雞包涵體肝炎的診斷方法與防制措施

來慶梅 丁愛君 郭龍宗 李玉燕

中圖分類號：S858.311.33? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識碼：C? ? ?文章編號：1673-1085（2019）3-0027-03

雞包涵體肝炎（IBH）又稱貧血綜合征，是由I亞群禽腺病毒引起的雞的一種急性傳染病，以突然死亡、嚴(yán)重貧血、黃疸以及肝臟腫脹出血、有壞死灶和肝細(xì)胞內(nèi)形成核內(nèi)包涵體為特征。

1? 病原學(xué)

包涵體肝炎（IBH）病毒屬于腺病毒科、禽腺病毒屬，病毒顆粒直徑為70～90nm，無囊膜，呈正20面體對稱結(jié)構(gòu)。在氯化銫中的浮密度為1.32～1.37g/ml。為雙股DNA病毒。病毒復(fù)制分兩個階段。雞腺病毒有12個血清型。該病毒對外界環(huán)境的抵抗力較強(qiáng)。耐熱，一般來說，該病毒在水溶液中56℃ 30min被滅活，而存在雙價離子時熱穩(wěn)定性會降低，有的病毒株在60℃，甚至70℃下30min仍具有活力。對脂溶劑，如乙醚和氯仿、脫氧膽堿酸鈉、胰蛋白酶、2%酚和50%乙醇等具有抵抗力，同時耐受pH3～9，但在濃度1：1000的甲醛中可被滅活。另外，病毒的增殖也可被DNA抑制劑IuDR和BuDR所抑制。

2? 發(fā)病機(jī)理和流行病學(xué)

該病多發(fā)生于3～7周齡的肉雞，早至7日齡、晚至20周齡也有發(fā)生。蛋雞多發(fā)于18周齡前。3周齡以下的雛雞和18周齡以上的成年雞很少發(fā)病。雞包涵體肝炎可發(fā)生垂直傳播和水平傳播。腺病毒可通過胚傳播，用感染雞的胚和子代雛雞來制備細(xì)胞培養(yǎng)物時，可再激活腺病毒性。病毒可存在于糞便、氣管和鼻粘膜以及腎臟中。因此病毒可在各種排泄物中傳播，并且糞便中病毒滴度最高。病毒也存在于精液中，預(yù)示著人工受精具有潛在的危險。雞感染1d后就能分離到腺病毒，但正常情況下在3周后才會排毒。肉雞排毒的高峰是在感染后第4～6周，后備母雞的排毒高峰是在感染后第5～9周，在產(chǎn)蛋高峰時，出現(xiàn)二次排毒期。春、秋兩季多發(fā)。I亞群禽腺病毒是潛在性、條件性病原。在飼養(yǎng)管理水平差、存在應(yīng)激反應(yīng)時易發(fā)病;免疫法氏囊活疫苗或感染傳染性法氏囊病、傳染性貧血等免疫抑制病時則大大增加該病的發(fā)病率和死亡率。

3? 臨床癥狀和病理變化

自然感染的雞群，在3～4d后突然出現(xiàn)死亡高峰，一般第5天停止，但偶爾也持續(xù)2～3周，發(fā)病率低，病雞呈蹲伏姿勢，精神不振、食欲減退、嗜睡、羽毛粗亂且缺少光澤，雞冠、肉髯、耳垂、面部皮膚和眼結(jié)膜蒼白，并有貧血和黃疸癥狀。水樣下痢，肛門周圍有污穢。48h內(nèi)死亡，死亡率可達(dá)10%，偶爾高達(dá)30%。雞包涵體肝炎與新城疫、法氏囊、貧血因子、大腸桿菌病等疾病混感時可使發(fā)病率和死亡率增高。

病雞全身皮膚蒼白貧血，血液色淡、稀薄如水，末梢血液稀薄，血紅細(xì)胞和血小板明顯減少。特征性病變在肝臟，肝腫大、肥厚、褪色，呈淡褐色或黃褐色，質(zhì)脆易破裂，表面呈點狀或條索狀出血，包膜下有較大面積的淤血和灶狀出血，并有大小不等的黃色壞死點或壞死斑（見圖1），肝脂肪變性發(fā)黃，嚴(yán)重的雞包涵體肝炎就好像煮熟的雞蛋黃，腎腫大呈灰白色并有出血點（見圖2），骨髓呈灰白色或黃色。胸部及腿部肌肉有出血點和出血斑。肝細(xì)胞內(nèi)可見有包涵體，嗜酸性，大而圓，或者不規(guī)則，周邊有明顯的蒼白暈，偶見有嗜堿性包涵體。

4? 診斷方法

根據(jù)流行病學(xué)、臨診癥狀和病理特點可做出初步診斷，確診需進(jìn)行實驗室診斷。

4.1? 實驗室診斷? 可選用病雞的肝臟和脾臟，將樣品制成10%懸液，接種9～12日齡的SPF雞胚，或無母原抗體雞胚的卵黃囊或絨毛尿囊膜上，經(jīng) 2～7d雞胚死亡，胚體全身充血或出血，肝臟有黃色壞死灶，在肝細(xì)胞內(nèi)可檢出嗜堿性核內(nèi)包涵體（見圖3）。雞胚成纖維細(xì)胞和氣管培養(yǎng)物不敏感。雖然都是經(jīng)過三次傳代，但一般每次培養(yǎng)7d，盲傳兩代也就足夠了。分離鑒定該病毒，可通過電鏡直接檢查培養(yǎng)細(xì)胞裂解物，能很快得出陽性結(jié)果。利用異硫氰酸熒光素標(biāo)記的禽腺病毒抗血清，采用細(xì)胞免疫學(xué)（直接免疫熒光）染色技術(shù)可檢測感染細(xì)胞中的腺病毒。利用所有已知血清型的標(biāo)準(zhǔn)參照血清進(jìn)行病毒中和實驗可以鑒定分離毒的血清型。也可采用分子生物學(xué)方法進(jìn)行病毒鑒定，利用DNA原位雜交（ISH）技術(shù)檢測組織樣品中的腺病毒。利用普通診斷PCR檢測病毒群時，采用檢測種和血清型的引物更為實用。采用雙向免疫擴(kuò)散（DID）實驗可以檢測針對群特異性抗原的抗體，該方法對自然感染的病例很敏感。還可采用血清中和試驗、間接免疫熒光抗體試驗和酶聯(lián)免疫吸附試驗等方法診斷。

4.2? 鑒別診斷? 與住白細(xì)胞原蟲病的鑒別：二者外觀都有嚴(yán)重的貧血癥狀，但住白細(xì)胞原蟲病急性死亡的較少，末梢血液涂片可見到配子生殖Ⅱ期原蟲，剖檢時肌肉、內(nèi)臟和腸漿膜出血，多呈大頭針帽狀凸出表面，較硬，肝臟無斑駁狀變化。與傳染性貧血因子的鑒別：二者均有嚴(yán)重貧血，但雞傳染性貧血因子急性死亡的較少，發(fā)病的多為2～4周齡雛雞，比包涵體肝炎患病雞的日齡大，而且剖檢不見肝臟斑駁狀。與傳染性法氏囊病的鑒別：區(qū)別點是傳染性法氏囊病有典型的法氏囊腫大、出血和漿膜下膠凍樣水腫的變化。

5? 預(yù)防和控制措施

目前治療該病尚無有效疫苗和藥物，只能采取綜合性防制措施，以預(yù)防為主，加強(qiáng)飼養(yǎng)管理。

5.1? 防止病原的傳入? 對沒有發(fā)生過該病的地區(qū)、雞場和雞群，要把好引入關(guān)，嚴(yán)防傳入該病。堅持自繁自養(yǎng)原則，不從有該病的地區(qū)和雞場引進(jìn)種雞和種蛋。凈化免疫抑制性疾病，做好法氏囊病和傳染性雞貧血因子等疾病的防制。

5.2? 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理? 堅持不同群的雞分群隔離飼養(yǎng)和定期消毒，防止密度過大，經(jīng)常通風(fēng)換氣，提高雞群的抵抗力。本病共12個血清型，不同血清型交叉保護(hù)率低。疑似發(fā)病種禽所產(chǎn)種蛋要停止孵化。發(fā)病種禽排毒高峰在發(fā)病后5～9周，發(fā)現(xiàn)商品代雞群發(fā)病，發(fā)病種禽10周內(nèi)所產(chǎn)種蛋停止孵化，降低商品代雞群的發(fā)病率。

5.3? 發(fā)病雞場執(zhí)行嚴(yán)格的消毒和空舍管理制度? 發(fā)病雞場在飲水飼料中添加抗生素和多種維生素預(yù)防雞群的繼發(fā)感染?？丈崞趹?yīng)在7周以上，雞舍用0.1%～0.3%次氯酸鈉噴霧、福爾馬林熏蒸等徹底消毒;糞便加入0.5%生石灰堆積發(fā)酵，飲水用漂白粉消毒。