低氧運(yùn)動(dòng)對(duì)營(yíng)養(yǎng)性肥胖大鼠骨骼肌AMPK-PGC-1α的影響

吳菊花 鐘紅梅 楊亞南 趙芳芳 徐國(guó)琴 翁錫全 林文弢，

1 廣西科技大學(xué)體育學(xué)院（柳州545006）

2 廣西科技大學(xué)鹿山學(xué)院 3 廣東省足球運(yùn)動(dòng)中心

4 吉林大學(xué)珠海學(xué)院 5廣州體育學(xué)院

肥胖已成為現(xiàn)今社會(huì)較常見(jiàn)的一種營(yíng)養(yǎng)代謝性疾病，其患病人群逐漸增加，并可能伴隨多種并發(fā)癥，例如冠心病、代謝綜合癥、抑郁等[1，2]。一般而言，低熱量飲食攝入加上規(guī)律性運(yùn)動(dòng)是肥胖者最常見(jiàn)的減肥方式，然而運(yùn)動(dòng)也可能引起食欲增強(qiáng)。許多研究表明，與居住平原地區(qū)相比，生活在高海拔地區(qū)的人體內(nèi)脂肪比例更低。因此，低氧療法（包括低氧暴露或低氧運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練）逐漸被推薦為一種治療和預(yù)防肥胖的方法，可通過(guò)抑制食欲，增加基礎(chǔ)代謝率和脂肪氧化，并盡量減少副作用。已有研究表明低氧環(huán)境可有效控制體重，降低血脂[3，4]，馮連世等的研究顯示了低氧環(huán)境下進(jìn)行耐力運(yùn)動(dòng)，可顯著降低肥胖青少年的體重及體脂[5]。此外，還有學(xué)者發(fā)現(xiàn)低氧環(huán)境因素可有效增強(qiáng)運(yùn)動(dòng)提高能量消耗的作用效果[6]?？梢?jiàn)，無(wú)論低氧暴露或低氧結(jié)合耐力運(yùn)動(dòng)，均可改善機(jī)體肥胖程度，影響機(jī)體能量代謝，而低氧與運(yùn)動(dòng)結(jié)合對(duì)減肥的作用效果可能更佳。腺苷酸活化蛋白激酶（AMP-activated protein kinase，AMPK）是骨骼肌的能量感受器[7]，研究發(fā)現(xiàn)低氧或運(yùn)動(dòng)均可促進(jìn)AMPK表達(dá)上調(diào)[8，9]。在線粒體生物發(fā)生信號(hào)通路或骨骼肌脂肪酸氧化代謝中，PGC-1α（peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1-alpha）起重要作用，研究表明有氧耐力運(yùn)動(dòng)可上調(diào)骨骼肌中PGC-1α的表達(dá)[10]。AMPK 作為PGC-1α的重要調(diào)節(jié)因子，可活化PGC-1α，增強(qiáng)骨骼肌線粒體生物合成，并促進(jìn)脂肪酸氧化[11]。目前，學(xué)者們的研究多著眼于常氧狀態(tài)下運(yùn)動(dòng)對(duì)機(jī)體AMPK-PGC-1α的影響，而低氧結(jié)合有氧耐力運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠骨骼肌AMPKPGC-1α的影響作用未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。鑒于此，本研究觀察低氧運(yùn)動(dòng)干預(yù)對(duì)肥胖大鼠骨骼肌AMPK、PGC-1α蛋白表達(dá)的影響，進(jìn)而探討低氧運(yùn)動(dòng)影響骨骼肌脂肪酸氧化代謝的機(jī)理，為低氧運(yùn)動(dòng)應(yīng)用于肥胖人群減控體重提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)器材

Western blotting 所用抗體：抗PGC-1α（ab54481，ABCAM 公司），抗AMPKα（2532s ，cell signaling 公司），抗PhosphoPlus? AMPKα（Thr172）（2531s ，cell signaling 公司），抗GAPDH（ab8245，ABCAM 公司），抗HRG-rabbit（7074s，cell signaling 公司）。其他主要試劑：PMSF 蛋白抑制酶（北京康為世紀(jì)生物科技有限公司），Pierce ECL 發(fā)光液（Thermo Scientific），脫脂奶粉（BD 公司），血脂四項(xiàng)（南京建成生物工程研究所有限公司），血糖試紙（京都血糖試紙），剩余試劑均為分析純（廣州齊云生物技術(shù)有限公司）。主要儀器：低氧分壓系統(tǒng)（美國(guó)Hypoxico公司），玻璃勻漿器（廣州化學(xué)試劑廠），高速低溫離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠），半自動(dòng)生化分析儀（美國(guó)Rayto 公司），便攜式血糖儀（日本京都公司），Bio-rad 電泳儀（兩塊膠）及轉(zhuǎn)膜儀（美國(guó)Bio-rad 公司），萬(wàn)分之一電子天平（梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司），Image J圖像分析軟件。

1.2 構(gòu)建營(yíng)養(yǎng)性肥胖大鼠模型

清潔級(jí)健康雄性大鼠SD 大鼠[SCXK（粵）2011-0015]100只，由南方醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，體重170～220 g。動(dòng)物分籠飼養(yǎng)，5只/籠，自然光照節(jié)律，自由攝食、飲水，溫度22～24°C，濕度40%～55%，大鼠隨機(jī)分為普通膳食組（CON，20 只）和高脂膳食造模組（DIO，80 只），并每天固定時(shí)間稱量食物，每周固定時(shí)間稱重，并做記錄。普通膳食為國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)嚙齒類動(dòng)物干燥飼料（南方醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供）；高脂膳食：蔗糖20%，豬油15%，膽固醇1.2%，膽酸鈉0.2%，酪蛋白10%，磷酸氫鈣0.6%，石粉0.4%，預(yù)混料0.4%，基礎(chǔ)飼料52.2%[廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，SCXK（粵）2013-0002]，高脂膳食供能比：蛋白質(zhì)17.5%，脂肪37%，碳水化物45.5%。根據(jù)肥胖易感模型篩選規(guī)律，高脂膳食組大鼠的體重超過(guò)普通膳食組大鼠體重的20%即可作為營(yíng)養(yǎng)性肥胖大鼠[12]。持續(xù)性喂養(yǎng)7周后，從CON組和DIO組分別隨機(jī)挑選10只和18只，眼眶取血，測(cè)其血糖、血脂，結(jié)合大鼠體重、BMI[13][BMI=體重（kg）/體長(zhǎng)2（m2）]，進(jìn)而評(píng)價(jià)造模效果。本研究數(shù)據(jù)顯示，高脂膳食造模組79.6%成功誘導(dǎo)大鼠的營(yíng)養(yǎng)性肥胖。

1.3 動(dòng)物分組及取材

營(yíng)養(yǎng)性肥胖大鼠模型建立成功后，高脂膳食造模組（60 只）分為6 組，每組10 只：常氧高脂膳食安靜組（NHQ）、常氧高脂膳食運(yùn)動(dòng)組（NHE）、16.3%低氧高脂膳食安靜組（HGQ1）、16.3%低氧高脂膳食運(yùn)動(dòng)組（HGE1）、13.3%低氧高脂膳食安靜組（HGQ2）、13.3%低氧高脂膳食運(yùn)動(dòng)組（HGE2），持續(xù)干預(yù)8 周，均進(jìn)行高脂膳食飼養(yǎng)。運(yùn)動(dòng)組則進(jìn)行8周跑臺(tái)耐力訓(xùn)練，適應(yīng)1周后，均以20 m/min、40 min/d、5 d/w、跑臺(tái)坡度為0，進(jìn)行耐力運(yùn)動(dòng)。本實(shí)驗(yàn)采用美國(guó)Hypoxico公司制造的低氧分壓系統(tǒng)（HTS），構(gòu)建人工常壓低氧環(huán)境。末次訓(xùn)練24 h后處死大鼠，大鼠主動(dòng)脈取血，3000 r/min離心10 min，收集血清；取一側(cè)腓腸肌置液氮速凍，后于-80°C超低溫冰箱保存，待測(cè)。

1.4 血脂、血糖含量測(cè)定

半自動(dòng)生化儀測(cè)定血脂四項(xiàng)（南京建成公司試劑盒）：總膽固醇（COD-PAP 法）、高密度脂蛋白膽固醇（磷鎢酸鎂沉淀法）、低密度脂蛋白膽固醇（聚乙烯硫酸沉淀法）、甘油三酯（GPO-PAP 法）。京都血糖儀測(cè)定血糖含量（京都血糖試紙）。

1.5 Western blotting 法測(cè)定蛋白PGC-1α、AMPK 及pAMPK

取100 mg 腓腸肌，加入1 ml RIPA 裂解液和10 μl的PMSF蛋白抑制酶，置于冰上，使用玻璃勻漿器進(jìn)行人工研磨并裂解20 min；4°C ，12000 r/min 離心10 min，取上清，BCA 法測(cè)定蛋白濃度，隨后保存于-20°C 冰箱待用。BCA法測(cè)定蛋白濃度后與上樣緩沖液于沸水中煮5 min，使蛋白變性。采用5%濃縮膠、12%分離膠電泳，濕轉(zhuǎn)法將其轉(zhuǎn)至PVDF膜；5%脫脂奶粉封閉2 h，一抗4°C 孵育過(guò)夜[一抗（PGC-1α、AMPKα、pAMPKα）比例：1∶1000；GAPDH：1∶3000]；次日TBST緩沖液清洗，HRP標(biāo)記二抗室溫孵育2 h（山羊抗兔IgG/HRP：1∶3000）。TBST清洗后，暗室ECL發(fā)光，X光片顯影定影，并進(jìn)行掃描。Imagine J 讀取蛋白條帶的積分灰度值，PGC-1α的Western blotting結(jié)果用目的蛋白積分灰度值與內(nèi)參蛋白積分灰度值的比值表示，AMPK磷酸化程度則用pAMPK灰度值/AMPK灰度值表示。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

采用SPSS17.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，結(jié)果用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）。GraphPad Prism 5 進(jìn)行數(shù)理統(tǒng)計(jì)及圖像生成，構(gòu)建營(yíng)養(yǎng)性肥胖大鼠模型時(shí)，CON組與DIO 組（指標(biāo)：體重、體長(zhǎng)、BMI、BG、TG、TC、LDL-c、HDL-c）兩組之間采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，CON 組與DIO組兩組間的攝食量采用重復(fù)測(cè)量方差分析；采取運(yùn)動(dòng)與低氧干預(yù)時(shí)，以運(yùn)動(dòng)和O2濃度作為影響因素，進(jìn)行兩因素（2×3）方差分析，分析每個(gè)因素的主效應(yīng)以及兩因素間的交互作用，以P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 高脂誘導(dǎo)營(yíng)養(yǎng)性肥胖模型構(gòu)建成功

7周高脂膳食飼養(yǎng)后，DIO組大鼠形態(tài)學(xué)變化表現(xiàn)為體重、BMI、體長(zhǎng)顯著高于CON 組（P＜0.01，表1），且體重增長(zhǎng)超過(guò)CON 組大鼠20%；血液生化相關(guān)指標(biāo)表現(xiàn)為血糖（BG）、甘油三脂（TG）、總膽固醇（TC）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-c）含量顯著增加（P＜0.01，P＜0.05），而高密度脂蛋白膽固醇（HDL-c）略有降低，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（表2）。兩組大鼠攝食量無(wú)顯著性差異（圖1）。結(jié)果提示高脂膳食誘導(dǎo)的營(yíng)養(yǎng)性肥胖大鼠模型建立成功[14]。

表1 7周末兩組大鼠體重、體長(zhǎng)和BMI比較

表2 兩組大鼠血脂及血糖比較（mmol/l）

圖1 建模期兩組大鼠攝食量比較

2.2 低氧運(yùn)動(dòng)干預(yù)后營(yíng)養(yǎng)性肥胖大鼠骨骼肌pAMPK/AMPK、PGC-1α的蛋白表達(dá)

圖2顯示，在AMPK 磷酸化程度方面，HGE1 組高于NHQ 組（P＜0.05），而HGE2 組顯著性高于NHQ 組、NHE 組、HGQ1 組（P＜0.01）。而在PGC-1α蛋白表達(dá)方面，HGE2 組顯著性高于NHQ 組（P＜0.01），NHE 組和HGE1 組也高于NHQ 組（P＜0.05）；HGE2 組高于NHE組（P＜0.05）；HGE2 組和HGE1 組均高于HGQ1 組（P＜0.01或P＜0.05）。

圖2 低氧運(yùn)動(dòng)干預(yù)后營(yíng)養(yǎng)性肥胖大鼠骨骼肌pAMPK/AMPK、PGC-1α蛋白表達(dá)

2.3 低氧運(yùn)動(dòng)干預(yù)后營(yíng)養(yǎng)性肥胖大鼠骨骼肌pAMPK/AMPK、PGC-1α蛋白表達(dá)的雙因素方差分析結(jié)果

大鼠骨骼肌pAMPK/AMPK 的校正模型Sig.小于0.05，說(shuō)明該檢測(cè)指標(biāo)組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠骨骼肌磷酸化AMPK蛋白表達(dá)有顯著性影響（P＜0.05），表明運(yùn)動(dòng)能有效促進(jìn)肥胖大鼠骨骼肌AMPK的磷酸化。

表3 低氧運(yùn)動(dòng)干預(yù)后營(yíng)養(yǎng)性肥胖大鼠骨骼肌pAMPK/AMPK、PGC-1α蛋白表達(dá)的雙因素方差分析結(jié)果

3 分析與討論

目前，關(guān)于肥胖大鼠的研究模型主要有三種：特殊藥物所誘導(dǎo)的肥胖模型、遺傳性肥胖模型以及高脂膳食所致的肥胖模型[15，16]。隨著社會(huì)發(fā)展，人類生活水平提高，飲食習(xí)慣趨于高脂化，而高脂膳食模型與人類飲食習(xí)慣相似，同時(shí)，高脂膳食會(huì)引起某些肥胖易感基因活化，因此，高脂膳食所致的營(yíng)養(yǎng)性肥胖模型具有十分重要的意義。此外，高脂膳食構(gòu)建肥胖模型具有方便、價(jià)格低、可靠的特點(diǎn)，因而也是動(dòng)物肥胖模型研究的常規(guī)模型。本研究中經(jīng)7周高脂膳食飼養(yǎng)后，79.6% DIO組大鼠體重增長(zhǎng)超過(guò)CON 組體重的20%，符合Chandler等的研究成果：高脂組體重超過(guò)正常組20%[12]。此外，兩組間BMI 具有顯著差異，血糖血脂均顯著增加，與相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道一致，提示營(yíng)養(yǎng)性肥胖大鼠建模成功[14，17]。

AMPK 是一種高度保守的細(xì)胞能量代謝調(diào)控器，在調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)及機(jī)體能量代謝中起著重要作用，可降低血糖和血脂水平，調(diào)控骨骼肌中脂肪酸攝入與脂肪酸氧化分解，在維持機(jī)體能量穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮關(guān)鍵作用[7，18]。因此，AMPK可被影響機(jī)體能量穩(wěn)態(tài)的因素或細(xì)胞分子激活，如氧化應(yīng)激、激素、運(yùn)動(dòng)、缺氧等[19-21]。Skeffington 等研究發(fā)現(xiàn)低氧暴露可顯著增強(qiáng)機(jī)體AMPK 的表達(dá)，以提高機(jī)體對(duì)低氧暴露所致的能量失衡的適應(yīng)能力[22]；收縮刺激和運(yùn)動(dòng)可活化AMPK，并促進(jìn)FAT/CD36和脂蛋白脂酶（lipoprteinlipase，LPL）表達(dá)，進(jìn)而增強(qiáng)骨骼肌脂肪酸攝入，同時(shí)也提高線粒體對(duì)脂肪酸的氧化能力[23]。通過(guò)上述研究可知，改變外界環(huán)境，抑或通過(guò)增強(qiáng)機(jī)體能量消耗的方式，如耐力性運(yùn)動(dòng)等，均可高效活化AMPK。由此，我們選擇將低氧暴露與耐力性運(yùn)動(dòng)兩者疊加，探尋低氧運(yùn)動(dòng)是否會(huì)對(duì)AMPK 的活化作用更顯著。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，8 周常氧耐力運(yùn)動(dòng)、低氧暴露或低氧運(yùn)動(dòng)干預(yù)后，大鼠骨骼肌中AMPK 磷酸化蛋白表達(dá)量均有所提高，且低氧運(yùn)動(dòng)干預(yù)后AMPK磷酸化程度更加顯著，表明在低氧、運(yùn)動(dòng)、低氧結(jié)合運(yùn)動(dòng)三種干預(yù)方式中，低氧結(jié)合運(yùn)動(dòng)干預(yù)對(duì)機(jī)體骨骼肌AMPK 的活化作用效果最強(qiáng)，這與我們的研究假設(shè)相符。然而我們?cè)诒容^低氧（P=0.050）、運(yùn)動(dòng)（P=0.017）兩因素對(duì)AMPK 的影響作用時(shí)，發(fā)現(xiàn)運(yùn)動(dòng)對(duì)AMPK 磷酸化作用更顯著，兩者疊加時(shí)則無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，由此我們推測(cè)低氧環(huán)境下運(yùn)動(dòng)時(shí)，可能會(huì)存在其他細(xì)胞分子被活化，進(jìn)而影響AMPK磷酸化水平。同時(shí)，本實(shí)驗(yàn)設(shè)置兩種低氧濃度，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示無(wú)論低氧暴露或者低氧運(yùn)動(dòng)干預(yù)，13.3%組大鼠骨骼肌AMPK磷酸化水平均高于16.3%組，這可能與不同濃度低氧暴露刺激調(diào)控AMPK相關(guān)細(xì)胞分子的活化程度相關(guān)。

PGC-1α是人體重要的能量代謝“分子開(kāi)關(guān)”之一，主要分布于能量需求較高的組織中，如骨骼肌、心臟等，可與多種核受體或非核受體結(jié)合，在防治肥胖、代謝綜合癥、2型糖尿病等疾病過(guò)程中起重要作用[24]。骨骼肌作為機(jī)體能量代謝最活躍的組織之一，富含PGC-1α，而PGC-1α在骨骼肌線粒體發(fā)生、糖代謝、脂肪酸氧化等能量代謝網(wǎng)絡(luò)中均具有重要調(diào)控作用。研究顯示，營(yíng)養(yǎng)不良、運(yùn)動(dòng)、低氧等可影響PGC-1α的表達(dá)水平。Greene等發(fā)現(xiàn)耐力運(yùn)動(dòng)可激活骨骼肌中PGC-1α，增強(qiáng)FAT/CD36、CPT-1、MCAD等脂肪酸氧化代謝相關(guān)酶的活性，增強(qiáng)脂肪酸氧化能力，加劇骨骼肌能量代謝[25，26]。低氧狀態(tài)下，PGC-1α可通過(guò)低氧誘導(dǎo)因子1（HIF-1）調(diào)節(jié)機(jī)體骨骼肌線粒體生成和糖、脂代謝等[27]。我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示低氧暴露或/和運(yùn)動(dòng)均可提高骨骼肌PGC-1α蛋白表達(dá)，其中13.3%低氧運(yùn)動(dòng)組大鼠PGC-1α蛋白表達(dá)最高，且顯著高于常氧運(yùn)動(dòng)組，也高于16.3%低氧運(yùn)動(dòng)組但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。由此可見(jiàn)，運(yùn)動(dòng)過(guò)程中增加低氧干預(yù)手段可有效增強(qiáng)骨骼肌PGC-1α蛋白的表達(dá)，進(jìn)而影響骨骼肌能量代謝穩(wěn)態(tài)。而我們?cè)诒容^低氧（P=0.294）、運(yùn)動(dòng)（P=0.075）兩因素對(duì)PGC-1α的影響作用時(shí)，發(fā)現(xiàn)兩者對(duì)PGC-1α的影響作用無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，由此可見(jiàn)低氧或運(yùn)動(dòng)對(duì)PGC-1α的影響作用并無(wú)顯著性區(qū)分。進(jìn)行不同濃度低氧干預(yù)時(shí)，我們發(fā)現(xiàn)：雖然低氧濃度越低，PGC-1α蛋白表達(dá)也隨之升高，然而并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，由此我們推測(cè)不同低氧濃度對(duì)PGC-1α蛋白表達(dá)雖均具有促進(jìn)作用，但可能并非單純呈正向作用，可能與低氧狀態(tài)下HIF-1活性相關(guān)，這仍需我們進(jìn)一步研究。目前，關(guān)于低氧運(yùn)動(dòng)對(duì)骨骼肌PGC-1α調(diào)控作用的研究較少，尚需繼續(xù)探討。

采用AICAR（AMPK 激動(dòng)劑）處理體外培養(yǎng)的骨骼肌細(xì)胞后，PGC-1α表達(dá)水平顯著升高[28]。此外，也有研究顯示AMPK可通過(guò)磷酸化PGC-1α的Thr117（蘇氨酸）和Ser538（絲氨酸）位點(diǎn)，激活并調(diào)節(jié)PGC-1α的功能[11，29]。以上研究可表明PGC-1α是AMPK下游靶點(diǎn)之一。研究顯示，對(duì)骨骼肌細(xì)胞進(jìn)行急性收縮刺激時(shí)，可活化AMPK-PGC-1α通路，進(jìn)而提高PGC-1α表達(dá)[30]。在Combes等[31]研究中，受試者分別進(jìn)行30 min持續(xù)性或間歇性大強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)間歇性運(yùn)動(dòng)中骨骼肌的AMPK表達(dá)顯著性高于持續(xù)性運(yùn)動(dòng)，同時(shí)，與一次性持續(xù)運(yùn)動(dòng)相比，一次性大強(qiáng)度間歇運(yùn)動(dòng)可更顯著地上調(diào)PGC-1α表達(dá)。而PGC-1α作為線粒體發(fā)生及脂肪酸氧化代謝的重要調(diào)控分子，許多研究顯示持續(xù)性運(yùn)動(dòng)對(duì)PGC-1α的影響更顯著，這與Combes 等[31]的研究并不相符，提示我們運(yùn)動(dòng)對(duì)線粒體生物發(fā)生及脂肪酸氧化代謝的長(zhǎng)期適應(yīng)性還有待研究，AMPK作為PGC-1α上游調(diào)控因子，可能會(huì)因干預(yù)方式改變而使該信號(hào)通路發(fā)生相應(yīng)調(diào)整。目前，已有學(xué)者對(duì)常氧下運(yùn)動(dòng)對(duì)AMPK-PGC-1α的影響作用進(jìn)行研究，此外，單純低氧暴露對(duì)AMPK-PGC-1α的影響作用也有所研究。Chen等[32]研究發(fā)現(xiàn)間歇性低氧暴露可上調(diào)骨骼肌中AMPKPGC-1α信號(hào)通路的表達(dá)，與Chaillou 等[33]研究結(jié)果一致。然而，低氧結(jié)合耐力運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠骨骼肌AMPKPGC-1α的影響，目前尚未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。本研究結(jié)果顯示，不同濃度低氧運(yùn)動(dòng)刺激下，AMPK-PGC-1α表達(dá)均成上升趨勢(shì)，且PGC-1α活性變化趨勢(shì)與AMPK的磷酸化趨勢(shì)一致，表現(xiàn)出AMPK-PGC-1α的聯(lián)動(dòng)反應(yīng)，與運(yùn)動(dòng)或低氧暴露干預(yù)下AMPK-PGC-1α表達(dá)的變化一致，推測(cè)低氧運(yùn)動(dòng)對(duì)AMPK-PGC-1α的作用效應(yīng)，可能與運(yùn)動(dòng)、低氧暴露兩種干預(yù)方式均為正相關(guān)效應(yīng)有關(guān)。本研究進(jìn)行了兩種濃度低氧運(yùn)動(dòng)干預(yù)，結(jié)果顯示：隨著低氧濃度降低，AMPK-PGC-1α表達(dá)均有所增高，而不同低氧濃度對(duì)AMPK、PGC-1α的影響略有不同。由此我們推測(cè)：低氧結(jié)合運(yùn)動(dòng)調(diào)控AMPK-PGC-1α信號(hào)通路可能與其他細(xì)胞信號(hào)通路存在聯(lián)動(dòng)效應(yīng)，低氧激活A(yù)MPK、PGC-1α具有一定特異性，但由于本研究并未進(jìn)行信號(hào)通路的阻斷或增強(qiáng)，因此仍需繼續(xù)探究低氧運(yùn)動(dòng)對(duì)AMPK-PGC-1α的機(jī)制。此外，本課題組曾進(jìn)行15.4%及14.5%低氧運(yùn)動(dòng)干預(yù)[34]，我們對(duì)不同濃度低氧運(yùn)動(dòng)干預(yù)減脂方面的數(shù)據(jù)進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)低氧濃度越低，肥胖大鼠血脂及體重降低越顯著，且與機(jī)體脂肪酸氧化代謝相關(guān)的細(xì)胞分子表達(dá)越高，由此可見(jiàn)，低氧、運(yùn)動(dòng)與骨骼肌脂肪酸氧化代謝可能存在著正相關(guān)的調(diào)控作用，然而目前不同濃度低氧對(duì)機(jī)體的調(diào)控作用并未完全闡釋清楚，因此，仍需我們繼續(xù)探究更多不同濃度低氧對(duì)機(jī)體脂代謝及骨骼肌脂肪酸氧化代謝的作用機(jī)理。

4 結(jié)論

低氧運(yùn)動(dòng)可能通過(guò)增強(qiáng)AMPK 磷酸化，進(jìn)而上調(diào)PGC-1α蛋白表達(dá)，這可能是低氧運(yùn)動(dòng)改善營(yíng)養(yǎng)性肥胖大鼠骨骼肌脂代謝紊亂的機(jī)制之一。