DC-CIK細(xì)胞過繼免疫治療聯(lián)合XELOX方案化療對(duì)進(jìn)展期結(jié)直腸癌患者的療效分析

王村，溫珍平，梁俊青

內(nèi)蒙古自治區(qū)腫瘤醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，呼和浩特 010000

結(jié)直腸癌（colorectal cancer，CRC）為臨床較為常見的疾病，多數(shù)患者在確診時(shí)已處于進(jìn)展期，失去手術(shù)機(jī)會(huì)，因此合理的內(nèi)科治療十分重要。化療為CRC患者的主要內(nèi)科療法，可降低患者腫瘤負(fù)荷，臨床有效率約為50%，但化療在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí)也會(huì)對(duì)正常細(xì)胞造成損傷，患者的不良反應(yīng)較大[1-2]。伴隨分子生物學(xué)的不斷發(fā)展，細(xì)胞過繼免疫治療有不良反應(yīng)小、適應(yīng)證廣等優(yōu)點(diǎn)，得到了人們的重視。細(xì)胞過繼免疫治療是將異體或者自體免疫效應(yīng)細(xì)胞通過體外活化擴(kuò)增后輸注給患者，殺傷機(jī)體內(nèi)腫瘤細(xì)胞。當(dāng)前臨床在腫瘤治療中普遍應(yīng)用的細(xì)胞過繼免疫治療方法為聯(lián)合殺瘤功能強(qiáng)大的細(xì)胞因子誘導(dǎo)殺傷細(xì)胞（cytokine-induced killer cell，CIK）和抗原呈遞作用最強(qiáng)的樹突狀細(xì)胞（dendritic cell，DC）[3-4]。因此，本研究通過分析DC-CIK細(xì)胞過繼免疫治療聯(lián)合XELOX化療對(duì)進(jìn)展期CRC患者的療效，為臨床治療提供一些參考，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

選取2015年6月至2017年6月在內(nèi)蒙古自治區(qū)腫瘤醫(yī)院接受治療的進(jìn)展期CRC患者104例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)病理檢查確診為進(jìn)展期CRC（Ⅲ期、Ⅳ期）；②至少進(jìn)行2個(gè)周期治療；③腎、心及肝等臟器功能正常；④體力狀況（performance status，PS）評(píng)分為1～2分。排除標(biāo)準(zhǔn)：①處于哺乳期或妊娠期者；②合并腎、心及肝等原發(fā)性疾病；③有免疫抑制劑、激素藥物服用史；④合并其他腫瘤或者免疫相關(guān)性疾病者；⑤合并肺炎或者全身感染者。按隨機(jī)數(shù)字表法將104例進(jìn)展期CRC患者分為兩組，觀察組（52例）行DC-CIK聯(lián)合化療，對(duì)照組（52例）行化療，兩組患者基線特征比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）（表1），具有可比性。本研究經(jīng)內(nèi)蒙古自治區(qū)腫瘤醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者及家屬均知情并簽署同意書。

表1 兩組患者的基線特征分布

1.2 治療方法

對(duì)照組患者采用奧沙利鉑+卡培他濱（XELOX）方案化療：奧沙利鉑130 mg/m2，d 1；卡培他濱1250 mg/m2，d 1～12，21天為1個(gè)周期，共治療6個(gè)周期。觀察組患者在化療前收集50 ml外周血，分離單核細(xì)胞，在實(shí)驗(yàn)室對(duì)DC-CIK細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，患者采血后第3天開始化療，化療方案與對(duì)照組一致。細(xì)胞培養(yǎng)周期為15天，上清液中檢測無真菌、細(xì)菌生長且免疫功能檢測細(xì)胞培養(yǎng)物合格后，采用無菌生理鹽水洗滌細(xì)胞，將細(xì)胞溶于100 ml含2%白蛋白的無菌生理鹽水內(nèi)，分兩次給患者輸注，1次/月。

1.3 觀察指標(biāo)及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

依據(jù)實(shí)體瘤療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)（response evaluation criteria in solid tumors，RECIST）[5]評(píng)價(jià)患者近期療效，病灶全部消失并保持4周為完全緩解（CR），病灶最長徑之和減少30%以上并保持4周為部分緩解（PR），病灶最長徑之和增大20%以上并保持4周為疾病進(jìn)展（PD），介于PR和PD之間為疾病穩(wěn)定（SD），緩解率（response rate，RR）=（CR+PR）例數(shù)/總例數(shù)×100%，疾病控制率（disease control rate，DCR）=（CR+PR+SD）例數(shù)/總例數(shù)×100%。檢測患者治療前后血清糖類抗原242（carbohydrate antigen 242，CA242）、糖類抗原19-9（carbohydrate antigen 19-9，CA19-9）及癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）水平。流式細(xì)胞儀檢測患者治療前后T淋巴細(xì)胞亞群[自然殺傷性T（natural killer T，NKT）細(xì)胞、自然殺傷（natural killer，NK）細(xì)胞、CD4+、CD3+、CD8+]和白細(xì)胞介素-6（interleukin-6，IL-6）、白細(xì)胞介素-2（interleukin-2，IL-2）、干擾素-γ（interferon-γ，IFN-γ）、腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）水平。觀察記錄患者不良反應(yīng)發(fā)生情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以例數(shù)及率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 近期療效的比較

觀察組患者的RR為61.54%（32/52），DCR為75.00（39/52），分別高于對(duì)照組的40.38%（21/52）和55.77%（29/52），差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=4.656、4.248，P＜0.05）。（表2）

表2 兩組患者的近期療效 [n（%）]*

2.2 治療前后血清腫瘤標(biāo)志物水平的比較

治療后兩組患者血清CEA水平均較治療前降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。治療前后兩組患者CA242、CA19-9、CEA水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。（表3）

2.3 治療前后 T淋巴細(xì)胞亞群水平的比較

治療前，兩組患者CD4+、CD3+、CD8+、NK及NKT水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；治療后，觀察組患者血清CD4+、CD3+、CD8+及NKT水平均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。（表4）

注：*與同組治療前比較，P＜0.05

表4 治療前后兩組患者 T淋巴細(xì)胞亞群水平的比較

2.4 治療前后血清細(xì)胞因子水平的比較

治療前，兩組患者血清 IL-6、IL-2、IFN-γ及TNF-α水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；治療后，觀察組患者血清IL-2、IFN-γ及TNF-α水平均明顯高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。（表5）

表5 治療前后兩組患者血清細(xì)胞因子水平的比較

2.5 不良反應(yīng)發(fā)生情況的比較

觀察組有3例患者發(fā)生輕、中度發(fā)熱，體溫為37.6～38.5℃，及時(shí)對(duì)癥處理后緩解。兩組患者均未出現(xiàn)神經(jīng)毒性、胃腸道反應(yīng)及骨髓抑制等不良反應(yīng)。

3 討論

進(jìn)展期CRC患者的主要治療方法為化療，使用細(xì)胞毒藥物聯(lián)合的化療方案，中位生存時(shí)間只有10個(gè)月左右[6-7]。DC-CIK細(xì)胞過繼免疫治療是通過CIK與DC結(jié)合對(duì)惡性腫瘤進(jìn)行治療，體內(nèi)CIK群主要效應(yīng)細(xì)胞為CD56+和CD3+[8]。DC-CIK不但可以激發(fā)、加強(qiáng)患者機(jī)體內(nèi)特異性腫瘤免疫應(yīng)答，將體內(nèi)殘留病灶清除，還可以在機(jī)體內(nèi)引起免疫記憶，使抗腫瘤效應(yīng)持續(xù)時(shí)間更長，為一種有效、特異且全新的治療方式[9-10]。本研究結(jié)果顯示，觀察組患者RR為61.54%，DCR為75.00%，對(duì)照組患者RR為40.38%，DCR為55.77%，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），說明DCCIK聯(lián)合XELOX化療方案可提升對(duì)進(jìn)展期CRC患者的化療有效率。相關(guān)研究顯示，CRC患者體內(nèi)腫瘤標(biāo)志物特別是CEA能夠作為療效預(yù)測和監(jiān)測病情的指標(biāo)，在診斷及評(píng)估CRC患者療效中聯(lián)合檢測腫瘤標(biāo)志物要比任何單一檢測指標(biāo)價(jià)值更高[11-12]。本研究結(jié)果顯示，治療后兩組患者血清CEA水平均較治療前降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），但組間比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。細(xì)胞免疫在抗腫瘤免疫治療中起著重要作用，細(xì)胞因子和T淋巴細(xì)胞亞群水平可以較好地反映患者機(jī)體內(nèi)細(xì)胞免疫狀況。T淋巴細(xì)胞亞群包含CD8+和CD4+兩類T細(xì)胞，其中均存在免疫抑制性細(xì)胞與抗腫瘤免疫細(xì)胞，Th2、Th1及Th0為CD4+所分泌的3種不同細(xì)胞因子，Th0細(xì)胞為未成熟的前體細(xì)胞，成熟后可分化為Th2和Th1細(xì)胞，Th2分泌的細(xì)胞因子包含IL-6、IL-4等，Th1分泌的細(xì)胞因子包含TNF-α、IL-2及IFN-γ等。健康人機(jī)體內(nèi)Th1/Th2維持動(dòng)態(tài)平衡，但CRC患者機(jī)體內(nèi)由于免疫功能被抑制，Th1/Th2比值會(huì)失去平衡，Th1轉(zhuǎn)變?yōu)門h2，抑制負(fù)性免疫調(diào)節(jié)，不利于自身免疫細(xì)胞清除腫瘤細(xì)胞[13-16]。本研究結(jié)果顯示，治療后，觀察組患者血清CD4+、CD3+、CD8+、NKT、IL-2、IFN-γ及TNF-α水平均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），說明化療在殺滅患者體內(nèi)腫瘤細(xì)胞的同時(shí)對(duì)抗腫瘤免疫效應(yīng)細(xì)胞和細(xì)胞因子也有影響，減輕化療造成的免疫抑制，調(diào)整機(jī)體抗腫瘤免疫。綜上所述，CRC患者行DC-CIK細(xì)胞過繼免疫治療聯(lián)合XELOX化療可改善機(jī)體免疫功能，減輕單純化療所造成的免疫抑制，為安全有效的療法。