少弱精子癥患者精液常規(guī)參數(shù)與精子形態(tài)特點(diǎn)的分析研究

蔣丹丹， 張盼盼， 西爾艾力·買買提， 毛吾蘭·買買提依明， 白生賓， 阿地力江·伊明

(新疆醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院， 烏魯木齊 830011)

少精子癥是指禁欲2～7 d，精子濃度小于15×106個(gè)/mL，弱精子癥是指禁欲2～7 d，前向運(yùn)動精子率<32%或前向運(yùn)動+非前向運(yùn)動精子率<40%，當(dāng)兩者同時(shí)發(fā)生稱為少弱精子癥[1]。資料顯示，約20%的育齡夫婦受到不育不孕的困擾，其中男性因素占50%[2]。精液異常導(dǎo)致的男性不育約占70%～80%[3]，其中少精子癥(oligozoospermia)、弱精子癥(asthenozoospermia)、少弱精子癥(oligoasthenozoospermia)分別占男性不育的10%、30%和40%[4-6]，由于精液異常導(dǎo)致男性不育的患者數(shù)量呈逐年上升趨勢。精液質(zhì)量分析是評估男性生殖功能的一項(xiàng)重要指標(biāo)，為少、弱及少弱精子癥的臨床診斷和治療提供了重要依據(jù)[7]。本研究采用計(jì)算機(jī)輔助精液質(zhì)量分析系統(tǒng)(computer assisted sperm analysis，CASA)對411例男性精液進(jìn)行常規(guī)檢查，對檢查結(jié)果進(jìn)行整理分析，以探究少、弱和少弱精子癥患者精液常規(guī)參數(shù)與精子形態(tài)改變特征以及精液質(zhì)量的情況，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇2017年7月-2018年4月在新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院產(chǎn)前診斷中心就診的411例男性為研究對象，年齡21～50歲，平均年齡(32.44±5.50)歲。

1.2 儀器與試藥WLJY-9000型彩色精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)(北京偉力儀器公司)，HH-W420型恒溫水浴鍋(金壇市白塔新寶儀器廠)，MACRO型計(jì)數(shù)板(南京凱爾儀器有限公司)，精子活體染色液(索萊寶公司)。

1.3 測定方法

1.3.1 精液樣本外觀、體積、pH值等指標(biāo)的測定方法 研究對象禁欲2～7 d，采用手淫法收集精液，肉眼觀察精液顏色，記錄標(biāo)本接收時(shí)間及精液體積。標(biāo)本置于37℃恒溫水浴箱中，液化后觀察液化狀態(tài)，同時(shí)記錄液化時(shí)間，觀察精液黏稠度情況，采用精密pH試紙測定各組精液pH值。

1.3.2 精子活力、密度及存活率的測定方法 取“1.3.1”項(xiàng)下液化后的精液樣本5 μL，使用WLJY-9000型彩色精子質(zhì)量分析系統(tǒng)配合載物臺溫控儀以及MACRO 計(jì)數(shù)板對所有標(biāo)本進(jìn)行前向運(yùn)動的精子個(gè)數(shù)及比例、非前向運(yùn)動的精子個(gè)數(shù)及比例、不活動的精子個(gè)數(shù)及比例、精子總數(shù)、精子密度的檢測。精子存活率的測量采用伊紅-苯胺黑染色法，取50 μL精液與等體積的伊紅-苯胺黑懸液混合，制成涂片后油鏡下觀察并計(jì)數(shù)染色和非染色的精子，計(jì)算非染色精子所占的百分率。

1.3.3 精子形態(tài)的測定方法 采用CASA系統(tǒng)檢測并計(jì)算各組精子平均大小、平均周長、正常個(gè)數(shù)、畸形個(gè)數(shù)、頭部畸形、體部畸形、尾部畸形、混合畸形個(gè)數(shù)及比例等。

1.4 分組方法根據(jù)《WHO 人類精液檢查與處理實(shí)驗(yàn)室手冊》[1](第5版)判斷標(biāo)準(zhǔn)分為正常組：前向運(yùn)動精子率≥32% 或前向運(yùn)動+非前向運(yùn)動精子率≥40%，精子密度≥15×106個(gè)/mL；少精子癥組：精子密度<15×106個(gè)/mL；弱精子癥組：前向運(yùn)動精子率<32%或前向運(yùn)動+非前向運(yùn)動精子率<40%；少弱精子癥組：前向運(yùn)動精子率<32%或前向運(yùn)動+非前向運(yùn)動精子率<40%，并且精子密度<15×106個(gè)/mL。

2 結(jié)果

2.1 各組精液前向運(yùn)動精子率、前向+非前向運(yùn)動精子率、精子總數(shù)、精子密度的比較根據(jù)測定結(jié)果將411例研究對象分為正常組(106例)、少精子癥組(105例)、弱精子癥組(150例)及少弱精子癥組(50例)。與正常組比較，少精子癥組、弱精子癥組和少弱精子癥組前向運(yùn)動精子率、前向+非前向運(yùn)動精子率、精子密度降低，少精子癥組、少弱精子癥組精子總數(shù)降低，弱精子癥組精子總數(shù)升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與少精子癥組比較，弱精子癥組和少弱精子癥組前向運(yùn)動精子率、前向+非前向運(yùn)動精子率降低，弱精子癥組的精子總數(shù)、精子密度升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與弱精子癥組比較，少弱精子癥組前向+非前向運(yùn)動精子率、精子總數(shù)、精子密度均降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 各組精液前向運(yùn)動精子率、前向+非前向運(yùn)動精子率、精子總數(shù)、精子密度比較

注：與正常組比較，*P<0.05； 與少精子癥組比較，#P<0.05； 與弱精子癥組比較，△P<0.05。

2.2 各組精液相關(guān)指標(biāo)的比較正常組與少精子癥組的精液外觀以灰白色為主，弱精子癥組、少弱精子癥組的精液外觀以乳白色為主。與正常組比較，弱精子癥組和少弱精子癥組的精液外觀有差異，少精子癥組、弱精子癥組和少弱精子癥組的精液體積、精液不液化出現(xiàn)率增加，精子存活率降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。各組間精液黏稠度、pH值比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。與少精子癥組比較，弱精子癥組和少弱精子癥組精子存活率降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與弱精子癥組比較，少弱精子癥組精子存活率降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2、3。

表2 各組精液外觀、液化狀態(tài)、黏稠度的比較/例(%)

表3 各組精液標(biāo)本體積、pH值、存活率的比較

注： 與正常組比較，*P<0.05； 與少精子癥組比較，#P<0.05； 與弱精子癥組比較，△P<0.05。

2.3 各組精子形態(tài)的比較與正常組相比，少精子癥組、弱精子癥組和少弱精子癥組的精子平均大小、平均周長、正常個(gè)數(shù)、尾部畸形個(gè)數(shù)減小，精子畸形個(gè)數(shù)、精子頭部畸形個(gè)數(shù)、體部畸形個(gè)數(shù)和混合畸形個(gè)數(shù)增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與少精子癥組相比，少弱精子癥組的正常個(gè)數(shù)、尾部畸形個(gè)數(shù)減少，頭部畸形、體部畸形個(gè)數(shù)增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表4。

表4 各組精子形態(tài)的比較

注：*與正常組比較，*P<0.05； 與少精子癥組比較，#P<0.05。

3 討論

少、弱及少弱精子癥是男性生殖系統(tǒng)的常見疾病，是男性不育癥的主要病因，精液質(zhì)量是診斷、治療和評估男性生育能力的重要依據(jù)。精液質(zhì)量除精子密度和活力外，還包括精液體積、液化狀態(tài)、pH值等內(nèi)容，是臨床對少、弱及少弱精子癥和男性不育癥的首要檢測項(xiàng)目[8]。目前CASA是比較普遍的檢測男性精液質(zhì)量的方法，具有客觀、操作簡便、重復(fù)性好，減少人工誤差等優(yōu)點(diǎn)[9]。

健康男性液化精液多呈灰白色，隨著禁欲時(shí)間、精子濃度的改變，顏色也有不同，弱精及少弱精子癥患者精液外觀與健康人群存在一定差異。正常男性一次排精量在2～5 mL，過多或過少都是疾病的表現(xiàn)，本研究結(jié)果提示少、弱及少弱精子癥患者精液體積增多的原因與附屬腺出現(xiàn)炎癥或炎性滲出相關(guān)。由于精液不液化導(dǎo)致射精后精子不能通過宮頸到達(dá)輸卵管與卵子結(jié)合，是導(dǎo)致男性不育的重要原因[10]。精子存活率作為評估精液質(zhì)量的一個(gè)重要參數(shù)[11]，可以反映精子的生存能力和質(zhì)量優(yōu)劣，精子存活率降低可以降低受精能力[12]，本研究結(jié)果表明少、弱及少弱精子癥對存活率的影響程度存在差異。精子具有異質(zhì)性，即使精液正常的男性也存在異常形態(tài)的精子，且精子形態(tài)與精子活力、精子密度之間也存在密切的關(guān)系[13]。精子形態(tài)異?？蓪?dǎo)致精子膜破壞、精子代謝異常、活力減弱，導(dǎo)致精子質(zhì)量下降，因此精子形態(tài)檢測可作為評價(jià)精液質(zhì)量及男性生育力高低的指標(biāo)[14-15]。

綜上所述，本研究通過對精液常規(guī)和形態(tài)學(xué)改變的檢測與分析，發(fā)現(xiàn)精液常規(guī)檢測與精子形態(tài)學(xué)改變特征可有效評價(jià)精液質(zhì)量，為臨床診治和療效提供重要參考。