腦卒中后抑郁患者輔助性T細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子水平變化及其臨床意義

單小瑞，宋景貴，徐 斌，杜祥景，蘇 靜，史莉瑾，郭雙喜，王旭生

(1.新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，河南 新鄉(xiāng) 453002；2.新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，河南 衛(wèi)輝 453100)

腦卒中后抑郁(post-stroke depression，PSD)是一種常見(jiàn)的腦血管疾病并發(fā)癥，發(fā)生于卒中急性期、恢復(fù)期等病程的不同階段。PSD對(duì)腦卒中患者的預(yù)后會(huì)產(chǎn)生不良影響，降低患者的生活質(zhì)量，國(guó)內(nèi)報(bào)道其發(fā)病率約36.06 %[1-3]。已有研究發(fā)現(xiàn)，腦卒中發(fā)病與炎性細(xì)胞因子密切相關(guān)[4]，但PSD的發(fā)生是否與炎性細(xì)胞因子的變化相關(guān)仍有待進(jìn)一步研究。因此本研究旨在檢測(cè)PSD患者血清白細(xì)胞介素(interleukin，IL)-2、IL-10、IL-17a及干擾素-γ(interferon-γ，IFN-γ)等細(xì)胞因子的變化，并分析其在臨床治療PSD中的潛在價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇2016年2月至2016年10月新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院治療的缺血性腦卒中患者為研究對(duì)象，所有患者均完成相關(guān)的影像學(xué)檢查，并給予常規(guī)內(nèi)科治療。病例納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)住院患者；(2)年齡18～70歲，性別不限；(3)經(jīng)過(guò)1～3次的頭顱CT或磁共振成像檢查，符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)全國(guó)第4次腦血管病學(xué)術(shù)會(huì)議中制定的腦梗死的診斷標(biāo)準(zhǔn)；(4)影像學(xué)檢查梗死面積>2 cm2；(5)入院前未曾服用抗抑郁藥物；(6)意識(shí)清醒(或經(jīng)治療后1周意識(shí)轉(zhuǎn)清)，無(wú)明顯的認(rèn)知障礙；(7)獲得受試者或法定監(jiān)護(hù)人簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)精神發(fā)育遲滯者；(2)嚴(yán)重不穩(wěn)定軀體疾病者；(3)有癲癇病史、精神疾病史及高熱驚厥者；(4)甲狀腺疾病、免疫系統(tǒng)疾病、長(zhǎng)期慢性炎癥患者；(5)聾、啞、失語(yǔ)以及意識(shí)障礙而無(wú)法配合量表檢查；(6)患有或曾患有藥源性惡性癥狀群，嚴(yán)重錐體外系不良反應(yīng)、明顯遲發(fā)性運(yùn)動(dòng)障礙者；(7)有嚴(yán)重自殺企圖或嚴(yán)重興奮激越者；(8)有嚴(yán)重的肝腎功能、血糖、血脂等實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果異常者；(9)妊娠或哺乳期婦女，或計(jì)劃妊娠者；(10)QTc 間期≥470 ms 者；(11)疾病復(fù)發(fā)及失訪者。本研究納入患者63例，所有患者入院后隨訪至治療后90 d，其中男41例，女22例，年齡29～79(57.4±10.6)歲，根據(jù)漢密爾頓抑郁量表(Hamilton depression scale，HAMD)評(píng)分[5]將患者分為PSD組(HAMD評(píng)分≥8)30例和非PSD組(HAMD評(píng)分≤7)33例。PSD組：男13例，女17例，年齡29～69(55.46±10.36) 歲；吸煙史6例，飲酒史10例，合并糖尿病7例，合并高血壓病21例；輕度PSD 12例(8≤HAMD≤16),中度PSD 13例(17≤HAMD≤23),重度PSD 5例(HAMD≥24)。非PSD組：男28例，女5例，年齡37～79(58.30±10.85)歲；吸煙史16例，飲酒史15例，合并糖尿病7例，合并高血壓病23例；2組患者性別、年齡、吸煙史、飲酒史、合并高血壓病、糖尿病比例比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。另選擇同期在本院體檢的性別、年齡相匹配的健康者30例為對(duì)照組，其中男12例，女18例，年齡48～71(60.00±7.01)歲。本研究已通過(guò)醫(yī)院倫理審查委員會(huì)審查，所有入選者簽署知情同意書(shū)。

1.2 方法

1.2.1 一般資料登記入院24 h內(nèi)登記患者的性別、年齡、吸煙、飲酒及基礎(chǔ)疾病(高血壓病、糖尿病)等情況。

1.2.2 血清細(xì)胞因子水平檢測(cè)2組患者均在常規(guī)治療后30、90 d時(shí)抽取空腹肘正中靜脈血3 mL于抗凝管中,3 000 r·min-1離心3 min，取上層血清置于-80 ℃冰箱保存待測(cè)。同期抽取對(duì)照組空腹肘靜脈血3 mL于抗凝管中，3 000 r·min-1離心 3 min，儲(chǔ)存于-80 ℃冰箱中保存。采用流式細(xì)胞術(shù)(美國(guó)Becton-Dickinson公司)檢測(cè)血清IL-2、IL-10、IL-17a及IFN-γ水平。人Th1-Th2-Th17細(xì)胞高通量液項(xiàng)蛋白定量試劑盒購(gòu)自北京中原合聚經(jīng)貿(mào)有限公司，操作嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

2 結(jié)果

2.1 3組受試者血清細(xì)胞因子表達(dá)水平比較結(jié)果見(jiàn)表1。PSD組和非PSD組患者治療后30、90 d血清 IL-2、IL-10、IL-17a及IFN-γ表達(dá)水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。PSD組和非PSD組患者治療后90 d血清 IL-2、IL-10、IL-17a及IFN-γ表達(dá)水平高于治療后30 d，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。PSD組患者治療后30、90 d血清IL-2、IL-10、IL-17a及IFN-γ表達(dá)水平高于非PSD組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表1 3組受試者血清IL-2、IL-10、IL-17a及IFN-γ水平比較

組別nIL-2/(μg·L-1)IL-10/(μg·L-1)IL-17a/(μg·L-1)IFN-γ/(μg·L-1)對(duì)照組301.54±0.311.07±0.4410.96±3.040.97±0.43非PSD組33 治療后30d2.06±0.55a1.82±0.60a16.69±3.01a2.28±0.75a 治療后90d2.18±0.48ab2.00±0.63ab17.59±2.90ab2.43±0.64abPSD組30 治療后30d2.40±0.68ac2.27±0.77ac19.02±5.30ac2.94±0.83ac 治療后90d2.67±0.57abd2.47±0.70abd19.68±4.80abd3.11±0.76abd

注：與對(duì)照組比較aP<0.05;與治療后30 d比較bP<0.05;與治療后30 d比較cP<0.05;與治療后90 d比較dP<0.05。

2.2 不同程度PSD患者治療后90 d血清IL-2、IL-10、IL-17a及IFN-γ水平比較結(jié)果見(jiàn)表2。中重度PSD患者治療后90 d血清IL-2、IL-10、IL-17a及IFN-γ水平顯著高于輕度PSD患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表2 不同程度PSD患者治療后90 d血清IL-2、IL-10、IL-17a及IFN-γ水平比較

疾病程度nIL-2/(μg·L-1)IL-10/(μg·L-1)IL-17a/(μg·L-1)IFN-γ/(μg·L-1)輕度PSD122.13±0.121.94±0.3016.84±2.692.14±0.57中重度PSD182.66±0.142.04±0.3120.70±4.222.62±0.62t9.8925.2642.8062.155P0.0000.0000.0090.040

3 討論

PSD是腦卒中后表現(xiàn)出來(lái)的以抑郁心境為主要表現(xiàn)的情感障礙性疾病，其在腦卒中后發(fā)病率高，嚴(yán)重影響患者的康復(fù)，及時(shí)正確的治療可顯著改善原發(fā)疾病的轉(zhuǎn)歸及預(yù)后[6-7]。但目前關(guān)于PSD的發(fā)病機(jī)制尚未清楚，前期研究表明，PSD的發(fā)生與患者血清中IL-2、IL-10、IL-17a及IFN-γ等細(xì)胞因子表達(dá)水平失衡密切相關(guān)[8]。而細(xì)胞因子作為神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫網(wǎng)絡(luò)中重要的神經(jīng)調(diào)質(zhì)，在抑郁癥與腦卒中的發(fā)病過(guò)程中起一定作用[9]。IL-2主要由活化CD4+T細(xì)胞分泌，多數(shù)研究均表明，腦卒中后IL-2表達(dá)增加可加重缺血性腦損傷[10]。IL-10是具有多種生物學(xué)活性的免疫因子，是一種單肽鏈糖蛋白，由 178個(gè)氨基酸組成，主要由Th2細(xì)胞產(chǎn)生，Th0細(xì)胞、Th1細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞、活化的肥大細(xì)胞也可分泌IL-10。IL-17a是由Th17細(xì)胞分泌的，具有很強(qiáng)的促炎癥作用[11]。IFN-γ在免疫和炎癥的發(fā)生和維持中亦起著十分重要的作用。

本研究結(jié)果顯示，PSD組患者治療后30、90 d血清IL-2、IL-10、IL-17a及IFN-γ水平顯著高于非PSD組，提示PSD伴有單核巨噬細(xì)胞或淋巴細(xì)胞的激活[12]。相關(guān)研究表明，腦卒中的發(fā)生可對(duì)機(jī)體產(chǎn)生應(yīng)激事件，這一應(yīng)激事件可導(dǎo)致患者軀體功能障礙和社會(huì)適應(yīng)功能的喪失，并可能激活下丘腦-垂體-腎上腺軸而促使抑郁發(fā)作，而細(xì)胞因子可誘導(dǎo)下丘腦、垂體等腦區(qū)的皮質(zhì)激素受體功能改變，導(dǎo)致下丘腦、垂體對(duì)皮質(zhì)激素升高的敏感性喪失，負(fù)反饋功能受損，造成下丘腦-垂體-腎上腺軸持久活動(dòng)過(guò)度，從而導(dǎo)致抑郁發(fā)生。因此，細(xì)胞因子和腦卒中導(dǎo)致抑郁的機(jī)制在下丘腦-垂體-腎上腺軸的激活方面是相似的，進(jìn)一步從機(jī)制上說(shuō)明了細(xì)胞因子與PSD的關(guān)系[13]。本研究亦發(fā)現(xiàn)，腦卒中后中重度抑郁患者血清IL-2、IL-10、IL-17a及IFN-γ水平顯著高于輕度抑郁患者，提示血清IL-2、IL-10、IL-17a及IFN-γ水平在一定程度上反映了PSD的嚴(yán)重程度。

綜上所述，PSD患者治療后30、90 d血清IL-2、IL-10、IL-17a及IFN-γ水平高于非PSD患者，且與PSD患者抑郁程度相關(guān)，因此檢測(cè)腦卒中患者血清IL-2、IL-10、IL-17a及IFN-γ水平對(duì)PSD患者早發(fā)現(xiàn)、早治療具有重要意義，可促進(jìn)患者康復(fù)，提高生活質(zhì)量。