分別為2、3、4、5、6，芯壁比為1 ∶ 10，溫度為35 ℃，時(shí)間為2 h，轉(zhuǎn)速為200 r/min，測(cè)定包埋效率。

1.3.4.4 溫度對(duì)包埋效率的影響 分別調(diào)節(jié)電磁攪拌器的溫度為30、35、40、45、50 ℃，使其反應(yīng)，芯壁比為1 ∶ 10。pH值為4，時(shí)間為2 h，轉(zhuǎn)速為200 r/min，測(cè)定包埋效率。

1.3.4.5 時(shí)間對(duì)包埋吸附率的影響 分別調(diào)節(jié)電磁攪拌器的反應(yīng)時(shí)間為1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 h，使其反應(yīng)，芯壁比為2 ∶ 20，pH值為4，溫度為35 ℃，轉(zhuǎn)速為200 r/min，測(cè)定包埋效率。

1.3.5 正交試驗(yàn)法確定最佳包埋組合條件 在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，確定了芯壁比、pH值、溫度、時(shí)間都是對(duì)包埋效率有較大影響的因素，根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果，設(shè)計(jì)了正交試驗(yàn)，即以芯壁比、pH值、溫度、時(shí)間為自變量，包埋反應(yīng)的包埋效率為因變量，作4因素3水平的正交試驗(yàn)L9（34），正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)見表1。

1.3.6 包埋物結(jié)構(gòu)研究

1.3.6.1 掃描電鏡檢測(cè) 分別取適量綠原酸、多孔淀粉、綠原酸和多孔淀粉的物理混合物、綠原酸-多孔淀粉包埋物和綠原酸-多孔淀粉-卵磷脂包埋復(fù)合物均勻涂抹在膠帶上，在真空狀態(tài)下的噴金儀中噴金30 s后，這樣的樣品會(huì)有1層金薄膜層，然后在掃描電鏡中觀察樣品形狀。

1.3.6.2 紅外光譜檢測(cè) 分別取適量的綠原酸、多孔淀粉、綠原酸與多孔淀粉的物理混合物、綠原酸-多孔淀粉包埋物和綠原酸-多孔淀粉-卵磷脂包埋復(fù)合物樣品，用KBr壓片，掃描波數(shù)為600～4 000 cm-1，進(jìn)行紅外線（IR）掃描和分析。

1.3.7 2種包埋物體外模擬腸液和胃液環(huán)境緩釋性的研究 取最優(yōu)條件下制備的綠原酸-多孔淀粉包埋物和綠原酸-多孔淀粉-卵磷脂復(fù)合包埋物，分別加入一定量的模擬胃液和模擬腸液，置于搖床下，在37 ℃、150 r/min的條件下分別反應(yīng)0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 h后，取定量樣液稀釋一定倍數(shù)后在紫外分光光度計(jì)下于327 nm處檢測(cè)綠原酸的濃度（根據(jù)待測(cè)樣液的澄清程度決定是否過濾）。

2 結(jié)果與分析

2.1 4種因素對(duì)包埋效率和包埋量的影響

在包埋過程中，芯材用量如果較少，包埋效率會(huì)更好，但單位壁材的包埋量會(huì)較低。所以本研究中筆者用包埋量和包埋效率來判斷芯壁比對(duì)包埋效果的影響，這里取兩者的乘積。如圖1-A所示，可以很明顯地發(fā)現(xiàn)，在兩者的交點(diǎn)處，包埋效率和包埋量的乘積為最高值，因此選擇最佳包埋芯壁比為 2 ∶ 20，后續(xù)正交試驗(yàn)芯壁比梯度選取3個(gè)最佳芯壁比梯度，即1 ∶ 20、1 ∶ 10、1 ∶ 5。由圖1-B可知，包埋效率先增高后降低，在pH值為4時(shí)達(dá)到最高值，后續(xù)正交試驗(yàn)pH值梯度選取3個(gè)最佳pH值梯度，即3、4、5。由圖1-C可知，隨著溫度升高，包埋效率先增高后降低，在35 ℃時(shí)達(dá)到最高值，因此確定包埋最佳溫度為35 ℃，后續(xù)正交試驗(yàn)溫度梯度選取3個(gè)最佳溫度梯度，即30、35、40 ℃。由圖1-D可知，隨著時(shí)間的增長(zhǎng)，包埋效率先增高后降低，在時(shí)間為1.5 h時(shí)達(dá)到最高值，因此確定包埋最佳時(shí)間為1.5 h，后續(xù)正交試驗(yàn)的pH值梯度選取3個(gè)最佳時(shí)間梯度，即1.0、1.5、2.0 h。

2.2 正交試驗(yàn)法對(duì)綠原酸包埋工藝條件的優(yōu)化結(jié)果

由表2可知，在正交試驗(yàn)中，4種對(duì)綠原酸包埋率影響的因素中，其影響程度的大小為A>B>D>C，即芯壁比>pH值>時(shí)間>溫度。最優(yōu)的組合水平為A2B1C1D3，即芯壁比為1 ∶ 10，pH值為3，溫度為30 ℃，時(shí)間為2.0 h;通過驗(yàn)證試驗(yàn)得出此條件下包埋效率可達(dá)82.5%，包埋量為41.2 mg，即單位質(zhì)量淀粉對(duì)綠原酸的包埋量為82.4 mg/g，包埋效率和包埋量的乘積為33.99，高于各正交試驗(yàn)組（最高為33.2）即當(dāng)包埋的條件為芯壁比為1 ∶ 10、pH值為3、溫度為30 ℃、時(shí)間為2.0 h時(shí)，包埋效果最好。

2.3 掃描電鏡結(jié)果及分析

由圖2-A可以看出，綠原酸單體是個(gè)體單獨(dú)存在的，形狀為片狀、塊狀或條狀。由圖2-B可以看出，多孔淀粉單體是類似球體的形狀，而且球體表面有大量的多孔結(jié)構(gòu)，且多孔不僅僅是在淀粉表面，在多孔的內(nèi)部也有孔隙，這樣的疏松多孔結(jié)構(gòu)，使得比表面積很大，從而使得多孔淀粉具有很強(qiáng)的吸附能力。由圖2-C可以看出，多孔淀粉和綠原酸的物理混合物中既有條狀和塊狀的綠原酸，又有類似球狀且布滿孔洞的多孔淀粉，說明兩者并未反應(yīng)，只是簡(jiǎn)單的物理混合。由圖2-D可以看出，綠原酸-多孔淀粉包埋物中球狀多孔淀粉的孔洞少了很多，而且許多孔洞明顯變淺了，孔洞里面被綠原酸填充，而且多孔淀粉外表面幾乎沒有綠原酸，證明綠原酸在多孔淀粉孔洞的吸附作用下被包埋進(jìn)去。由圖2-E可以看出，綠原酸-多孔淀粉-卵磷脂包埋復(fù)合物中大部分球狀多孔淀粉外部被包裹了1層光滑的油狀物質(zhì)，即卵磷脂，然而還是有少量多孔淀粉外部沒有完全被卵磷脂包裹住，仍然有孔洞結(jié)構(gòu)存在。說明卵磷脂成功將綠原酸-多孔淀粉包埋物進(jìn)行了進(jìn)一步的包裹，從而形成了綠原酸-多孔淀粉-卵磷脂包埋復(fù)合物。

2.4 紅外光譜結(jié)果及分析

由圖3可知，綠原酸具有酚羥基（3 169 cm-1）、苯環(huán)（1 451、1 528、1 598 cm-1）、羰基（1 693 cm-1）的特征吸收峰;多孔淀粉在3 000～3 500 cm-1處出現(xiàn)羥基的伸縮振動(dòng)峰，在 930～1 150 cm-1處出現(xiàn)非對(duì)稱的C—O—C伸縮振動(dòng)特征峰;綠原酸-多孔淀粉包埋物中，雖然保留了多孔淀粉的大部分吸收峰，但綠原酸在500 cm-1到1 750 cm-1之間的大部分特征吸收峰消失了，表明綠原酸與多孔淀粉發(fā)生了相互作用，但包埋物在掃描范圍內(nèi)是沒有出現(xiàn)新的吸收峰的，說明包埋物的形成并沒有生成新的共價(jià)鍵，綠原酸與多孔淀粉保留了各自的化學(xué)結(jié)構(gòu);卵磷脂包埋物也保留了綠原酸-多孔淀粉包埋物的部分吸收峰，但在1 800 cm-1以上的區(qū)域發(fā)生明顯變化，說明卵磷脂包埋物是將綠原酸-多孔淀粉包埋物進(jìn)一步包裹，從而形成綠原酸-多孔淀粉-卵磷脂包埋物復(fù)合物。

2.5 2種包埋物體外模擬腸液和胃液環(huán)境緩釋性的研究結(jié)果

由圖4可知，多孔淀粉包埋物在胃液環(huán)境中的綠原酸釋放效率最高，為64.3%，而加了卵磷脂的包埋復(fù)合物在胃液環(huán)境下的釋放率最高僅有16.3%，說明卵磷脂的添加很好地保護(hù)了在胃液環(huán)境下的包埋物中的綠原酸，使綠原酸在胃液環(huán)境下釋放率明顯降低。

由圖5可知，卵磷脂復(fù)合包埋物在腸液環(huán)境中的釋放率（最高為59.2%）遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于卵磷脂復(fù)合包埋物在胃液中的釋放率（最高僅有16.3%），而且也高于多孔淀粉包埋物在腸道中的釋放率35.2%。說明卵磷脂的添加很好地保護(hù)了在胃液環(huán)境中的包埋物，減少了綠原酸在胃液中的釋放，能夠更好地到達(dá)腸液中進(jìn)行釋放。

3 討論與結(jié)論

綠原酸藥理活性強(qiáng)，在植物界中廣泛存在，但綠原酸本身性質(zhì)不夠穩(wěn)定，易被氧化失活。近年來，隨著科技的進(jìn)步，對(duì)綠原酸進(jìn)行包埋來保護(hù)其穩(wěn)定性的研究已經(jīng)有很多有意義的結(jié)果[12-13]，進(jìn)而較大地提高了綠原酸的生物利用度。本研究通過對(duì)綠原酸包埋工藝的優(yōu)化和模擬包埋物體外緩釋性的研究，得到的綠原酸-多孔淀粉-卵磷脂復(fù)合包埋物具有較好的包埋效果，包埋效率為82.5%，腸胃釋放效果穩(wěn)定。

優(yōu)化單因素試驗(yàn)結(jié)果顯示，隨著芯壁比的增大，包埋效率呈現(xiàn)降低的趨勢(shì)，而包埋量則是隨芯壁比的增大而增大，但是當(dāng)芯壁比為1 ∶ 5時(shí)，再增加芯材的投入，包埋量也不會(huì)增加，證明此時(shí)壁材吸附量已經(jīng)達(dá)到飽和，根據(jù)扈瑞瑞等的方法[11]，以包埋效率和包埋量2個(gè)指標(biāo)來判斷包埋效果，因此本試驗(yàn)的包埋效果也由包埋量和包埋效率兩者的綜合值來判斷，這里取兩者的乘積即圖中交點(diǎn)處為乘積最高值。當(dāng)pH值過低時(shí)，多孔淀粉的結(jié)構(gòu)容易被破壞而導(dǎo)致包埋效率降低;然而在pH值過高時(shí)，綠原酸不穩(wěn)定，溶解度也會(huì)降低，從而使多孔淀粉對(duì)綠原酸的吸附效果降低，導(dǎo)致包埋效率下降，由本研究結(jié)果可知，pH值為4時(shí)最合適的;根據(jù)駱慧敏的研究，多孔淀粉吸附綠原酸是一個(gè)放熱的過程，因此體系反應(yīng)溫度不能過高，為維系整個(gè)反應(yīng)體系一定的分子動(dòng)能，需要維持一定的溫度以保證反應(yīng)的活化能[6]，由本研究結(jié)果可知，在 35 ℃ 時(shí)效果最好。在時(shí)間因素中多孔淀粉吸附時(shí)間進(jìn)程中，時(shí)間如果過長(zhǎng)將會(huì)導(dǎo)致多孔淀粉懸浮液聚集在一起從而使得釋放綠原酸受阻，影響包埋效果。由本研究結(jié)果可知，在 1.5 h 時(shí)包埋效果最佳;吳培龍等研究探討了多孔淀粉作為載體吸附茶多酚的性能，最大吸附量為68.65 mg/g[14]，本試驗(yàn)的包埋量為82.4 mg/g，包埋效果理想。

由于多孔淀粉是淀粉結(jié)構(gòu)，在胃酸的強(qiáng)酸條件下容易被分解[5]，從而導(dǎo)致大量綠原酸被釋放出來，而加了卵磷脂的包埋復(fù)合物在胃液環(huán)境下的釋放率明顯降低，由本研究結(jié)果可知，最高僅有16.3%，說明卵磷脂的添加很好地保護(hù)了在胃液環(huán)境中的包埋物，從而使得綠原酸釋放得很少，因此在胃液環(huán)境中綠原酸-多孔淀粉包埋物的釋放率高于綠原酸-多孔淀 粉- 卵磷脂包埋物。卵磷脂屬于脂溶性物質(zhì)，該類物質(zhì)在胃液的強(qiáng)酸環(huán)境條件下比較穩(wěn)定，不會(huì)被水解，相反，在腸液的中性和弱堿性環(huán)境條件下會(huì)被水解。耿升等用卵磷脂包埋綠原酸，得到綠原酸-卵磷脂復(fù)合物，能達(dá)到較高的包埋量，并極大地提高綠原酸的脂溶性[15]。本試驗(yàn)為了保證綠原酸能穩(wěn)定地通過胃液環(huán)境，到達(dá)腸液環(huán)境，并在腸道穩(wěn)定地緩釋，采用了復(fù)合包埋。結(jié)果也證明，綠原酸-多孔淀粉-卵磷脂復(fù)合包埋物能夠在腸胃環(huán)境下達(dá)到較好可控釋放的效果。但是，在體外模擬腸胃環(huán)境釋放試驗(yàn)中，無論在胃液還是在腸液環(huán)境中，綠原酸并沒有完全被釋放出來。其在體內(nèi)的試驗(yàn)效果，需要深入研究。

本研究通過對(duì)綠原酸包埋工藝的優(yōu)化和模擬包埋物體外緩釋性的研究，得到的綠原酸-多孔淀粉-卵磷脂復(fù)合包埋物具有較好的包埋效果（包埋效率為82.5%）和較穩(wěn)定的腸胃釋放效果。通過掃描電鏡和紅外光譜檢測(cè)都表明，綠原酸被多孔淀粉成功吸附包埋進(jìn)去，卵磷脂也成功地將綠原酸-多孔淀粉包埋物包裹，形成的綠原酸-多孔淀粉-卵磷脂包埋物為復(fù)合包埋物，具有比單層包埋物更好的穩(wěn)定性和腸胃環(huán)境的緩釋性，此外其制備工藝簡(jiǎn)單、廉價(jià)、環(huán)保安全，能夠很好地提高綠原酸生物利用度，為更好地應(yīng)用于食品和醫(yī)藥保健領(lǐng)域提供參考依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

[1]朱 鵬，苗瀟磊，陳 勇. 綠原酸、隱綠原酸和新綠原酸在中性和堿性pH條件下的降解動(dòng)力學(xué)[J]. 藥學(xué)學(xué)報(bào)，2016（1）：122-126.

[2]余國(guó)璽，張 帆，王 樂. 綠原酸對(duì)內(nèi)毒素介導(dǎo)的人牙周膜細(xì)胞生物活性的影響[J]. 牙體牙髓牙周病學(xué)雜志，2016，26（6）：343-347.

[3]彭冰潔，肖麗娟，伍 翔，等. 綠原酸對(duì)高脂飼喂大鼠骨骼肌糖代謝的影響[J]. 中草藥，2015，46（17）：2580-2585.

[4]陳紹華，王亞琴，羅立新. 天然產(chǎn)物綠原酸的研究進(jìn)展[J]. 食品科技，2008（2）：195-199.

[5]繆 銘，徐 忠. 生物法制備多孔淀粉及其性質(zhì)研究[C]//第二屆中國(guó)浙江學(xué)術(shù)節(jié)——食品安全監(jiān)管與法制建設(shè)國(guó)際研討會(huì)暨第二屆中國(guó)食品研究生論壇論文集. 紹興，2005.

[6]駱慧敏. 多孔淀粉對(duì)茶多酚的吸附熱力學(xué)及復(fù)合物在卷煙降害中的應(yīng)用研究[D]. 合肥：安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)，2015.

[7]徐井水. 大豆卵磷脂微膠囊化及其性質(zhì)研究[D]. 南昌：南昌大學(xué)，2010.

[8]李 濤，王天志. 卵磷脂的研究進(jìn)展[J]. 中藥材，2002，25（10）：752-756.

[9]盧曉霆，許中暢，王田田，等. 玉米多孔淀粉-海藻酸鈉-殼聚 糖- 葡萄多酚緩釋微膠囊的制備及表征[J]. 中草藥，2016，47（13）：2252-2259.

[10]何小解，盧向陽，易著文，等. 模擬人體胃腸道環(huán)境對(duì)兒茶素穩(wěn)定性的影響[J]. 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2005，31（5）：69-71.

[11]扈瑞瑞，申國(guó)明，高 林，等. 煙草綠原酸納米脂質(zhì)體的制備工藝及其穩(wěn)定性研究[J]. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報(bào)，2017，19（4）：128-137.

[12]盧 琪，曹少謙，呂思伊，等. 綠原酸酵母細(xì)胞微膠囊工藝研究[J]. 食品科學(xué)，2010，31（10）：137-141.

[13]駱慧敏，寧 敏，徐迎波，等. 多孔淀粉對(duì)茶多酚的吸附性能及其復(fù)合物抗氧化能力的研究[J]. 茶葉科學(xué)，2015（5）：473-480.

[14]吳培龍，張黎明，楊 鑫，等. 玉米多孔淀粉對(duì)茶多酚的吸附性能研究[J]. 現(xiàn)代食品科技，2010，26（9）：938-941.

[15]耿 升，馬宇祥，莫海珍，等. 綠原酸與卵磷脂復(fù)合物的理化性質(zhì)及其抗氧化活性研究[J]. 現(xiàn)代食品科技，2015（5）：124-129. 何彥虎，武傳宇，童俊華，等. 基于專家系統(tǒng)的穴盤苗品種識(shí)別算法設(shè)計(jì)與試驗(yàn)[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2019，47（4）：176-181.