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      血清miR-143、miR-145、AFP和AFP-L3水平對肝硬化失代償期患者的診斷價值

      2019-06-27 05:43:02宋賢超
      中國合理用藥探索 2019年5期
      關(guān)鍵詞:乙肝患者代償乙肝

      宋賢超

      (商丘市第四人民醫(yī)院普外科,河南 商丘 476000)

      乙型肝炎肝硬化失代償期是慢性乙型肝炎、肝纖維化發(fā)展的最終結(jié)局之一[1]。研究顯示,3%的乙型肝炎患者出現(xiàn)失代償期肝硬化,疾病進一步惡化可發(fā)展為原發(fā)性肝癌,5年生存率只有30%左右[2]。所以早診斷早治療,抑制病情進展對于改善肝硬化失代償期患者的預(yù)后質(zhì)量有重要價值。miR-143、miR-145、AFP以及AFP-L3是臨床上常用的肝硬化診斷指標。本研究比較慢性乙肝肝硬化失代償期患者與慢性乙肝患者miR-143、miR-145、AFP、AFP-L3的表達水平,為慢性乙肝肝硬化失代償期患者的臨床診斷提供依據(jù),現(xiàn)報道如下。

      1 資料與方法

      1.1 一般資料

      選取2016年2月—2017年2月我院收治的慢性乙肝肝硬化失代償期患者30例為研究組,選取同期收治的慢性乙肝患者30例為對照組,納入標準:均符合《實用醫(yī)學(xué)》中肝硬化失代償期的診斷標準[3],并根據(jù)臨床表現(xiàn)等確診;HBeAg陽性患者HBV DNA≥105拷貝/mL,HBeAg陰性患者HBV DNA≥104拷貝/mL;所有病例符合Child-Pugh分級B級和C級。排除標準:合并其他惡性腫瘤患者;合并自身免疫系統(tǒng)疾病患者;妊娠或哺乳期患者。兩組一般資料比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。見表1。

      表1 兩組一般資料比較

      1.2 方法

      1.2.1 檢測miR-143、miR-145無菌操作下分別抽取兩組患者靜脈血3 mL,離心處理之后分離血清,應(yīng)用微量離心管儲存,常溫條件下持續(xù)水浴3 min之后,取200 μL,根據(jù)miR RNA試劑盒說明書完成提取。根據(jù)miRNAcDNA第一鏈合成試劑盒(KR211)說明書要求,將提取的總RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA。反轉(zhuǎn)錄體系的配制:解凍2×miRNA RT Reaction Bu ff er并混勻,miRNA RT Enzyme Mix放于冰中備用,在冰上預(yù)冷RNaseFree的反應(yīng)管內(nèi)加入 2×miRNA RT Reaction Bu ff er 10 μL、miRNA RT EnzymeMix 2 μL 至總體積 20 μL(最后加入 miRNA RT Enzyme Mix)。重復(fù)進行3次實驗,反應(yīng)完成之后分析PCR曲線,計算miR-143、miR-145值[4]。

      1.2.2 AFP以及AFP-L3檢測方法AFP-L3檢測應(yīng)用吸附離心管法,其中試劑為熱景生物公司生產(chǎn)。AFP檢測應(yīng)用化學(xué)發(fā)光法,儀器為雅培公司生產(chǎn),試劑為儀器配套試劑盒[5]。

      1.3 觀察指標

      比較兩組miR-143、miR-145、AFP和AFP-L3水平。

      1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

      2 結(jié)果

      2.1 兩組miR-143、miR-145、AFP和AFP-L3水平比較

      研究組miR-143、miR-145、AFP和AFP-L3水平均顯著高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

      表2 兩組miR-143、miR-145、AFP和AFP-L3水平比較

      3 討論

      乙型肝炎肝硬化失代償期的并發(fā)癥比較多,預(yù)后質(zhì)量較差,病死率居高不下,給患者的生命健康以及生活質(zhì)量帶來嚴重不良影響[6]。失代償期的患者長期使用NUC治療能夠有效改善患者的血清學(xué)狀況以及病毒學(xué)狀況,從而避免患者出現(xiàn)失代償期并發(fā)癥例如肝性腦病以及肝細胞癌等。但HBV閉合環(huán)狀DNA(cccDNA)無法得到完全清除,因此乙肝肝硬化失代償期的患者需要長期堅持進行抗病毒治療。在臨床治療的過程當(dāng)中,一方面需要規(guī)范化進行抗病毒治療,另一方面還需要遵循個體化的原則,根據(jù)患者的經(jīng)濟條件、病情狀況、不良反應(yīng)、藥物特點以及治療依從性等,合理選擇治療方案以及治療時機,同時全程對患者的抗病毒治療加強管理,從而獲得最為理想的治療效果。這就需要準確診斷從而為抗病毒治療提供指導(dǎo)。

      微小RNA(miRNA)是一種單鏈RNA,長約為20個左右核糖核苷酸。少數(shù)miRNA同腫瘤疾病的出現(xiàn)存在密不可分的聯(lián)系。傳統(tǒng)上研究人員分析惡性腫瘤組織內(nèi)部miRNA的時候,需要使用病理組織切片,隨著技術(shù)的進步,研究人員發(fā)現(xiàn)血清中也存在miRNA,且腫瘤血清當(dāng)中miRNA含量同健康人群存在明顯差異,可作為特異性腫瘤標記物[7]。也有研究人員認為miR-143、miR-145表達在慢性乙肝患者當(dāng)中明顯下調(diào),同時在乙肝肝硬化標本當(dāng)中明顯上調(diào)[8]。本研究結(jié)果顯示,肝硬化失代償期患者的miR-143、miR-145水平均顯著高于慢性乙肝患者(P<0.05),說明miR-143、miR-145水平同患者病情存在顯著相關(guān)性,這是因為乙肝肝硬化失代償期患者肝細胞HBV存在持續(xù)復(fù)制傾向,同時肝臟結(jié)構(gòu)中腫瘤細胞數(shù)量明顯增多,導(dǎo)致miR-143、miR-145水平上升[9-10]。

      甲胎蛋白(AFP)是臨床上常用的一種血清學(xué)標志物,研究人員普遍認為血清AFP水平同肝臟疾病存在著密不可分的聯(lián)系,正常肝組織當(dāng)中的肝細胞AFP水平比較低甚至完全檢測不出,但是在肝硬化患者組織以及肝炎患者組織當(dāng)中,AFP含量水平上升異常明顯,同時在肝癌組織當(dāng)中上升的幅度最高。但AFP在早期肝硬化失代償期患者診斷中靈敏度較低,只有50%左右的患者呈現(xiàn)AFP陽性。通常情況下,AFP作為肝硬化失代償期患者早期診斷的血清學(xué)標志之一,敏感度為40%左右,特異度為80%左右[11],所以單純借助于AFP用來監(jiān)測預(yù)警肝硬化失代償期存在著一定程度的限制。上世紀七十年代,研究人員借助于凝膠電泳分離得到AFP異質(zhì)體,后續(xù)研究發(fā)現(xiàn)AFP-L3超過10%同肝硬化失代償期患者存在顯著相關(guān)性,可作為早期診斷的重要標志物,因此AFP-L3檢測對于肝硬化失代償期患者的早期診斷有重要的價值。本研究結(jié)果顯示,研究組AFP和AFP-L3水平均顯著高于對照組(P<0.05)。說明慢性乙肝肝硬化失代償期患者的AFP、AFP-L3水平高于慢性乙肝患者,可作為檢測疾病進展的標志物。

      綜上所述,肝硬化失代償期患者的血清miR-143、miR-145、AFP和AFP-L3水平顯著上升,積極采取治療措施,有利于改善患者預(yù)后質(zhì)量。

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