朱茯神煎煮工藝△

宮鵬，張潔

1.安徽醫(yī)科大學(xué) 第一附屬醫(yī)院 高新分院，安徽 合肥 230088；2.安徽省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究院，安徽 合肥 230061

朱茯神是朱砂與茯神共同炮制的結(jié)果。朱砂與茯神按照3∶100的比例拌染便制成了朱茯神這味藥。鎮(zhèn)靜安神、清熱解毒、利水，主治心悸失眠、煩躁不寧、健忘、驚悸、瘡癰腫毒、高熱神昏、吐血、視物不明?，F(xiàn)代研究表明，其可治療精神疾患、神經(jīng)性嘔吐、慢性支氣管炎、結(jié)核盜汗、急性菌痢、病毒性心肌炎、面神經(jīng)炎等病。近年來(lái)，中藥的質(zhì)量規(guī)范及用藥安全性備受關(guān)注，朱茯神的安全性也遭遇了廣大民眾的質(zhì)疑，因?yàn)橹燔蛏裰泻兄焐斑@種礦物藥，大家質(zhì)疑的焦點(diǎn)就是朱砂中的重金屬元素汞是否會(huì)引起中毒。一部分人認(rèn)為[1-3]，含有朱砂的朱茯神在臨床使用時(shí)可能會(huì)產(chǎn)生有毒物質(zhì)；另一部分則認(rèn)為[4-6]，臨床使用的朱茯神中，朱砂的量不足以使重金屬蓄積，且臨床使用的溫度也不至于使硫化汞析出汞或者氧化汞等有毒物質(zhì)。因此，本文采用正交試驗(yàn)，以煎煮液中汞元素的含量為指標(biāo)，優(yōu)選朱茯神的最佳煎煮工藝。

1 材料

冷原子吸收測(cè)汞儀(上海華光儀器儀表廠)；XT-9900A型智能微波消解儀(上海新拓分析儀器科技有限公司)；XT-9816-Ⅱ型樣品前處理加熱儀(上海新拓分析儀器科技有限公司)。

水飛朱砂、茯神由安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院提供；朱茯神自制；汞標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000 μg·mL-1)(國(guó)家有色金屬及電子材料分析測(cè)試中心，批號(hào)：GSB04-1729-2004)；硫酸、硝酸鉀及其他試劑均為分析純；水為超純水。

2 方法

2.1 正交工藝設(shè)計(jì)

選擇加水倍數(shù)(A)、煎煮時(shí)間(B)、煎煮次數(shù)(C)為考察因素，各因素取3個(gè)水平，因素水平設(shè)置見(jiàn)表1。

表1 因素水平表

2.2 冷原子吸收光譜法測(cè)定朱茯神煎煮液中汞元素的含量

2.2.1 汞元素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的制備 精密量取汞元素標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000 μg·mL-1)1.0 mL，置100 mL量瓶中，加硝酸-重鉻酸鉀溶液至刻度，搖勻，精密量取0.5 mL，置100 mL量瓶中，加硝酸-重鉻酸鉀溶液至刻度，搖勻，制成50 ng·mL-1的汞標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(0～5 ℃貯存)。

2.2.2 供試品溶液的制備 精密吸取正交試驗(yàn)1～9號(hào)煎煮液各10.0 mL，至消化管中蒸至近干，加硝酸7 mL，按設(shè)定好的程序進(jìn)行微波消解，放涼，蒸至近干后，加水定容至10 mL，搖勻。分別吸取樣品溶液各5.0 mL，置測(cè)汞儀的汞蒸氣發(fā)生瓶中，分別加入氯化亞錫溶液1.0 mL，迅速蓋緊瓶蓋，隨后有氣泡產(chǎn)生，立即通過(guò)流速為1.0 L·min-1的氮?dú)?，使汞蒸氣?jīng)過(guò)氯化鈣干燥管進(jìn)入測(cè)汞儀中，從儀器讀數(shù)顯示的最高點(diǎn)測(cè)得其吸收值。

2.2.3 汞元素標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 分別精密量取汞標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液0、0.2、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mL置50 mL量瓶中，加硝酸溶液(1～9)稀釋至刻度，搖勻。分別吸取5.0 mL置測(cè)汞儀的汞蒸氣發(fā)生瓶中，分別加入氯化亞錫溶液1.0 mL，迅速蓋緊瓶蓋，隨后有氣泡產(chǎn)生，立即通過(guò)流速為1.0 L·min-1的氮?dú)?，使汞蒸氣?jīng)過(guò)氯化鈣干燥管進(jìn)入測(cè)汞儀中，從儀器讀數(shù)顯示的最高點(diǎn)測(cè)得其吸收值。然后打開(kāi)吸收瓶上的氣通閥，將產(chǎn)生的剩余汞蒸氣吸收于高錳酸鉀溶液(50 g·L-1)中，待測(cè)汞儀上的讀數(shù)達(dá)到零點(diǎn)時(shí)，進(jìn)行下一次測(cè)定，同時(shí)做空白試驗(yàn)。以吸光度值為縱坐標(biāo)，濃度值為橫坐標(biāo)，得標(biāo)準(zhǔn)曲線：Y=0.010 9X+0.000 2，r=0.999 5(n=6)。

2.2.4 精密度試驗(yàn) 取汞元素標(biāo)準(zhǔn)溶液(2.0 ng·mL-1)，連續(xù)測(cè)定6次，RSD為1.84%。

2.2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取汞元素標(biāo)準(zhǔn)溶液(2.0 ng·mL-1)，每隔30 min測(cè)定一次，共測(cè)定6次，RSD為1.87%。

2.2.6 重復(fù)性試驗(yàn) 精密吸取正交試驗(yàn)7號(hào)煎煮液10.0 mL，平行6份，依法測(cè)定，分別計(jì)算6份樣品溶液的含量，平均含量為390.12 ng，RSD為2.61%。

2.2.7 加樣回收率試驗(yàn) 精密吸取正交試驗(yàn)7號(hào)煎煮液5.0 mL，平行9份，至消化管中，分別加汞元素標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，蒸至近干，依法操作，分別計(jì)算汞元素的含量和加樣回收率，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 加樣回收率試驗(yàn)(n=9)

2.2.8樣品的測(cè)定 精密吸取9份正交試驗(yàn)煎煮液各10.0 mL，依法操作。將所測(cè)定吸光度值帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線中，計(jì)算試樣中的汞含量。

3 結(jié)果與分析

以冷原子吸收光譜法測(cè)定煎煮液中汞原子的含量為指標(biāo)，進(jìn)行方差分析，考察不同因素對(duì)煎煮結(jié)果的影響有無(wú)顯著性差異，結(jié)果見(jiàn)表3～4。

表3 L9(3)4正交試驗(yàn)工藝結(jié)果 ng

表4 方差分析表

注：F0.05(2，2)=19；F0.1(2，2)=9.0。

結(jié)果表明，煎煮液中汞元素的含量，主要和加水量及煎煮次數(shù)相關(guān)，但從篩選的條件看，煎煮液中汞的含量基本都在安全范圍內(nèi)(<1×10-6)。

4 討論

筆者還比較了朱茯神煎煮液直接測(cè)定汞含量和微波消解后測(cè)定的差異，發(fā)現(xiàn)微波消解后測(cè)出的數(shù)據(jù)較直接測(cè)定略高?？紤]可能是由于部分硫化汞不溶物混懸于煎煮液中，若直接測(cè)定，不會(huì)產(chǎn)生汞蒸氣，使得測(cè)定結(jié)果偏低。而經(jīng)過(guò)硝酸處理并微波消解后，轉(zhuǎn)化為可溶性汞，故而測(cè)定結(jié)果較直接測(cè)定略高。

結(jié)合文獻(xiàn)報(bào)道[7-11]，朱砂中的可溶性汞元素是引起中毒反應(yīng)的主要原因，但通過(guò)正交試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，朱茯神煎煮液中的汞元素含量并不是很高，均小于10-6，在安全范圍內(nèi)。因此，只要在煎煮過(guò)程中控制加水量和火候，不要煮糊，朱茯神煎煮并不會(huì)引起中毒。但長(zhǎng)期大劑量服用是否會(huì)引起汞元素在體內(nèi)的蓄積，還需要進(jìn)一步的藥理和毒理試驗(yàn)進(jìn)行進(jìn)一步的探討。