飼料脂肪源對大菱鲆生長、體組成及血清生化指標(biāo)的影響

趙曼茜， 張斐然， 吳立新*， ,李思萌 ，2， 李笑迎

（1.大連海洋大學(xué)遼寧省水生生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，遼寧大連116023；2.聊城市開發(fā)區(qū)實(shí)驗(yàn)中學(xué)，山東聊城 252000）

飼料中的脂肪是魚類必需脂肪酸的來源，具有多種生理功能，是魚類重要的營養(yǎng)成分之一。有研究表明，不同脂肪源對魚類生長、體組成和血清生化指標(biāo)影響不同。馮健和覃志彪（2006）的試驗(yàn)結(jié)果表明，太平洋鮭（Oncorhynchus spp.）日糧中脂肪以添加大豆磷脂的生長性能最好；陳家林等（2011）研究發(fā)現(xiàn)，豆油、椰子油和菜籽油是異育銀鯽 （Carassius auratus gibelio）飼料中良好的脂肪源；吉紅等 （2009）建議生產(chǎn)中使用豆油作為鯽（Carassius auratus）飼料的脂肪源等。因此，研究不同魚類適宜的脂肪源意義重大。

大菱鲆（Scophthalmus maximus）又名多寶魚，是我國北方最重要的海水養(yǎng)殖魚類之一 （馬愛軍等，2001）。本試驗(yàn)以魚油（FO）、豆油（SO）、菜籽油（RO）、花生油（PO）、豬油（L）、魚油-豆油（FSO）（1∶1）和混合油（MIX）（魚油∶豆油∶豬油=3∶4∶3）為脂肪源的7種飼料，研究不同脂肪源對大菱鲆生長、體組成以及血清生化指標(biāo)的影響，為篩選合適的大菱鲆飼料脂肪源提供一定的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)飼料的配制 本試驗(yàn)共配制了7種飼料，除脂肪源不同外，其余飼料成分相同，試驗(yàn)飼料組成及營養(yǎng)水平見表1。飼料蛋白源主要由魚粉、豆粕提供，分別添加 6%的魚油（FO）、豆油（SO）、菜籽油（RO）、花生油（PO）、豬油（L）、魚油-豆油 （1:1）（FSO） 和魚油-豆油-豬油（3:4:3）（MIX）。飼料原料粉碎后過60目篩，按試驗(yàn)配比充分混勻，用制粒機(jī)制作成粒徑為2 mm的顆粒飼料，自然風(fēng)干后存放于-20℃冰箱備用。

1.2 試驗(yàn)魚與飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)用大菱鲆購自大連天正實(shí)業(yè)有限公司。以基礎(chǔ)飼料（FO）馴養(yǎng)兩周。試驗(yàn)開始前，將魚饑餓24 h，選取體質(zhì)健康、規(guī)格均勻的魚[（27.31±0.10）g]252 尾。試驗(yàn)共設(shè) 7組，每組設(shè)3個(gè)重復(fù)，共21個(gè)水族箱（60 cm×45 cm×40 cm，實(shí)際水量90 L），每個(gè)水族箱放入12尾魚，飼養(yǎng)40 d。試驗(yàn)期間，以砂濾后的海水為水源，日換水一次，換水量為1/3～1/2。水溫控制在14.0～ 19.0℃，溶解氧＞6.0 mg/L，氨氮＜0.1 mg/L，pH 8.0～8.1，光照采用日光燈控制，周期為12 L/12 D。每日飽食投喂兩次（07:30和17:30），投喂后30 min左右收集殘餌。

1.3 樣品采集 試驗(yàn)結(jié)束時(shí)將魚饑餓24 h，將每箱魚分別稱重（精確至0.01 g）并隨機(jī)取3尾裝于自封袋，置于-20℃冰箱中保存，用于常規(guī)體成分測定。每箱隨機(jī)另取2尾于冰盤解剖，取其背肌、內(nèi)臟和空殼，裝入對應(yīng)自封袋中置于-20℃冰箱待測。每箱隨機(jī)另取2尾尾靜脈取血，經(jīng)3500 r/min離心15 min制得血清，置于-20℃冰箱待測。

1.4 樣品分析測定 飼料和魚體常規(guī)成分測定參照AOAC（1995）。水分通過在105℃烘箱烘至恒定質(zhì)量測定；粗蛋白質(zhì)含量用凱氏定氮儀測定（總氮×6.25）；粗脂肪含量采用索氏抽提法，以乙醚為抽提液測定；粗灰分含量通過在馬福爐550℃灼燒（8 h）測定；血清生化指標(biāo)由大連市體檢中心測定。每個(gè)樣品重復(fù)測定2次，如果相對偏差超過2%，則增加重復(fù)測定次數(shù)，采用兩個(gè)相對偏差在2%以下的測定值平均數(shù)作為測定結(jié)果。

1.5 計(jì)算公式

特定生長率/（%/d）=（lnWt-lnW0）/t×100；

蛋白質(zhì)效率/%=（Wt-W0）/（Wd×Cp）×100；

肥滿度/%=Wt/L3×100；

飼料系數(shù)=Wd/（Wt-W0）。

式中：W0和Wt分別為試驗(yàn)開始和結(jié)束時(shí)魚的濕重，g；Wd為攝入的飼料干重，g；Cp為飼料蛋白質(zhì)含量，%；L 為魚體長，cm；t為試驗(yàn)天數(shù)，d。

表1 試驗(yàn)飼料組成及營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.6 統(tǒng)計(jì)分析 采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析（one-way ANOVA），若差異顯著（P＜0.05），則進(jìn)行Duncan's多重比較檢驗(yàn)組間的差異，統(tǒng)計(jì)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

2 結(jié)果

2.1 生長性能 如表2所示，魚油-豆油組的特定生長率顯著高于其他各組，較魚油組（基礎(chǔ)飼料組）提高了10.42%（P＜0.05），豬油組特定生長率最低，較魚油組降低了19.79%（P＜0.05）；從蛋白質(zhì)效率來看，除了魚油-豆油組顯著高于混合油組外 （P＜0.05），其他各組間無顯著差異 （P＞0.05）；飼料系數(shù)以魚油-豆油組最低，但與魚油、豆油、菜籽油組之間無顯著差異（P＞0.05），豬油、混合油、花生油組飼料系數(shù)分別較魚油組提高了36.36%、33.33%、25.25%（P ＜ 0.05）。

表2 飼料脂肪源對大菱鲆生長和飼料利用的影響

2.2 體組成和體組織水分、脂肪含量 如表3所示，飼料脂肪源對魚體水分、粗脂肪和粗灰分含量均沒有顯著影響（P＞0.05）。豬油組粗蛋白質(zhì)含量顯著低于菜籽油組、花生油組和魚油組，其中較魚油組降低了4.47%（P＜0.05），其余各組間無顯著差異（P＞0.05）。從表4可以看出，除豬油組魚體空殼的水分顯著高于菜籽油組和混合油組 （P＜0.05）外，飼料脂肪源對大菱鲆空殼、內(nèi)臟、背肌的水分和脂肪含量沒有顯著影響（P＞0.05）。

表3 飼料脂肪源對大菱鲆魚體生化組成的影響%濕重

2.3 血清生化指標(biāo) 如表5所示，各組間總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇和堿性磷酸酶無顯著差異（P＞0.05）。豬油組和混合油組谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量顯著高于其余各組，較魚油組分別升高了124.89%和119.94%（P＜0.05），其余各組間沒有顯著差異（P＞0.05）；混合油組谷草轉(zhuǎn)氨酶含量顯著高于其余各組，較魚油組上升了352.51%（P＜0.05），其余各組間無顯著差異（P＞0.05）。

表4 飼料脂肪源對大菱鲆各組織水分和脂肪含量的影響

表5 飼料脂肪源對大菱鲆血清生化指標(biāo)的影響U/L

3 討論

本試驗(yàn)結(jié)果顯示，各組間特定生長率存在顯著差異（P＜0.05），以魚油-豆油組最高，顯著高于魚油、豆油、菜籽油組和花生油、混合油、豬油組（P＜0.05），這與張媛媛等（2012）用不同脂肪源飼料飼喂異育銀鯽的研究結(jié)果相似。蛋白質(zhì)效率除混合油組顯著低于魚油-豆油組（P＜0.05）外，其他各組間飼料營養(yǎng)價(jià)值與魚油無顯著差異 （P＞0.05）。從飼料系數(shù)來看，大菱鲆對魚油-豆油組、魚油組、菜籽油組和豆油組飼料利用率高。不同的飼料脂肪源對魚體的肥滿度沒有顯著影響，與於葉兵等（2012）用不同脂肪源飼料飼喂異育銀鯽、杜震宇等（2002）對鱸魚（Lateolabrax japonicus）的研究結(jié)果一致。

本試驗(yàn)中魚體水分、粗脂肪含量在各組間沒有顯著差異 （P＞0.05），這與真鯛（Pagrosomus major）（Glencross等，2003）、 異育銀鯽 （陳家林等，2011）等的研究結(jié)果一致。通常不同脂肪源對魚體組織的脂肪含量有一定的影響（Sargent等，2002），如衛(wèi)曉怡和陳舜勝（2003）研究表明，大豆油添加組團(tuán)頭魴（Megalobrama amblycephala）魚體背部肌肉脂質(zhì)積累較好，但在本試驗(yàn)中，各試驗(yàn)組空殼、內(nèi)臟、背肌的脂肪含量均無顯著差異（P ＞ 0.05）。

魚類血清生化指標(biāo)能夠反映魚類對疾病的生理應(yīng)答（Hrubec等，2008）。血脂含量占全身脂肪含量的很小一部分，但其代謝非常活躍，魚類腸道吸收的外源性食物脂類，肝臟合成的內(nèi)源性脂類和脂肪組織的利用都要經(jīng)過血液再到其他組織，脂肪的運(yùn)輸也要經(jīng)過血清，因此，血脂水平可以反映全身脂類代謝情況 （Hiraoka等，1979；Nakagawa，1978）。血清中總膽固醇和甘油三酯含量過高可能會導(dǎo)致心血管疾病，而高密度脂蛋白膽固醇可以將膽固醇從動(dòng)脈壁運(yùn)送到肝臟，通過肝臟轉(zhuǎn)化代謝。因此高密度脂蛋白膽固醇有減輕血液中過量的膽固醇，減慢血管炎癥，降低心血管疾病發(fā)生率的功能（孫明堂等，1982）。本試驗(yàn)中，各組間的總膽固醇、甘油三酯和高密度脂蛋白膽固醇含量沒有顯著差異（P＞0.05），說明這7種脂肪源不會對大菱鲆幼魚的脂肪代謝產(chǎn)生不利影響。谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶存在于肝組織中，魚類血液中的谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性變化可以反映肝細(xì)胞受損情況 （康格菲，1989）。在正常情況下，魚類血清中轉(zhuǎn)氨酶的活性較低，血液中只含有少量的由魚體組織細(xì)胞釋放的轉(zhuǎn)氨酶，當(dāng)受損組織范圍較大或組織病變引起細(xì)胞膜通透性增加時(shí)，使細(xì)胞主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)體系受到損傷，導(dǎo)致物質(zhì)主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制和滲透壓調(diào)節(jié)能力削弱從而消失，甚至細(xì)胞解體，血液中滲入由組織細(xì)胞內(nèi)釋放的大量谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶，導(dǎo)致血液中谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性升高（高露姣等，2005；惠天朝等，2000）。本試驗(yàn)中豬油組和混合油組的谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量顯著高于其他各組（P＜0.05），混合油組的谷草轉(zhuǎn)氨酶含量顯著高于其他各組 （P＜0.05），這表明豬油組和混合油組魚體肝臟受到一定程度的損傷，豬油和魚油-豆油-豬油（3:4:3）不適宜作為大菱鲆的飼料脂肪源。這與高露姣等（2005）在飼料中添加豬油飼喂施氏鱘的研究結(jié)果一致。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，魚油-豆油（1:1）、豆油和菜籽油可作為大菱鲆飼料合適的脂肪源，而豬油、混合油組魚體肝臟可能受到一定程度的損傷，豬油、混合油不適宜作為大菱鲆的飼料脂肪源。