鉤狀石斛莖、葉低極性成分ＧＣ－ＭＳ對比分析

楊丹 莫緒 蔣南洋 程忠泉

基金項目：廣西自然科學基金項目（2017GXNSFBA198033）;廣西高校中青年教師基礎(chǔ)能力提升項目（2018KY0918）。

作者簡介：楊丹（1984-），女，漢族，博士，副教授，研究方向為天然藥物化學成分、活性研究。E-mail：yangdan8412@163.com

通信作者：程忠泉（1976-），男，漢族，博士，教授，研究方向為天然藥物化學成分、活性及應用研究。E-mail：751968889@qq.com

【摘 要】 對比分析鉤狀石斛莖、葉低極性成分，分別經(jīng)溶劑提取鉤狀石斛莖、葉，低極性溶劑萃取后進行GC-MS分析，以面積歸一化法計算各組分含量。鉤狀石斛莖、葉分別鑒定了34、46個化合物的，其含量分別占總檢出峰的98.73%、89.14%。結(jié)果表明，鉤狀石斛莖、葉中低極性部分有較大比例的相同成分，對充分利用該植物資源提供理論依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】 鉤狀石斛;葉、莖;低極性成分;GC-MS

【中圖分類號】R284.2 【文獻標志碼】 A【文章編號】1007-8517（2019）7-0027-04

Abstract：For comparative analysis of low polar compounds from leaf and stem of Dendrobium aduncum，? the leaf and stem of D. aduncum was extracted with solvent， which were isolated and identified by GC-MS method. The relative contents of the chemical constituents from leaf and stem were determined by area normalization method. 34， 46 compounds were detected and identified from leaf and stem which accounted for 98.73 %， 89.14 % of total low polarity chemical constituents， respectively. D. aduncum has further research value based on the GC-MS analysis.

Keywords： Dendrobium aduncum; Stem and Leaf; Low-polarity Components; GC-MS

石斛屬（Dendrobium）植物具有抗腫瘤、抗衰老、增強人體免疫力和擴張血管等作用，含有生物堿、菲類、聯(lián)芐類、倍半萜類、香豆素、多糖、甾體及揮發(fā)油等多種成分[1-3]。鉤狀石斛（Dendrobium aduncum）分布于廣西、湖南、廣東、海南、貴州、云南等地，生于海拔 700～1 000m山地林樹干上，具有滋陰、清熱、益胃、生津等功效，主治口干煩渴、熱病傷津、食欲不振、病后虛熱等[4]，含羥基反式肉桂酸三十烷基酯、aduncin、dengibsinin、dengibsin、4-羥基-3-甲氧基苯甲酸等化合物[5]。為進一步研究鉤狀石斛化學成分，筆者對采于廣西百色的該植物莖、葉的低極性成分進行了氣質(zhì)聯(lián)用對比分析?，F(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料 鉤狀石斛于2016年9月采自廣西百色，經(jīng)黃圣卓博土鑒定為蘭科石斛屬植物鉤狀石斛（Dendrobium aduncum Lindl）。植物樣本存放于桂林師范高等?？茖W?；瘜W與藥學系博士科研室。18kg新鮮樣品經(jīng)自然晾干，分離莖（2.5kg）、葉（1.5kg）后，粉碎留樣。

1.2 方法

1.2.1 色譜條件 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（安捷倫7890 A-5975 C），毛細管柱HP-5MS （30 m × 0.32mm × 0.25μm），進樣口250℃，不分流進樣。離子源：230℃，升溫程序：50℃保持2min;15S℃/min升至140℃，保持4min;15℃/min升至300℃，保持18min。質(zhì)譜條件：EI源，電離電壓70 eV，離子源溫度200℃，掃描范圍20 ～ 500amu，質(zhì)譜庫NIST27和NIST147。

1.2.2 樣品前處理方法 取鉤狀石斛莖（葉）粉碎后樣品各100g，95 %乙醇提取3h，提取液濃縮回收溶劑，浸膏懸浮于水，乙醚萃取兩次，每次30mL，乙醚層用無水碳酸鈉干燥，濃縮得浸膏用1mL正己烷溶解，溶液經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾作為樣品供試液。

1.2.3 樣品定性、定量分析方法 對得到的總離子流圖中各峰進行質(zhì)譜掃描，得到相應各峰質(zhì)譜圖，與Nist 27、Nist 147數(shù)據(jù)庫標準物質(zhì)質(zhì)譜圖進行對比分析，確認鉤狀石斛莖、葉各低極性成分，用峰面積歸一化法計算出各組分相對百分含量。

2 結(jié)果與討論

鉤狀石斛莖中低極性成分GC-MS分析，檢出的各成分與Nist 27、Nist 147數(shù)據(jù)庫標準物質(zhì)質(zhì)譜圖進行對比分析，鑒定了34個化合物，總含量占總檢出峰的98.73 %（總離子流圖如圖1所示，化學成分見表1）。其中飽和脂肪烴6種，含量總計9.86 %，含量較多的有十八烷（3.21 %）、二十烷（2.44 %）;羧酸及脂18種，含量總計75.81 %，含量較多的有十五烷酸（6.95 %）、棕櫚酸（21.3 %）、棕櫚酸乙酯（6.91 %）、（Z，Z）-亞油酸（7.63 %）、2-十八碳二烯酸乙酯（6.74 %）、棕櫚酸-2-羥基-1-（羥甲基）乙酯（4.36 %）;另外含芳香烴類（4.74 %）、甾醇類（6.26 %）。

鉤狀石斛葉中低極性成分鑒定46個化合物，總含量占總檢出峰的89.14 %（總離子流圖如圖2所示，化學成分見表1），已鑒定的成分中，烷烴及其酸酯類18種，含量共計（36.67 %），含量較多的有棕櫚酸（13.22 %）、棕櫚酸甲酯（3.41 %）、硬脂酸（4.2 %）;芳香烴類共計7種，含量總計16.98 %，含量較多的是二叔丁基對甲酚（7.52 %）;甾醇類4種（6.93 %）。

3 小結(jié)

通過對鉤狀石斛莖、葉中低極性成分的GC-MS對比分析，發(fā)現(xiàn)鉤狀石斛莖、葉中有15種相同的成分，分別為2-己酮、十六烷、十七烷、肉豆蔻酸甲酯、肉豆蔻酸、十八烷、2-甲氧基-4-乙烯基苯酚、十五烷酸、棕櫚酸、棕櫚酸乙酯、十七酸、葉綠醇、二十烷、豆甾醇、γ-谷甾醇。15種相同成分分別占莖、葉總檢出峰數(shù)的44.12%、27.78%，相對百分含量分別占莖、葉的58.33 %、33.51 %。

石斛屬植物是著名常用中藥，國內(nèi)外進行了大量的研究與開發(fā)，市場需要量也越來越大，導致石斛屬植物野生資源日漸枯竭，如鐵皮石斛等名貴品種已成為日益稀少的瀕危植物。通過對鉤狀石斛莖、葉中低極性部分GC-MS對比分析，以期提高整株植物的藥用價值和經(jīng)濟效益，對充分利用石斛屬植物資源提供理論依據(jù)。

參考文獻

[1]鄧銀華， 徐康平， 譚桂山.石斛屬植物化學成分與藥理活性研究進展[J].中藥材， 2002， 25（9）：677-680.

[2]張光濃， 畢志明， 王崢濤， 等.石斛屬植物化學成分研究進展[J].中草藥， 2003， 34（6）：5-8.

[3]邵曰鳳， 胡粉青， 鄒澄.石斛屬植物化學成分和藥理活性研究現(xiàn)狀[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā)， 2012， 24： 152-157.

[4]羅玉婷， 藍玉甜， 黃嵐， 等.鉤狀石斛組織培養(yǎng)技術(shù)研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學， 2014， 42（21）： 6931-6933.

[5]畢志明， 麥建峰， 朱琳， 等.鉤狀石斛化學成分的研究[J].中國藥學雜志， 2006 ， 41（21）：1618-1620.

（收稿日期：2019-01-17 編輯：陶希睿）