辣木果胚油的體外抗氧化活性研究

殷春雁 劉自單 馬瑞菊 劉超

摘? 要：辣木果胚油來(lái)源于辣木籽、翼籽辣木籽，該文通過(guò)不同評(píng)價(jià)方法測(cè)定辣木果胚油的體外抗氧化活性。即通過(guò)測(cè)定ABTS（2，2-聯(lián)氮-二-（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）-二銨鹽）自由基清除能力、DPPH（1，1-二苯基-2-苦肼基）自由基清除能力和二價(jià)鐵離子的螯合能力來(lái)判斷辣木果胚油的體外抗氧化活性，辣木果胚油的體外抗氧化活性在一定范圍內(nèi)隨濃度的增大而增加。結(jié)果如下：當(dāng)辣木果胚油的濃度為16 mg/mL時(shí)，對(duì)ABTS自由基清除能力為78.58%;當(dāng)辣木果胚油的濃度為20 mg/mL時(shí)，對(duì)DPPH自由基清除能力為51.18%;當(dāng)辣木果胚油的濃度為10 mg/mL時(shí)，對(duì)二價(jià)鐵離子的螯合能力為70.03%。

關(guān)鍵詞：辣木果胚油;抗氧化活性;ABTS;1，1-二苯基-2-三硝基苯肼

中圖分類號(hào)：Q946? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

辣木（Moringa oleifera）屬于辣木科（Moringaceae）辣木屬（Moringa Adans.）的熱帶落葉木本蔬菜及油料植物，樹(shù)齡約為20a，全世界約有13個(gè)辣木品種。

辣木（Moringa oleifera）葉片和果莢富含多種礦物質(zhì)、維生油、蛋白質(zhì)、氨基酸、辣木多肽和脂肪等有效成分，脂肪主要集中在種子上，其中含有較高的不飽和脂肪酸。辣木活性成分具有抗氧化和保護(hù)肝臟、降血糖、降血脂和血壓、抗菌消炎等保健功效。辣木果胚油是一款來(lái)源于辣木籽、翼籽辣木籽提取的精油，具有多種活性成分。該文對(duì)辣木果胚油的體外抗氧化活性進(jìn)行深入探討。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 試劑與儀器

辣木果胚油，10 mL，紅河谷辣木產(chǎn)業(yè)有限公司;2，2-聯(lián)氮-二-（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）-二銨鹽（ABTS），1 g，上海伊卡生物科技有限公司;1，1-二苯基-2-苦肼基（DPPH），1 g，上海源葉生物科技有限公司;亞鐵嗪，1 g，Sigma;過(guò)硫酸鉀，500 g，天津市風(fēng)船化學(xué)試劑科技有限公司;維生素E，100 g，上海伊卡生物科技有限公司;乙二胺四乙酸二鈉，100 g，上海伊卡生物科技有限公司;氯化亞鐵，500 g，天津市風(fēng)船化學(xué)試劑科技有限公司;無(wú)水乙醇，500 mL，天津市風(fēng)船化學(xué)試劑科技有限公司。UV-1800 PC型紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)，上海美譜達(dá)儀器有限公司;FA2004型電子天平，上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司;HH-4型水浴鍋，金壇市雙捷實(shí)驗(yàn)儀器廠;SK-1型快速混勻器，常州丹瑞實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備有限公司;實(shí)驗(yàn)室超純水機(jī)，重慶圣德利醫(yī)療器械研究有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 ABTS自由基清除能力

7 mM ABTS溶液：稱取38.41 mg ABTS溶解在5 mL去離子水中;2.45 mM過(guò)硫酸鉀：稱取6.61 mg過(guò)硫酸鉀溶解在5 mL去離子水中;2種溶液混合均勻，避光條件下放置16 h～24 h（讓其充分氧化）。使用時(shí)用無(wú)水乙醇按1∶80稀釋使用，現(xiàn)配現(xiàn)用。取稀釋好的ABTS溶液4 mL，加入80 μL用無(wú)水乙醇溶解的辣木果胚油（MOP）溶液，濃度為2 mg/mL、4 mg/mL、

8 mg/mL、12 mg/mL、16 mg/mL，混勻在37 ℃水浴放置10 min，測(cè)定734 nm處的吸光度。維生素E做陽(yáng)性對(duì)照。平行3次，空白不加樣品，以等量的無(wú)水乙醇代替，辣木果胚油抗氧化率計(jì)算如下：

其中As代表樣品的吸光度，A代表空白的吸光度。

1.2.2 DPPH自由基清除能力測(cè)定

取辣木果胚油（MOP）溶液2 mL，濃度為1.0 mg/mL、2.0 mg/mL、5.0 mg/mL、10.0 mg/mL、20.0 mg/mL，加入1 mL用無(wú)水乙醇溶解的0.2 mM的DPPH溶液，混勻放置30 min，測(cè)定517 nM處的吸光度。維生素E做陽(yáng)性對(duì)照。平行3次，空白不加樣品，以等量的無(wú)水乙醇代替，辣木果胚油抗氧化率計(jì)算如下：

其中As代表樣品的吸光度，A代表空白的吸光度。

1.2.3 二價(jià)鐵離子的螯合能力測(cè)定

配制1.0 mg/mL、2.0 mg/mL、4.0 mg/mL、5.0 mg/mL、10.0 mg/mL的辣木果胚油（MOP）溶液各取1 mL，加入3.7 mL無(wú)水乙醇，再加入2.0 mM的FeSO4·7H2O溶液0.1 mL，混勻25 ℃下水浴60 min，加入5 mM的亞鐵嗪溶液0.2 mL，混勻25 ℃下水浴10 min，在562 nm處測(cè)定吸光度。EDTA做陽(yáng)性對(duì)照。平行3次，空白不加樣品，以等量的無(wú)水乙醇代替，辣木果胚油對(duì)二價(jià)鐵離子的螯合能力計(jì)算如下：

其中As代表樣品的吸光度，A代表空白的吸光度。

2 結(jié)果與討論

2.1 ABTS自由基清除能力

2，2-聯(lián)氮-二-（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）-二銨鹽（ABTS）是以水溶性的自由基引發(fā)劑為顯色劑，ABTS經(jīng)過(guò)硫酸鉀氧化生成穩(wěn)定的藍(lán)綠色陽(yáng)離子ABTS自由基，ABTS法是用于體外檢測(cè)物質(zhì)總抗氧化能力的方法。

隨著辣木果胚油濃度（2 mg/mL～16 mg/mL）的增加，當(dāng)濃度達(dá)到16 mg/mL時(shí)，辣木果胚油對(duì)ABTS自由基的清除能力達(dá)到78.58%。

2.2 DPPH自由基清除能力

DPPH又稱1，1-二苯基-2-三硝基苯肼，是一種很穩(wěn)定的氮中心的自由基，常用于抗氧化成分的體外抗氧化性評(píng)價(jià)。DPPH法于1958年提出，依據(jù)是DPPH自由基有單電子，在517 nm處有一強(qiáng)吸收，其醇溶液顯紫色。

辣木果胚油對(duì)DPPH自由基的清除能力隨辣木果胚油濃度的增大而增強(qiáng)。當(dāng)辣木果胚油的濃度達(dá)到20 mg/mL時(shí)，其清除DPPH自由基的能力達(dá)到51.18%。這一結(jié)果說(shuō)明辣木果胚油具有較強(qiáng)的清除DPPH自由基的能力。

2.3 二價(jià)鐵離子的螯合能力

二價(jià)鐵離子螯合能力的方法用亞鐵嗪作為顯色劑，亞鐵嗪是測(cè)定Fe2+的一種特效顯色劑。原理是抗氧化物質(zhì)被認(rèn)為具有螯合金屬離子的能力，從而避免發(fā)生芬頓反應(yīng)產(chǎn)生自由基。當(dāng)最后加入亞鐵嗪后，未被螯合的二價(jià)鐵離子與亞鐵嗪形成紫紅色的顯色團(tuán)，在562 nm處有強(qiáng)吸收，根據(jù)吸光度的大小可以間接的反映抗氧化物質(zhì)的抗氧化能力。

辣木果胚油對(duì)二價(jià)鐵離子的螯合能力隨辣木果胚油濃度的增大而增強(qiáng)。當(dāng)辣木果胚油的濃度達(dá)到10 mg/mL時(shí)，其螯合能力達(dá)到70.03%。這一結(jié)果說(shuō)明辣木果胚油具有較強(qiáng)的螯合二價(jià)鐵離子的能力。

EDTA是很好的螯合劑，可以被廣泛應(yīng)用。辣木果胚油螯合能力為70.03%，表明它是一種很好的抗氧化劑，有望在其他方面的應(yīng)用。

3 結(jié)論

（1）當(dāng)辣木果胚油的濃度為16 mg/mL時(shí)，對(duì)ABTS自由基清除能力為78.58%。

（2）當(dāng)辣木果胚油的濃度為20 mg/mL時(shí)，對(duì)DPPH自由基清除能力為51.18%。

（3）當(dāng)辣木果胚油的濃度為10 mg/mL時(shí)，對(duì)二價(jià)鐵離子的螯合能力為70.03%。

參考文獻(xiàn)

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