全血標本紅細胞濃度對不同放置時間后血糖測定結(jié)果影響研究

管麗紅,陳卓敏,王占科,黃 杰,李麗萍,周 媛,王 康,關(guān)曉輝

(1.中國人民解放軍第九四醫(yī)院體檢中心，江西南昌 330002；2.中國人民解放軍第九四醫(yī)院護理部，江西南昌 330002；3.中國人民解放軍第九四醫(yī)院檢驗科，江西南昌 330002；4.南昌大學附屬第三醫(yī)院檢驗科，江西南昌 330008；5.南昌大學第二附屬醫(yī)院中醫(yī)科，江西南昌 330006；6.河北省復員軍人醫(yī)院護理部，河北邢臺 054000)

隨著人們生活水平提高，糖尿病發(fā)病率逐年升高[1]。血糖測定指血液葡萄糖濃度測定，是醫(yī)院檢驗科常規(guī)實驗室檢查項目，血糖測定不僅在診斷糖尿病和評估藥物治療效果方面，而且在評估糖尿病、肥胖和創(chuàng)傷感染患者胰島素抵抗方面，均具有重要參考價值[2-4]。血糖測定標本質(zhì)量是保證血糖檢測結(jié)果準確性的前提保證，靜脈血標本采集質(zhì)量容易控制，血糖測定準確性高，同一個標本可重復測定，靜脈血標本常用于血糖測定[5]。靜脈血標本血糖測定需要及時檢測[6]，但醫(yī)院內(nèi)患者靜脈采血往往不在檢驗科生化實驗室內(nèi)完成，而是由專業(yè)的抽血護士在檢驗科以外的門診部和體檢中心以及臨床科室完成，這不可避免造成標本不能即刻檢測，到達檢驗科實驗室需要一定的放置時間。據(jù)文獻報道，靜脈血標本在檢測之前，放置時間越長，血糖檢測結(jié)果越低，但詳細機理尚不完全清楚[7-8]。紅細胞是血液中主要有形成分，紅細胞離開人體后，有一定的存活時間，有文獻報道離體紅細胞具有攝取葡萄糖的作用[9-10]，因此，研究不同紅細胞濃度血標本血糖下降程度變化，旨在探討離體血標本內(nèi)葡萄糖下降機理及其與紅細胞濃度的關(guān)系，為制定不同紅細胞濃度靜脈血標本血糖送檢時間，提供實驗室依據(jù)?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇本院體檢中心不同紅細胞濃度人群60例，男48例，女12例，年齡8～70歲，均否認患有糖尿病、白血病、再生障礙性貧血等血液病。根據(jù)紅細胞計數(shù)(RBC)大小，參照RBC正常參考范圍(男性：4.5×1012/L～5.5×1012/L，女性：4.0×1012/L～5.0×1012/L)[11]，將入選人群分為3組：低紅細胞濃度標本組(RBC-L組，n=20)，其中男性RBC小于4.5×1012/L，女性RBC小于4.0×1012/L；正常紅細胞濃度標本組(RBC-N組，n=20)，其中男性和女性RBC均在正常參考范圍內(nèi)；高紅細胞濃度標本組(RBC-H組，n=20)，其中男性RBC大于5.5×1012/L，女性RBC大于5.0×1012/L。男女構(gòu)成比、年齡構(gòu)成比、空腹血糖(GLU0)水平之間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。所有研究對象均知情同意，各組基本情況見表1。

表1 各組研究對象基本情況

1.2儀器與試劑 10 mL肝素鈉抗凝真空采血管由浙江康是醫(yī)療器械有限公司生產(chǎn)，血糖檢測試劑盒和MR2000型全自動生化分析儀由深圳邁瑞生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)，臺式低速離心機由湖南長沙湘儀離心機儀器有限公司生產(chǎn)。

1.3標本處理和檢測方法 真空采血管空腹抽取肝素鈉抗凝全血標本5～6 mL，充分混勻，防止標本出現(xiàn)紅細胞凝集，并準確記錄抽血時間(精確到分鐘)?？鼓獦吮倦x心后析出血漿，即刻放入全自動生化分析儀標本位，通過酶動力法進行血糖測定并記錄為GLU0。全自動生化分析儀吸樣檢測后，取出血標本，小心混合血標本中血漿和紅細胞層，形成全血狀態(tài)，放置室溫(25.0±2.0)℃ 1 h，再離心后，檢測血糖并記錄為GLU1，再次搖勻血標本，混合血漿和紅細胞層呈全血狀態(tài)，繼續(xù)放置1 h，再離心后檢測血糖并記錄為GLU2，同樣操作步驟，依次記錄全血標本即刻及放置1、2、3、4、5、6、7、8、12和24 h后的血糖值為GLU0、GLU1、GLU2、GLU3、GLU4、GLU5、GLU6、GLU7、GLU8以及GLU12和GLU24，計算并比較各組血標本室溫放置平均每小時血糖下降量和血糖下降累積量變化量。放置x小時的平均每小時血糖下降量計算公式為：ΔGLU/h=(GLUx-GLU0)/x；放置x小時血糖下降累積量計算公式為：ΔGLU=GLUx-GLU0。

2 結(jié) 果

2.1不同組血標本不同放置時間血糖檢測結(jié)果變化 3組血液標本隨著放置時間增長，血糖檢測數(shù)值呈下降趨勢；RBC-N組和RBC-H組GLU2檢測數(shù)值均低于GLU0檢測值，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；3組血標本GLU3檢測數(shù)值均低于該組GLU0檢測值，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。RBC-H組血液標本GLU4檢測值低于RBC-N組，RBC-N組GLU4檢測值低于RBC-L組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。見表2。

表2 不同組患者血標本不同放置時間血糖檢測值

注：與本組GLU0比較，*P<0.01；與RBC-N組比較，#P<0.01

2.2不同組血標本不同放置時間平均每小時血糖檢測結(jié)果下降量變化 RBC-L組、RBC-N組和RBC-H組血標本放置4 h后平均每小時血糖檢測值下降量均低于放置2 h內(nèi),差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，血標本平均每小時血糖檢測值下降量均隨放置時間呈下降趨勢，血標本放置時間越長，平均每小時血糖下降量越小。RBC-H組放置不同時間點內(nèi)平均每小時血糖檢測值下降量高于RBC-N組，RBC-N組高于RBC-L組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，同樣放置時間的血標本平均每小時血糖檢測值下降量隨紅細胞濃度升高呈升高趨勢，血標本紅細胞濃度越高，血糖下降量越大。見表3。

2.3不同組血標本不同放置時間血糖檢測值下降累計量變化 RBC-L組、RBC-N組和RBC-H組血標本放置4 h后血糖下降累計量均高于放置2 h(P<0.01)，且血標本血糖下降累計量均隨放置時間呈增多趨勢，血標本放置時間越長，血糖下降累計量越高。RBC-H組放置不同時間點血糖下降累計量高于RBC-N組，RBC-N組高于RBC-L組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，同樣放置時間的血標本血糖下降累計量，隨紅細胞濃度升高呈升高趨勢，血標本紅細胞濃度越高，血糖下降量越大。見表4。

表3 不同組血標本不同放置時間平均每小時血糖

注：與本組2 h內(nèi)數(shù)據(jù)比較，*P<0.01；與同樣放置時間RBC-N組數(shù)據(jù)比較，#P<0.01

表4不同組血標本不同放置時間血糖累計下降量

放置時間RBC-L組(n=20)RBC-N組(n=20)RBC-H組(n=20)2 h0.38±0.050.70±0.040.96±0.074 h0.68±0.04?#1.24±0.08?1.84±0.09?#8 h1.12±0.14?#2.00±0.01?2.96±0.31?#12 h1.44±0.07?#2.64±0.30?3.60±0.54?#24 h2.40±0.18?#3.84±0.22?4.80±0.57?#

注：與本組2 h內(nèi)數(shù)據(jù)比較，*P<0.01；與同樣放置時間RBC-N組數(shù)據(jù)比較，#P<0.01

3 討 論

檢驗科是檢驗患者標本的醫(yī)學實驗室[12]，檢驗結(jié)果質(zhì)量控制包括分析前、分析中和分析后，其中分析前是檢驗結(jié)果質(zhì)量控制的重要環(huán)節(jié)[13]，研究標本離體后標本內(nèi)檢驗指標信息變化，對改善標本分析前質(zhì)量控制具有指導意義。靜脈血標本離開人體后隨著放置時間延長，葡萄糖水平明顯下降[14]。

靜脈血標本離體后標本內(nèi)葡萄糖水平變化和人體內(nèi)血葡萄糖水平變化不同。人體內(nèi)血糖變化取決于體內(nèi)葡萄糖來源和去路的比較[15]，而靜脈血離體后標本內(nèi)的葡萄糖不會再有來源，也不存在人體運動消耗葡萄糖的情況，離體后血標本內(nèi)葡萄糖水平下降與離體后血標本后內(nèi)葡萄糖的去路有關(guān)。血標本內(nèi)沒有體內(nèi)組織細胞，只有血液細胞，血標本離體后葡萄糖去路與血細胞具有攝取葡萄糖能力有關(guān)。

靜脈血葡萄糖測定是測定血漿或血清中的葡萄糖濃度，并不包括血液中紅細胞內(nèi)的葡萄糖濃度。從理論上講，靜脈血標本離體后葡萄糖去路有2種途徑，一是葡萄糖直接被降解，二是葡萄糖進入紅細胞、白細胞等細胞內(nèi)。由于外周血標本紅細胞數(shù)量遠遠大于白細胞數(shù)量，血漿葡萄糖進入紅細胞內(nèi)可能是導致血液標本離體后血糖下降的主要原因。

為了研究離開體內(nèi)的血標本內(nèi)葡萄糖去路及其機理，筆者選擇不同RBC的血糖正常人群作為研究對象，觀察外周血標本離體后不同放置時間血糖下降量與紅細胞濃度的關(guān)系，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，靜脈血標本離體后2 h血糖測定濃度就明顯低于即刻檢測的血糖結(jié)果，并隨標本放置時間延長而呈降低趨勢，降低速度與RBC呈正比，血標本紅細胞濃度越高，血糖降低速度越快，提示高紅細胞濃度人群的外周血標本血糖測定更需要及時送檢，因其血標本血糖濃度下降速度更快。血標本內(nèi)紅細胞數(shù)量多，攝取的葡萄糖量也多，可能是高紅細胞濃度血標本血糖下降速度更快的原因之一。低紅細胞濃度的貧血患者血標本血糖下降速度較慢，可能與標本內(nèi)的紅細胞數(shù)量少，攝取的葡萄糖也相對少有關(guān)。有文獻報道，紅細胞膜上有葡萄糖轉(zhuǎn)運體[16]，離體后抗凝血標本內(nèi)紅細胞可能仍具有攝取和轉(zhuǎn)運葡萄糖的能力。

在醫(yī)院血糖檢測具體實踐中，很難做到靜脈血標本離體后即刻就進行血糖測定。如果能準確記錄靜脈血標本采血時間，研究血標本不同放置時間下降規(guī)律，包括每小時血糖下降量和累積下降量等，對科學糾正標本離體一定時間后的血糖檢測不準確性具有重要意義。筆者研究發(fā)現(xiàn)，離體靜脈血標本血糖下降存在一定的規(guī)律，離體靜脈血標本平均每小時血糖下降量(離體血漿葡萄糖消失的量)不僅與RBC呈正比，而且還與放置時間呈反比，單位時間葡萄糖下降量，隨著離體標本體外放置時間延長，呈下降趨勢，提示離體靜脈血標本內(nèi)的紅細胞攝取紅細胞的能力隨放置時間延長而降低。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，離體靜脈血標本2 h內(nèi)血糖下降量速度最快，正常紅細胞濃度標本離體2 h后，血糖平均每小時下降0.35 mmol/L，離體4 h，平均每小時下降0.31 mmol/L，高紅細胞濃度外周血標本血糖下降速度更快，而低紅細胞濃度的貧血標本血糖下降速度相對慢，提示靜脈離體血標本血糖下降與紅細胞數(shù)量和活性有關(guān)。

結(jié)果還發(fā)現(xiàn)，盡管離體血標本平均每小時血糖下降量隨放置時間呈下降趨勢，但隨著放置時間延長，血糖下降累積量越來越大，尤其RBC-H組血糖累積下降量更明顯，如果患者血糖為低血糖或血糖偏低，靜脈血標本放置24 h，血糖檢測值可能會出現(xiàn)結(jié)果為0的現(xiàn)象，提示對于低血糖患者或血糖在正常參考范圍上限附近的人群，血糖測定標本更應該及時進行檢測，否則血糖檢測結(jié)果可能嚴重影響臨床醫(yī)生對疾病和亞健康程度的準確判斷。離體靜脈血標本血糖下降機理可能還涉及其他因素，紅細胞濃度可能只是其中的一種影響因素。靜脈血標本離體后血糖變化詳細機理，值得進一步研究。