血清乳膠凝集試驗(yàn)對(duì)肺隱球菌病的臨床診斷價(jià)值

曹磊，劉澄英，侯昕珩，謝諍，曹勵(lì)強(qiáng)，蔡麗婷，田家偉，盧翔

（東南大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬江陰醫(yī)院，江蘇江陰 214400）

PC是極為罕見的深部真菌疾病，其致病菌為新型隱球菌，高危因素為免疫抑制劑、抗生素和糖皮質(zhì)激素等藥物的長(zhǎng)期使用[1]。其多發(fā)病于免疫功能低下群體，但在環(huán)境改變與生活壓力增加等影響下，發(fā)病群體無(wú)典型特征。早期診斷可降低該病的死亡率，LA是其理想檢測(cè)手段，其對(duì)于血清與腦脊液的診斷敏感度高達(dá)99%[2]。本研究主體為2016年12月-2019年3月間來(lái)院治療的疑似31例PC患者，旨在探究LA的診斷價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本研究對(duì)象為2016年12月-2019年3月間來(lái)院治療的疑似31例PC患者。其中，男18例，女13例；年齡范圍21歲-72歲，平均（41.06±2.51）歲。

1.2 方法 對(duì)患者行血清LA檢驗(yàn)：使用隱球菌抗原（CA）乳膠檢測(cè)系統(tǒng)，對(duì)設(shè)備行隔熱或水沖處理，溫度為56oC，使用100 rpm行儀器旋轉(zhuǎn)處理，準(zhǔn)備木制涂棒與非硅酸鹽試管（12 mm×75 mm）與無(wú)抗凝采血試管（5 mL）。血液標(biāo)本的采集方法為：采集靜脈血4 mL，置于無(wú)抗凝試管中，行1,000g離心處理15 min，并將血清溶液吸取至無(wú)菌容器中，行密封操作，于-20oC冰箱中保存。血清LA檢驗(yàn)方法為：于鏈霉蛋白酶（50 μL）中加入血清（300 μL），使用封口膜行管口密閉處理，于56oC環(huán)境下行血清與鏈霉蛋白酶溶液孵育處理，時(shí)間為30 min，于溶液中滴入1滴抑制液，以終止反應(yīng)。于薄片（環(huán)狀）分離環(huán)中加入隱球菌抗原（25 μL）作為對(duì)照組，并加入血清樣本。于操作各個(gè)環(huán)節(jié)加入隱球菌乳膠（25 μL），使用涂藥棒將環(huán)中物質(zhì)混合，并于室溫條件下行旋轉(zhuǎn)處理，轉(zhuǎn)速為100 rpm，時(shí)間為5 min。于無(wú)光背景下讀取結(jié)果。

肺活檢組織的檢查方法為：于CT引導(dǎo)下行經(jīng)皮穿刺活檢處理，標(biāo)本使用甲醛液（4%）固定后用石蠟包埋，并行組織切面處理，行HE、PAS與抗酸染色處理。

1.3 觀察指標(biāo) 觀察病理檢查結(jié)果、PC臨床表現(xiàn)和血清LA檢驗(yàn)結(jié)果。

2 結(jié)果

2.1 病理檢查結(jié)果 以肺活檢組織檢查為病理診斷，結(jié)果為11例患者確診為PC，非PC患者20例，見表1。

2.2 PC的臨床表現(xiàn) 慢性感染6例（54.55%），表現(xiàn)為X線胸片呈肺部陰影，患者病程＞3個(gè)月；亞急性感染4例（36.36%），表現(xiàn)為咳嗽、咳痰與發(fā)熱等，病程為3周-4個(gè)月；急性重癥肺炎1例（9.09%），表現(xiàn)為呼吸困難與呼吸衰竭。

2.3 分析檢驗(yàn)結(jié)果 11例PC患者的血清LA結(jié)果均為陽(yáng)性；20例非PC患者的血清LA結(jié)果均為陰性，血清LA檢驗(yàn)的特異度與敏感度為100%。

3 討論

PC患者并不伴有顯著癥狀，部分免疫功能下降患者會(huì)伴有重癥肺炎，其診斷難度較高，行痰液培養(yǎng)或血培養(yǎng)等檢驗(yàn)的診斷率低[3]。血清LA是其理想診斷方式，其能夠利用鏈霉蛋白酶消除免疫復(fù)合物對(duì)于檢驗(yàn)結(jié)果的影響，進(jìn)而評(píng)估疾病程度和預(yù)后性。患者于疾病進(jìn)展期可表現(xiàn)出抗原滴度升高情況，疾病控制后，則滴度會(huì)明顯下降，若治療不佳或復(fù)發(fā)，則會(huì)出現(xiàn)滴度不變或不穩(wěn)定性升高等情況[4]。研究中，血清LA對(duì)于該病的診斷特異度與敏感度為100%?？梢姡摷夹g(shù)可有效評(píng)估PC患者病情，效果佳。

表1 分析病理檢查結(jié)果