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      蒲公英提取物的制備及質(zhì)量檢查

      2019-07-05 08:44:26范艷美李啟照
      山東化工 2019年12期
      關(guān)鍵詞:蒲公英提取物咖啡

      吳 雪,范艷美,楊 鐮,李啟照,姚 凱

      (安徽新華學(xué)院,安徽 合肥 230088)

      蒲公英為多年生草本菊科植物,氣微,味微苦,具有很高的藥用價(jià)值,能清熱解毒,利尿散結(jié),還可以治療急性乳腺炎,淋巴腺炎,疔毒瘡腫,急性結(jié)膜炎,感冒發(fā)熱急性扁桃體炎,急性支氣管炎,胃炎,肝炎,膽囊炎,尿路感染等[1]。

      蒲公英含有多種化學(xué)成分,主要包括黃酮類,萜類,酚酸類,萜類,多糖類,植物甾醇類[2-3]。中國(guó)藥典2015年版一部主要以咖啡酸含量作為質(zhì)控指標(biāo)[4]??Х确人?,又名3,4-二羥基肉桂酸,屬于酚酸類化合物,具有收縮增固微血管,促進(jìn)凝血因子功能,升高白血球及血小板之功效,用于白細(xì)胞、血小板減少癥的治療,此外還具有抗氧化、抗腫瘤和腦保護(hù)等多種藥理作用[5-6]。目前常用高效液相色譜法測(cè)定咖啡酸的含量。

      1 儀器與材料

      Agilent 1200高效液相色譜儀,Agilent HC-C18(4.6×250mm,5μm)色譜柱,F(xiàn)A2004電子天平(上海越平科學(xué)儀器有限公司)。甲酸,95%乙醇為分析純。甲醇為色譜純??Х人釋?duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所,批號(hào)為110885-200102)。蒲公英(安徽產(chǎn))。

      2 方法與結(jié)果

      2.1 蒲公英提取物的制備

      稱取蒲公英粗粉50g,配置500mL 60%乙醇溶液(料液比1∶10),用甲酸調(diào)節(jié)pH值3~5,將二者置于閃式提取器罐中,閃式提取兩次,每次2min。抽濾,濾液減壓蒸餾濃縮得浸膏,用丙酮萃取兩次,萃取液脫溶,置于真空干燥箱干燥,制得蒲公英提取物。

      2.2 咖啡酸對(duì)照品的制備

      精密稱取咖啡酸對(duì)照品13.62mg,置100mL容量瓶中,用甲醇定容到刻度,溶解搖勻,得咖啡酸對(duì)照品溶液(濃度0.1362mg/mL)。

      2.3 供試品溶液的制備

      精密稱取上述方法制備的蒲公英提取物1.0g,置100mL容量瓶中,用甲醇定容到刻度,搖勻,過(guò)濾,取續(xù)濾液,得供試品溶液備用。

      2.4 色譜條件

      色譜柱:Agilent HC-C18(4.6×250mm,5μm);流動(dòng)相:甲醇-0.1%磷酸水溶液 (25∶ 75);柱溫30℃,流速1.0mL/min,檢測(cè)波長(zhǎng)323mm??Х人釋?duì)照品和樣品色譜圖見(jiàn)圖1。

      2.5 線性關(guān)系考察

      精密量取咖啡酸對(duì)照品溶液1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0mL,分別置于50mL容量瓶中,用甲醇定容到刻度,得6個(gè)不同濃度的對(duì)照品溶液,分別進(jìn)樣20μL測(cè)定峰面積。以峰面積縱坐標(biāo)濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得回歸方程y=389.91x+268.56(r2=0.9989),表明咖啡酸在0.0027至0.0163mg/mL濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

      2.6 精密度試驗(yàn)

      精密吸取咖啡酸對(duì)照品溶液20μL,連續(xù)進(jìn)樣6次,算得峰面積的RSD為1.34%,表明儀器精密度良好。

      2.7 穩(wěn)定性考察

      取同一樣品供試品溶液,按上述方法分別于不同時(shí)間(1h,2h,3h,4h,5h,6h,8h)測(cè)定峰面積,RSD為0.97%,顯示在8h內(nèi)穩(wěn)定。結(jié)果表明供試品穩(wěn)定性好。

      2.8 重現(xiàn)性試驗(yàn)

      稱取同一批蒲公英提取物樣品5份,每份1g,按供試品溶液制備方法進(jìn)行平行實(shí)驗(yàn),每份進(jìn)樣20μL,測(cè)定峰面積,計(jì)算咖啡酸的含量。RSD為1.36%,表明本方法的重現(xiàn)性良好。

      2.9 加樣回收實(shí)驗(yàn)

      精密稱取咖啡算對(duì)照品6.0mg,分別加入6份已知含量的1克的樣品中, 按供試品溶液制備方法制備,每份進(jìn)樣20μL,測(cè)定峰面積,計(jì)算回收率。 計(jì)算RSD為1.58%,表明本方法回收率較好。

      圖1 咖啡酸對(duì)照品(A)和樣品(B)色譜圖

      3 樣品含量測(cè)定

      用上述方法對(duì)蒲公英提取物中咖啡酸進(jìn)行含量測(cè)定,得蒲公英提取物中咖啡酸含量是4.599mg/g。

      4 討論

      蒲公英提取物的制備方法比較多,本文通過(guò)查閱相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行比較總結(jié),選擇了合適的提取溶劑,料液比,采用新型的閃式提取法制備蒲公英提取物,并測(cè)定其中主要成分咖啡酸的含量。結(jié)果表明,此法操作簡(jiǎn)單快速,高效節(jié)能,質(zhì)量檢查符合要求,可作為制備蒲公英提取物的一種方法。

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