不同提取方法對煙草纖維素微觀結(jié)構(gòu)的影響

楊莫愁，周 順，張曉宇，楊 俊，王孝峰，田振峰，葛少林，王婉婉，劉 非，徐迎波*，孔 俊，何 慶

1.中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)煙草與健康研究中心，合肥市徽州大道1129號 230052

2.安徽中煙工業(yè)有限責(zé)任公司煙草行業(yè)燃燒熱解研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，合肥市高新區(qū)天達(dá)路9號 230088

3.安徽中煙工業(yè)有限責(zé)任公司煙草化學(xué)安徽省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，合肥市高新區(qū)天達(dá)路9號 230088

纖維素是煙草細(xì)胞壁的主要成分，是構(gòu)成煙葉細(xì)胞組織和骨架的基本物質(zhì)，其燃燒行為對煙草整體的燃燒行為有重要影響［1-3］。近年來，纖維素作為煙草中重要大分子物質(zhì)之一，受到研究人員的廣泛關(guān)注。朱曉蘭等［4］采用糖、酸介質(zhì)處理煙草纖維素，發(fā)現(xiàn)纖維素的形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，可及度增大。楊瀅等［5］研究發(fā)現(xiàn)，煙草纖維素結(jié)構(gòu)上的差異使其表現(xiàn)出不同的燃燒熱解特性，導(dǎo)致煙草纖維素?zé)峤猱a(chǎn)物的質(zhì)量分?jǐn)?shù)產(chǎn)生明顯差異。纖維素的微觀結(jié)構(gòu)主要指晶區(qū)和非晶區(qū)的結(jié)構(gòu)，是決定纖維素性質(zhì)的重要因素［6-9］。纖維素的性質(zhì)非常復(fù)雜，會隨植物來源、分離和提純過程以及聚集狀態(tài)的變化而產(chǎn)生較大差異［10］。天然煙草纖維主要包含纖維素、半纖維素、木質(zhì)素、果膠及脂肪、淀粉、蛋白質(zhì)等成分。關(guān)于煙草纖維素的微觀結(jié)構(gòu)研究，在對煙草纖維素微觀結(jié)構(gòu)影響盡量小的前提下進(jìn)行纖維素提取具有非常重要的現(xiàn)實(shí)意義。目前，煙草纖維素分離和提純過程對其微觀結(jié)構(gòu)的影響研究鮮見報道。固體交叉極化/魔角旋轉(zhuǎn)13C核磁共振（CP/MAS13C NMR）技術(shù)是研究高分子化合物化學(xué)結(jié)構(gòu)和物理性質(zhì)的重要工具之一，基于該技術(shù)，研究人員不需要對固體粉末組分進(jìn)行分離和溶解等處理，可通過定量估計(jì)其化學(xué)組成和化學(xué)結(jié)構(gòu)直接獲得可靠的結(jié)構(gòu)信息。因此，結(jié)合煙草行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)方法 YC/T 347—2010［11］及植物纖維素提取中廣泛采用的方法［12］，本研究中采用中性洗滌劑法［11］、酸性洗滌劑法［11］、酸性水解法［13-14］、堿液分離法［15-16］對烤煙和香料煙煙葉樣品中的纖維素進(jìn)行提取，利用CP/MAS13C NMR技術(shù)對4種提取方法所獲纖維素樣品的微觀結(jié)構(gòu)進(jìn)行對比分析，探究不同提取方法對煙草纖維素微觀結(jié)構(gòu)的影響，旨在為煙草纖維素的提取及微觀結(jié)構(gòu)的研究提供方法參考，并為進(jìn)一步揭示煙草纖維素微觀結(jié)構(gòu)對其燃燒熱解機(jī)制的影響奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑和儀器

煙葉樣品由安徽中煙工業(yè)有限責(zé)任公司提供，包括烤煙（2017年，貴州正安，C3F）和香料煙（2016年，云南保山，B二級）。煙葉樣品于烘箱中（40±1）℃干燥2 h，機(jī)械粉碎，過425 μm（40目）篩，密封儲存?zhèn)溆谩?/p>

苯、乙醇、乙醚、丙酮、乙二胺四乙酸二鈉、四硼酸鈉、十二烷基硫酸鈉、乙二醇乙醚、磷酸氫二鈉、冰醋酸、鹽酸、正辛醇、氫氧化鈉、濃硫酸、亞氯酸鈉（AR，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；耐高溫α-淀粉酶（BR）、十六烷基三甲基溴化銨、亞氯酸鈉（AR）（上海阿拉丁生化科技股份有限公司）；水為二次蒸餾水。

AVANCE AV 400超導(dǎo)傅里葉數(shù)字化核磁共振譜儀（德國Bruker公司）；HHS11-2型恒溫水浴鍋（上?？粕齼x器公司）；DF-101S集熱式恒溫加熱磁力攪拌器（鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司）；YB-2000A型高速多功能粉碎機(jī)（永康市速鋒工貿(mào)有限公司）；DHG-9140A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海右一儀器公司）；SHB-Ⅲ循環(huán)水式多用真空泵（鄭州市長城儀器公司）；SL234型電子天平（感量0.000 1 g，美國Denver公司）；SZ-93A自動雙重純水蒸餾器（上海亞榮生化儀器廠）。

1.2 方法

1.2.1 煙草纖維素提取

1.2.1.1 試樣脫脂

參考文獻(xiàn)［11］方法進(jìn)行煙草樣品的脫脂處理。稱取20 g試樣，置于1 000 mL圓底燒瓶中，依次加入苯、乙醇各200 mL和乙醚40 mL；將圓底燒瓶置于水浴鍋中加熱，開啟冷凝水，維持微沸狀態(tài)4 h。取燒杯和經(jīng)過與試樣相同脫脂處理并用丙酮沖洗后的濾紙，置于烘箱中烘干至恒質(zhì)量，放入干燥器中備用。水浴鍋停止加熱后，將燒瓶靜置冷卻，抽濾，并用丙酮沖洗至濾出液無色。將濾紙和濾渣一起轉(zhuǎn)移到燒杯中，放入烘箱中在（105±2）℃條件下烘干至恒質(zhì)量，置于干燥器中備用。

1.2.1.2 中性洗滌劑法提取

采用煙草行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) YC/T 347—2010［11］中的中性洗滌方案對烤煙和香料煙煙葉樣品中的纖維素進(jìn)行初步提取，獲得中性洗滌纖維樣品。參考文獻(xiàn)［17-18］的方法對樣品進(jìn)行純化：

稱取27 g NaOH，量取75 mL冰醋酸，將二者混合并用蒸餾水稀釋至1 L，得到醋酸緩沖溶液。將抽干后的煙草中性洗滌纖維樣品置于圓底燒瓶中，加入200 mL 1.7%（質(zhì)量分?jǐn)?shù)）NaClO2溶液，在pH=4.5（加入200 mL醋酸緩沖溶液）、油浴125℃條件下加熱4 h。加熱結(jié)束后，抽濾，用蒸餾水清洗3次。將脫除木質(zhì)素后的樣品置于圓底燒瓶中，在室溫下加入400 mL 2.5 mol/L的HCl溶液，采用油浴加熱至100℃，保持4 h。加熱結(jié)束后，抽濾，并用熱水（90～100℃）沖洗管壁和剩余物。抽干后將剩余物放入（105±2）℃烘箱中烘干至恒質(zhì)量。

1.2.1.3 酸性洗滌劑法提取

采用煙草行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) YC/T 347—2010［11］中的酸性洗滌方案對烤煙和香料煙煙葉樣品中的纖維素進(jìn)行提取，獲得酸性洗滌纖維素樣品。

1.2.1.4 酸性水解法提取

參考文獻(xiàn)［13-14］的方法對煙草樣品中的纖維素進(jìn)行酸性水解法提取。稱取5.0 g脫脂樣品，置于圓底燒瓶中，加入100 mL蒸餾水和2.2 mL濃硫酸，在90℃下攪拌2 h，以水解半纖維素。加熱結(jié)束后，抽濾，用蒸餾水清洗3次。將樣品轉(zhuǎn)移至圓底燒瓶中，加入200 mL 1.7%（質(zhì)量分?jǐn)?shù)）NaClO2溶液，在pH=4.5、油浴125℃條件下加熱4 h。加熱結(jié)束后，抽濾，用蒸餾水清洗3次，將剩余物放入（105±2）℃烘箱中烘干至恒質(zhì)量。

1.2.1.5 堿液分離法提取

采用文獻(xiàn)［15-16］的方法對煙草樣品中的纖維素進(jìn)行堿液分離法提取。稱取5.0 g脫脂樣品，置于圓底燒瓶中，加入100 mL 4%NaOH溶液，在油浴125℃下加熱2 h。加熱結(jié)束后，抽濾，用蒸餾水清洗3次。將剩余物轉(zhuǎn)移至圓底燒瓶中，加入200 mL 1.7%（質(zhì)量分?jǐn)?shù)）NaClO2溶液，在pH=4.5、油浴125℃條件下加熱4 h。加熱結(jié)束后，抽濾，用蒸餾水清洗3次，將剩余物放入（105±2）℃烘箱中烘干至恒質(zhì)量。

1.2.2 煙草纖維素純度和得率測定

采用 Van Soest法［19］測定中性洗滌劑法、酸性洗滌劑法、酸性水解法、堿液分離法提取所得纖維素純度。稱取0.5 g纖維素樣品（m0），加入100 mL酸性洗滌劑，煮沸并回流1 h。抽濾，用沸水浸泡15～20s后沖洗過濾。加入少量丙酮洗滌殘?jiān)?，用蒸餾水反復(fù)沖洗至洗滌液中性，將殘?jiān)娓芍梁阗|(zhì)量m1（g）。向所得酸性洗滌纖維素中加入25 mL 72%硫酸，攪拌條件下消化3 h，過濾，洗滌至中性，烘干至恒質(zhì)量m2（g）。

纖維素純度（P）計(jì)算如式（1）：

纖維素得率（Y）計(jì)算如式（2）：

式中：M為煙葉樣品質(zhì)量（g）。

1.2.3 煙草纖維素微觀結(jié)構(gòu)表征

利用CP/MAS13C NMR技術(shù)對煙草纖維素樣品微觀結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析，測試條件：場強(qiáng)9.4 T，4 mm魔角探頭，轉(zhuǎn)速15 kHz，脈沖寬度90°，交叉極化時間4 μs，接觸時間2 ms，采樣時間34 ms，采樣間隔時間2.0 s，掃描次數(shù)1 024次，譜寬300（10-6），一級定標(biāo)溶劑（CH3）4Si。運(yùn)用MestReNova 6.1.1軟件及Peakfit 4.0軟件處理實(shí)驗(yàn)所得光譜，采用波譜去卷積技術(shù)對圖譜進(jìn)行分峰處理，通過峰形擬合計(jì)算煙草纖維素樣品晶型及分布、結(jié)晶度、原纖尺寸等結(jié)構(gòu)信息［20］。

2 結(jié)果與討論

2.1 煙草纖維素的得率及純度

采用中性洗滌劑法、酸性洗滌劑法、酸性水解法、堿液分離法提取烤煙和香料煙煙葉樣品的纖維素，纖維素純度與得率見表1?？梢钥闯觯捎盟嵝运夥ㄌ崛∷玫目緹煙熑~纖維素的得率最高，為12.1%，與文獻(xiàn)［21］報道的烤煙煙葉纖維素含量分布具有一致性。采用4種提取方法獲得的烤煙煙葉纖維素樣品的純度大小順序?yàn)椋褐行韵礈靹┓ǎ?1.2%）＞酸性水解法（78.6%）＞堿液分離法（74.4%）＞酸性洗滌劑法（53.1%）。香料煙煙葉纖維素的得率和純度結(jié)果與烤煙煙葉一致。

就中性洗滌劑法而言，煙葉經(jīng)中性洗滌劑處理后得到中性洗滌纖維，采用NaClO2和HCl溶液分別脫除中性洗滌纖維中的木質(zhì)素和半纖維素，即獲得纖維素樣品。采用該方法所得纖維素樣品中纖維素的純度較高，但是為了去除殘留的洗滌劑，需要多次洗滌樣品，因此纖維素得率較低。

對于酸性洗滌劑法來說，煙葉樣品經(jīng)過酸性洗滌劑處理，蛋白質(zhì)、糖類、脂類及部分半纖維素被脫除，但仍存在木質(zhì)素及少量半纖維素雜質(zhì)，因此采用該方法所得纖維素樣品的純度最低。由于該方法亦需多次洗滌樣品以去除殘留的洗滌劑，因此纖維素得率較低。

堿液分離法是基于NaOH溶液可以削弱纖維素和半纖維素之間的氫鍵及半纖維素和其他組分內(nèi)部分子之間酯鍵的皂化作用［22］，使木質(zhì)素和半纖維素溶于NaOH溶液的一種纖維素提取方法。煙葉經(jīng)NaOH溶液處理后再用NaClO2溶液脫除其中殘留的木質(zhì)素即可獲得纖維素樣品。由于纖維素提取過程中部分纖維素會與NaOH溶液反應(yīng)而消解［23］，因此堿液分離法的得率較低。

酸性水解法采用稀硫酸溶液處理煙葉樣品，在稀酸溶液中，木質(zhì)素可降解為多種單環(huán)芳香族化合物，半纖維素也可降解為多糖或醛酸，但纖維素不會發(fā)生溶解。在利用NaClO2溶液脫除木質(zhì)素后，即可實(shí)現(xiàn)纖維素和木質(zhì)素、半纖維素的分離。此外，酸性溶液能夠增大纖維素的可及度［22］，因此酸性水解法的纖維素得率最高。采用該方法所得纖維素的純度居于中性洗滌劑法與堿液分離法之間。

表1 4種提取方法所獲煙草纖維素的純度和得率Tab.1 Purity and yield of tobacco cellulose obtained by four extraction methods

2.2 煙草纖維素的CP/MAS13C NMR光譜

采用中性洗滌劑法、酸性洗滌劑法、酸性水解法和堿液分離法等4種方法提取所得烤煙和香料煙煙葉纖維素樣品，并對其進(jìn)行CP/MAS13C NMR分析，結(jié)果如圖1和表2所示?？梢钥闯?，煙草纖維素的13C NMR吸收信號峰主要在δ60～110之間。其中，δ95～110處的吸收峰歸屬于C-1，表征晶態(tài)結(jié)構(gòu)，通過對其擬合可得到纖維素晶型及比例；δ80～90處的吸收峰歸屬于C-4，表征纖維素的結(jié)晶區(qū)和無定形區(qū)，常用于研究纖維素結(jié)晶區(qū)內(nèi)和無定形區(qū)內(nèi)纖維素分子的排列情況，通過擬合及計(jì)算可獲得結(jié)晶度和原纖尺寸等結(jié)構(gòu)信息；δ60～68和68～80處的吸收峰分別歸屬于C-6和吡喃環(huán)上的其他C（C-2,3,5）。

圖1 煙草纖維素樣品的CP/MAS13C NMR光譜圖Fig.1 CP/MAS13C NMR spectra of tobacco cellulose samples

表2 煙草纖維素樣品CP/MAS13C NMR光譜的化學(xué)位移Tab.2 CP/MAS13C NMR chemical shifts for tobacco cellulose samples

2.3 煙草纖維素的晶型及分布

纖維素在固態(tài)下存在著5種結(jié)晶變體，天然纖維素的結(jié)晶格子被稱為纖維素I。纖維素I是纖維素 Iα和纖維素 Iβ兩種晶體的混合物［24］，二者比例隨著原料種類及處理方式的不同而變化。在一定條件下，纖維素I可以轉(zhuǎn)化為次晶或無定形纖維素［8,25］。

圖2 中性洗滌劑法烤煙纖維素樣品的CP/MAS13C NMR光譜C-1信號峰擬合結(jié)果Fig.2 Fitting result of C-1 signal peak of13C CP/MAS NMR spectra of flue-cured tobacco cellulose extracted by neutral detergent method

根據(jù) Larsson等提出的概念［26-27］，利用 4個Lorentzian線形表示不同的晶型，并利用Peakfit 4.0軟件對C-1信號峰進(jìn)行擬合。圖2為采用中性洗滌劑法提取所得的烤煙煙葉纖維素樣品的核磁共振光譜C-1信號峰擬合結(jié)果。纖維素Iα在δ104.8處顯示1個單一的共振峰；纖維素Iβ顯示1個雙峰（δ105.4和δ103.5處）；δ104.2處的單一信號峰歸屬于次晶，其表示有序性不及但運(yùn)動性大于纖維素 Iα和 Iβ的結(jié)晶結(jié)構(gòu)。

根據(jù)不同纖維素樣品C-1信號峰擬合峰的相對信號強(qiáng)度計(jì)算纖維素樣品的晶型比例，結(jié)果如表3所示。由表3可知，烤煙和香料煙煙葉纖維素樣品均以纖維素Iβ晶型為主，并且不同方法獲得的煙草纖維素的晶型分布存在明顯差異。采用中性洗滌劑法和酸性洗滌劑法提取所得的纖維素樣品均具有較高相對含量的纖維素Iβ晶體，且中性洗滌劑法＞酸性洗滌劑法；采用酸性水解法和堿液分離法提取所得的纖維素Iβ晶體相對含量均較低，且二者無顯著差異。對于酸性水解法，酸溶液的加入促使樣品發(fā)生溶脹，導(dǎo)致介質(zhì)溶液到達(dá)纖維素結(jié)晶區(qū)，進(jìn)而對結(jié)晶表面造成了一定的破壞［4］，使得纖維素Iβ晶體的相對含量減少。在堿液分離法提取過程中，由于纖維素上的羥基是極性基團(tuán)，因此堿液是纖維素的良好潤脹劑［28］。堿液中的OH-與纖維素作用時可滲透到纖維內(nèi)部，破壞纖維素結(jié)晶區(qū)表面，導(dǎo)致纖維素Iβ晶體的相對含量降低。

進(jìn)一步分析可知，煙草纖維素樣品中次晶晶體相對含量的大小順序?yàn)椋簤A液分離法＞酸性水解法＞酸性洗滌劑法＞中性洗滌劑法，說明采用堿液分離法、酸性水解法和酸性洗滌劑法提取煙草纖維素，能夠促使纖維素內(nèi)部少量結(jié)晶體發(fā)生從有序到無序的轉(zhuǎn)變。與酸性水解法和堿液分離法相比，酸性洗滌劑法對纖維素的晶型及分布的影響較小，這主要?dú)w因于該法采用的酸溶液濃度較低。綜上可知，中性洗滌劑法對煙草纖維素晶型分布的影響最小。

表3 4種方法所得煙草纖維素樣品的晶型分布Tab.3 Crystal distribution of tobacco cellulose obtained by four extraction methods

2.4 煙草纖維素的結(jié)晶度及原纖結(jié)構(gòu)

利用Peakfit 4.0軟件對CP/MAS13C NMR光譜C-4信號峰進(jìn)行分析，圖3為采用中性洗滌劑法提取所得的烤煙煙葉纖維素樣品的C-4信號峰擬合結(jié)果。在有序的C-4區(qū)域（δ86～92）采用Lorentzian線形對纖維素 Iα、纖維素 Iα+β、纖維素 Iβ的信號進(jìn)行擬合；在無序的C-4區(qū)域（δ80～86）采用 Gaussian線形對次晶纖維素（PC）、可及基原纖表面（AS）和不可及基原纖表面（IAS）的信號進(jìn)行擬合。由此分析纖維素不同結(jié)晶結(jié)構(gòu)所占比例，并由AS和IAS的相對信號強(qiáng)度計(jì)算橫向基原纖尺寸及基原纖聚集束尺寸［29］。表4顯示了不同提取方法所得煙草纖維素樣品的CP/MAS13C NMR光譜C-4信號峰擬合得到的結(jié)晶度及原纖結(jié)構(gòu)信息。

圖3 中性洗滌劑法烤煙纖維素樣品的CP/MAS13C NMR光譜C-4信號峰擬合結(jié)果Fig.3 Fitting result of C-4 signal peak of13C CP/MAS NMR spectra of flue-cured tobacco cellulose extracted by neutral detergent method

表4顯示，采用中性洗滌劑法提取所得煙草烤煙煙葉纖維素樣品的結(jié)晶度最高，為43.8%，與文獻(xiàn)［20］結(jié)果一致。采用酸性洗滌劑法、酸性水解法和堿液分離法提取所得纖維素樣品的結(jié)晶度明顯低于采用中性洗滌劑法提取所得的纖維素。與中性洗滌劑法相比，酸性洗滌劑法提取所得煙葉纖維素樣品的結(jié)晶纖維素含量略有降低，但次晶纖維素含量顯著降低。半纖維素作為纖維素聚集態(tài)和三級結(jié)構(gòu)的調(diào)節(jié)劑，與纖維素有緊密締合作用。采用酸性洗滌劑法提取所得的纖維素樣品中存在半纖維素雜質(zhì)，可使纖維素分子間的聚集態(tài)減弱，進(jìn)而導(dǎo)致部分次晶纖維素轉(zhuǎn)化為無定形狀態(tài)的纖維素［30］。

進(jìn)一步分析可知，采用酸性水解法和堿液分離法提取所得的煙葉纖維素樣品中結(jié)晶纖維素含量明顯降低。原因是：酸處理使煙草纖維中木質(zhì)素及半纖維素發(fā)生降解，增大了纖維素的可及度，對纖維素的結(jié)晶結(jié)構(gòu)造成了一定的破壞［31］，進(jìn)而導(dǎo)致結(jié)晶纖維素含量下降。而NaOH溶液能夠溶脹纖維素，破壞木質(zhì)素、半纖維素對纖維素的包裹作用，使纖維素結(jié)晶區(qū)受到破壞［32］，進(jìn)而導(dǎo)致結(jié)晶度下降。綜上可知，與酸性洗滌劑法、酸性水解法和堿液分離法相比，中性洗滌劑法對煙草纖維素的結(jié)晶度影響最小。

植物纖維細(xì)胞壁中的纖維素分子鏈平行排列形成基原纖，若干根基原纖組成微原纖，微原纖平行地組合在一起形成原纖。有文獻(xiàn)報道［30］，纖維素結(jié)構(gòu)水平上的變化會影響纖維素在化學(xué)改性中的活性、纖維素被酶水解的易感性和纖維的強(qiáng)度性能等。由表4可知，纖維素基原纖聚集束尺寸大小順序?yàn)椋褐行韵礈靹┓ǎ舅嵝运夥ǎ舅嵝韵礈靹┓ǎ緣A液分離法。4種提取方法中，采用中性洗滌劑法獲得的煙草纖維素純度最高，半纖維素及木質(zhì)素對基原纖、微原纖的束縛作用減弱，而且對纖維素鏈結(jié)構(gòu)的影響最小，因此采用該方法提取所得的纖維素樣品的基原纖尺寸和基原纖聚集束尺寸均大于其他3種方法?？杉盎w表面是纖維素中能夠提供羥基與帶支鏈的化合物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)的部分［33］，在纖維素提取過程中，脫除半纖維素和木質(zhì)素，可及基原纖表面和基原纖聚集束的尺寸均會有所增加。對于由基原纖聚集形成基原纖聚集束的結(jié)構(gòu)，基原纖聚集束尺寸越小，可及基原纖的表面越大，纖維素羥基的反應(yīng)性和可及度也越高［32］。因此，不同纖維素提取方法會對煙草纖維素原纖結(jié)構(gòu)產(chǎn)生顯著影響。相較于酸性洗滌劑法、酸性水解法和堿液分離法，中性洗滌劑法對煙草纖維素的原纖結(jié)構(gòu)影響最小。

表4 煙草纖維素樣品C-4信號峰擬合的定量信息Tab.4 Quantification results from spectral fitting of tobacco cellulose C-4 signal peak

3 結(jié)論

①采用中性洗滌劑法、酸性洗滌劑法、酸性水解法和堿液分離法提取煙葉樣品中的纖維素，其中中性洗滌劑法提取所得煙草纖維素純度最高。②4種方法提取所得煙草纖維素的晶型相同，均以纖維素Iβ晶型為主，但分布存在明顯差異。中性洗滌劑法對煙草纖維素的晶型分布影響最小，酸性洗滌劑法、酸性水解法和堿液分離法能夠促使纖維素內(nèi)部少量結(jié)晶體發(fā)生從有序到無序的轉(zhuǎn)變。中性洗滌劑法獲得烤煙煙葉纖維素樣品的結(jié)晶度最高（43.8%），基原纖尺寸（3.4 nm）及基原纖聚集束尺寸（8.9 nm）最大。與其他3種方法相比，中性洗滌劑法對煙草纖維素結(jié)晶度和原纖結(jié)構(gòu)的影響最小。③不同提取方法對煙草纖維素的微觀結(jié)構(gòu)有顯著影響。對比其他3種方法，中性洗滌劑法對纖維素微觀結(jié)構(gòu)影響小，提取所得煙草纖維素純度高，因此適合作為煙草纖維素結(jié)構(gòu)研究中纖維素的提取方法。