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    草木灰中納米級(jí)碳顆粒對(duì)綠豆芽生長(zhǎng)的影響

    2019-07-12 07:52:56屈小涵李學(xué)鳳黃荷蕤張?jiān)?/span>
    現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技 2019年11期
    關(guān)鍵詞:綠豆芽草木灰生長(zhǎng)

    屈小涵 李學(xué)鳳 黃荷蕤 張?jiān)?/p>

    摘要? ? 為了觀察草木灰中的納米級(jí)碳顆粒(以下簡(jiǎn)稱碳顆粒)對(duì)綠豆發(fā)芽及生長(zhǎng)的影響,試驗(yàn)采用透析方法制備了草木灰中的碳顆粒,并用電子顯微鏡進(jìn)行觀察,確認(rèn)其納米級(jí)別;然后將草木灰中純化出的碳顆粒溶液加入瓊脂糖凝膠中,制備含有碳顆粒的培養(yǎng)基;并將新鮮的綠豆種子分別放置于普通培養(yǎng)基和碳顆粒培養(yǎng)基凝膠上進(jìn)行培養(yǎng),待7 d后長(zhǎng)出子葉,測(cè)量莖葉長(zhǎng)度,并使用熒光顯微鏡觀察綠豆芽中碳顆粒的分布與富集情況。結(jié)果表明,碳顆粒培養(yǎng)基凝膠上生長(zhǎng)的綠豆芽較普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的綠豆芽長(zhǎng)度更長(zhǎng),說(shuō)明草木灰中的碳顆粒具有促進(jìn)綠豆芽生長(zhǎng)的作用。

    關(guān)鍵詞? ? 綠豆芽;草木灰;納米級(jí)碳顆粒;生長(zhǎng)

    中圖分類號(hào)? ? TQ917;S522? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼? ? A? ? ? ? 文章編號(hào)? ?1007-5739(2019)11-0050-02

    草木灰作為肥料應(yīng)用在我國(guó)具有悠久的歷史,最早可以追溯到先秦時(shí)期。草木灰的主要成分是碳酸鉀(K2CO3),一般認(rèn)為其中的鉀鹽等起到了鉀肥的作用。草木灰是一種來(lái)源廣泛、成本低廉、養(yǎng)分齊全、肥效明顯的無(wú)機(jī)農(nóng)家肥[1-2],在等鉀量施用草木灰時(shí),草木灰肥效好于化學(xué)鉀肥。目前研究認(rèn)為,草木灰可促使種子提前發(fā)芽,長(zhǎng)出的苗整齊、健壯,成苗率高,同時(shí)促進(jìn)根系生長(zhǎng)。另外,草木灰可以防止落葉、改善水果品質(zhì)、抑制病蟲(chóng)害[3]以及提高果樹(shù)抗旱性等。草木灰又稱冬灰、藜灰(《本經(jīng)》)、薪柴灰(《綱目》),是中醫(yī)臨床上的一種常用中藥炭藥,“炒炭止血”也是中醫(yī)藥的重要理論,比如黃芩炭、大黃炭等。最新研究表明,碳化后的植物藥中具有納米級(jí)碳顆粒,并具有生物活性,草木灰發(fā)揮止血作用的主要成分就是其中的納米級(jí)碳顆粒。

    但是查閱文獻(xiàn)并沒(méi)有發(fā)現(xiàn)關(guān)于草木灰中除了鉀離子外,其他成分(如納米級(jí)碳顆粒)會(huì)不會(huì)進(jìn)入植物并產(chǎn)生作用的相關(guān)研究報(bào)道。進(jìn)一步查閱文獻(xiàn)得知,灰燼中較大的顆粒不會(huì)溶解,但是其中納米級(jí)別的碳顆??梢孕纬赡z體溶液進(jìn)入土壤中,而關(guān)于其在植物中的分布以及對(duì)植物生長(zhǎng)的影響也未被研究過(guò)。

    因此,本試驗(yàn)設(shè)計(jì)通過(guò)透析的方法除去無(wú)機(jī)鹽等小分子,從草木灰中純化出納米級(jí)碳顆粒。由于納米級(jí)別的碳顆??梢园l(fā)出藍(lán)色熒光[4],故試驗(yàn)中使用熒光顯微鏡觀察其在植物中的分布,同時(shí)觀察其對(duì)植物生長(zhǎng)的影響。

    1? ? 材料與方法

    1.1? ? 試驗(yàn)材料

    綠豆,購(gòu)自物美超市;瓊脂糖,購(gòu)自北京化學(xué)試劑有限公司;去離子水,采用哇哈哈純凈水;草木灰,購(gòu)自北京同仁堂有限責(zé)任公司;三角瓶等玻璃用品,購(gòu)自天津福晨玻璃儀器廠;透析袋:截留分子量為1 000 Da,購(gòu)自北京瑞達(dá)振輝有限公司。

    電子顯微鏡(JEM-1230型電鏡(日本)),熒光顯微鏡(奧林巴斯IX73型顯微鏡(美國(guó)))。

    1.2? ? 試驗(yàn)方法

    1.2.1? ? 草木灰中碳納米顆粒的純化與鑒定。稱取10 g草木灰,用研缽將塊狀的草木灰搗碎成粉末,加入50 mL去離子水,充分?jǐn)嚢?,混勻,形成混懸液。靜置30 min后,棄去沉淀,以除去不溶解的大顆粒。上清液裝入截留分子量為1 000 Da的透析袋中,透析3 d,中間多次換液,以去除鹽類等小分子物質(zhì),得到的透析液為膠體溶液。將膠體溶液滴到銅片上,使用有機(jī)金屬研究所的JEM-1230型電子顯微鏡對(duì)膠體溶液中的碳顆粒進(jìn)行觀察。

    1.2.2? ? 植物培養(yǎng)基的制備。稱取0.3 g瓊脂糖,置于三角瓶中,加入30 mL TBE緩沖液,將該三角瓶置于微波爐中加熱至瓊脂糖溶解,待瓊脂糖冷卻至60 ℃以下后,加入5 mL草木灰水煮并透析后的溶液(將小分子化合物去除,只剩納米級(jí)碳顆粒);以加入等體積水溶液為對(duì)照。將配制好的凝膠倒入三角瓶中,室溫靜置冷卻。

    1.3? ? 綠豆種子培養(yǎng)與觀察

    待凝膠凝固后,將新鮮、顆粒均一、飽滿的綠豆種子隨機(jī)分組放置于凝膠上,三角瓶用扎有氣孔的保鮮膜封口,然后放入恒溫恒濕箱中,25 ℃培養(yǎng),并設(shè)置12 h光照、12 h黑暗模擬晝夜變化。1~2 d后,綠豆相繼開(kāi)始發(fā)芽;7 d左右胚乳基本消失,根系開(kāi)始發(fā)達(dá),并長(zhǎng)出2片子葉。在培養(yǎng)7 d后,統(tǒng)計(jì)發(fā)芽率并用直尺測(cè)量生長(zhǎng)狀態(tài);切取豆芽根、莖、葉制成切片,使用奧林巴斯IX73型熒光顯微鏡觀察切片。

    2? ? 結(jié)果與分析

    2.1? ? 草木灰中碳納米顆粒的純化與鑒定

    從圖1可以看出,草木灰中存在6~8 nm的球形碳納米顆粒。

    2.2? ? 碳納米顆粒在植物中的分布

    由于納米級(jí)別的碳納米顆??梢园l(fā)熒光,故可以在碳納米顆粒處理組觀察到明顯的熒光,如圖2(a)所示;而對(duì)照組則觀察不到熒光,如圖2(b)所示。從圖3可以看出,通過(guò)熒光顯微鏡可以觀察到,在根、莖、葉中出現(xiàn)了明亮的藍(lán)色熒光。從圖4、5也可以看出,植物莖中的導(dǎo)管、篩管及葉脈中充滿了藍(lán)色熒光。這表明碳顆粒在這些部位均有分布,因而可以推測(cè)這些碳顆粒首先被植物根部攝取,并通過(guò)莖中的導(dǎo)管向上運(yùn)輸,最終在子葉的葉脈中富集。

    2.3? ? 碳納米顆粒對(duì)綠豆芽長(zhǎng)度的影響

    通過(guò)測(cè)量與統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn),2個(gè)處理組之間綠豆的發(fā)芽率沒(méi)有差異,均為9粒種子中有8粒發(fā)芽,且對(duì)綠豆芽的生長(zhǎng)形態(tài)影響不明顯(圖6),而在綠豆芽生長(zhǎng)長(zhǎng)度(圖7)上,碳納米顆粒溶液組較對(duì)照組有顯著提高,這意味著碳納米顆??赡軐?duì)植物的生長(zhǎng)有利。

    3? ? 結(jié)論與討論

    早在數(shù)千年前,中國(guó)古人就知道通過(guò)燒荒提高土壤肥力?,F(xiàn)代研究一般認(rèn)為,燃燒后的灰燼會(huì)為植物生長(zhǎng)提供鉀肥、氮肥等營(yíng)養(yǎng),但是并沒(méi)有認(rèn)為灰燼中的碳顆粒在其中起到作用。在本試驗(yàn)中,借助納米級(jí)碳顆粒的熒光特性,觀察到了其可以被植物攝取并吸收富集,最終還對(duì)植物的生長(zhǎng)產(chǎn)生了正向影響。這說(shuō)明去除小分子之后的草木灰碳納米顆??梢员恢参镂詹⒛艽龠M(jìn)生長(zhǎng),草木灰對(duì)植物生長(zhǎng)的影響并不只是單純通過(guò)鉀、氮離子的作用,而且還與其中含有的碳顆粒具有密切關(guān)系。目前,尚不清楚是通過(guò)何種方式使其促進(jìn)了豆芽的生長(zhǎng),而且其是否能提高光合作用效率、促進(jìn)植物對(duì)養(yǎng)分的吸收或加快植物的新陳代謝等仍需要通過(guò)進(jìn)一步開(kāi)展合理的對(duì)照試驗(yàn)來(lái)證明。本試驗(yàn)只是宏觀觀察了豆芽的生長(zhǎng),對(duì)于碳顆粒是否在微觀上影響了?其他觀測(cè)不到的性質(zhì)目前尚不能確定。因此,如果條件允許,可以通過(guò)檢測(cè)植物基因組及轉(zhuǎn)錄組的變化來(lái)全面探究碳顆粒對(duì)植物微觀上的影響。

    本試驗(yàn)僅僅觀察到了植物對(duì)納米級(jí)碳顆粒的吸收、分布與富集,并發(fā)現(xiàn)了碳顆??赡軐?duì)植物的生長(zhǎng)有利;但是并不清楚是否只有來(lái)源于草木灰的碳納米顆粒對(duì)植物生長(zhǎng)有利。因此,在后續(xù)工作中將進(jìn)一步考察不同來(lái)源的碳納米顆粒在植物中的分布情況和對(duì)植物生長(zhǎng)的影響。同時(shí),在本試驗(yàn)中,雖然發(fā)現(xiàn)了碳顆粒有促進(jìn)植物生長(zhǎng)的作用,但是其具體的作用機(jī)制尚不明確,下一步應(yīng)對(duì)其具體機(jī)制進(jìn)行研究。

    草木灰中的碳納米顆??梢员恢参镂詹⒛艽龠M(jìn)植物生長(zhǎng),這一發(fā)現(xiàn)可能對(duì)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)具有巨大的意義和潛在應(yīng)用價(jià)值。目前,促進(jìn)植物生長(zhǎng)的因素主要有氮肥、磷肥、鉀肥、生長(zhǎng)因子、土壤微生物及光照等[5-6],而通過(guò)草木灰進(jìn)入土壤中的碳納米顆粒對(duì)植物生長(zhǎng)的影響研究十分有限,本研究為尋找促進(jìn)植物生長(zhǎng)的方法提供了一個(gè)全新的角度。

    4? ? 參考文獻(xiàn)

    [1] 胡瑞軒.草木灰的積攢和施用[J].農(nóng)民致富之友,1999(3):13.

    [2] 石峰,李楠,郭梓涵,等.草木灰顆粒肥對(duì)土壤速效養(yǎng)分的影響[J].河南農(nóng)業(yè),2016(20):33-34.

    [3] 趙金.草木灰防治果樹(shù)病害的作用[N].陜西科技報(bào),2018-11-13(006).

    [4] 顏范勇,鄒宇,王猛,等.熒光碳點(diǎn)的制備及應(yīng)用[J].化學(xué)進(jìn)展,2014,6(1):61-74.

    [5] 趙啟蒙.用于植物生長(zhǎng)補(bǔ)光的LED照明系統(tǒng)研究[D].上海:復(fù)旦大學(xué),2012.

    [6] 吳建鋒,林先貴.土壤微生物在促進(jìn)植物生長(zhǎng)方面的作用[J].土壤,2003,35(1):18-21.

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