農(nóng)業(yè)投入品中隱性成分篩查方法及應(yīng)用

汪志威，周思齊,，李非里，吳聲敢，楊桂玲，齊沛沛，王祥云，狄珊珊，徐浩，王新全*

(1.浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究所 農(nóng)業(yè)農(nóng)村部農(nóng)藥殘留檢測(cè)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 浙江省農(nóng)藥殘留檢測(cè)與控制研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，浙江 杭州 310021； 2.浙江工業(yè)大學(xué) 環(huán)境學(xué)院，浙江 杭州 310021)

農(nóng)業(yè)投入品中非法添加農(nóng)藥隱性成分，不僅嚴(yán)重?cái)_亂農(nóng)藥行業(yè)正常秩序，而且極易引發(fā)食品安全問(wèn)題。對(duì)這類“假農(nóng)藥”，種植戶和地方監(jiān)管部門缺乏甄別方法，一旦被使用易引起重大食品安全風(fēng)險(xiǎn)；因此，此類“假農(nóng)藥”問(wèn)題在近年來(lái)受到廣泛的關(guān)注[1-2]。

農(nóng)藥隱性成分的添加目標(biāo)是“藥效好、見效快”，歷年案例報(bào)告顯示隱性添加成分以殺蟲劑居多，主要包括添加高毒禁限用農(nóng)藥、擬除蟲菊酯類農(nóng)藥，非法添加未過(guò)專利保護(hù)期的農(nóng)藥，以及生物農(nóng)藥添加化學(xué)農(nóng)藥等形式。違法者通過(guò)助劑復(fù)配、農(nóng)資贈(zèng)品等方式添加農(nóng)藥隱性成分，方式隱蔽，增加了監(jiān)管難度。同時(shí)，由于農(nóng)藥種類繁多，而隱性添加成分目標(biāo)難以確定，這也大大增加了篩查難度。

喬成奎等[3]利用液相色譜串聯(lián)三重四級(jí)桿質(zhì)譜(LC-MS/MS)建立了農(nóng)藥產(chǎn)品中30種高風(fēng)險(xiǎn)隱性成分的篩查方法；李俊等[4]利用氣相色譜串聯(lián)三重四級(jí)桿質(zhì)譜(GC-MS/MS)建立測(cè)定農(nóng)藥中32種隱性添加成分的分析方法。上述方法的優(yōu)勢(shì)在于靈敏度高、快速，但只能針對(duì)特定種類的隱性添加成分進(jìn)行檢測(cè)，難以“一網(wǎng)打盡”。陸劍飛[5]提出了基于氣相色譜篩選—?dú)庀嗷蛞合嗌V驗(yàn)證—質(zhì)譜確證進(jìn)行農(nóng)藥隱性成分篩查的技術(shù)路線，并提供了鑒定方法及案例，方法系統(tǒng)性高、漏檢率低，但對(duì)檢測(cè)人員的技術(shù)要求較高，且篩查周期較長(zhǎng)。目前，農(nóng)藥隱性成分雖然受關(guān)注度很高，但其檢測(cè)方法的改進(jìn)報(bào)道卻極少。

本研究擬建立基于GC-MS/MS和LC-MS/MS的農(nóng)業(yè)投入品中農(nóng)藥隱性添加成分篩查方法體系。該方法篩查目標(biāo)范圍廣、速度快，可有效滿足農(nóng)藥隱性成分的篩查要求?，F(xiàn)總結(jié)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

用于篩查的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品分別購(gòu)自農(nóng)業(yè)農(nóng)村部環(huán)境質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心(天津)、上海安譜公司和德國(guó)Dr. Ehrenstorfer GmbH公司，丙酮和乙腈試劑購(gòu)自Honeywell公司。

用于篩查隱性成分的農(nóng)業(yè)投入品來(lái)自“一品一策”等風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估調(diào)研的浙江省內(nèi)農(nóng)資店和生產(chǎn)基地。

1.2 前處理方法

調(diào)研獲得農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中使用的殺蟲劑、殺菌劑，以及具有植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑功能的農(nóng)業(yè)投入品。對(duì)包裝袋正反面進(jìn)行拍照，做好產(chǎn)品信息記錄。記錄完畢后，振蕩混勻樣品，準(zhǔn)確稱取0.1 g樣品，用10 mL乙腈溶解于15 mL玻璃刻度管中(乙腈無(wú)法溶解樣品時(shí)，用5 mL乙腈溶液超聲5 min，重復(fù)2次，合并上清液)，混勻提取液作為母液(10 g·L-1)備用。

1.2.1 目標(biāo)物篩查

GC-MS/MS分析。將母液用丙酮試劑稀釋至0.1 g·L-1，混勻，過(guò)0.22 μm有機(jī)膜后用GC-MS/MS的MRM(多反應(yīng)監(jiān)測(cè))模式對(duì)農(nóng)藥隱性成分進(jìn)行篩查，篩查參數(shù)見表1～2。

表1 敵敵畏等GC-MS/MS篩查參數(shù)及單離子檢測(cè)掃描(SIM)和多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)方法

LC-MS/MS分析。將母液用乙腈和水混合溶液(體積比1∶1)稀釋至0.01 g·L-1，混勻，過(guò)0.22 μm有機(jī)膜后用LC-MS/MS的MRM模式對(duì)農(nóng)藥隱性成分進(jìn)行篩查，篩查參數(shù)見表3。

表2 苯硫威等GC-MS/MS篩查參數(shù)及單離子檢測(cè)掃描(SIM)和多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)方法

上機(jī)溶液進(jìn)樣前如顏色仍特別深，為保護(hù)質(zhì)譜儀器，可取1.5 mL上機(jī)液于QuEChERs 2 mL凈化小粉管中[內(nèi)含50 mg C18，50 mg PSA(N-丙基乙二胺)和150 mg硫酸鎂]，在離心力為4 766g的條件下離心3 min，取上清液過(guò)0.22 μm有機(jī)膜后上機(jī)。

1.2.2 無(wú)目標(biāo)篩查

取0.5 mL母液，加入0.5 mL丙酮混勻，通過(guò)氣相色譜-質(zhì)譜在全掃描模式下篩查，掃描質(zhì)量數(shù)(m/z)為45～500。在無(wú)目標(biāo)篩查時(shí)，將未加農(nóng)業(yè)投入品的乙腈稀釋液作為空白對(duì)照，用于扣除本底。

1.3 儀器條件

GC-MS/MS：TSQ quantum氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(Thermo，USA)，色譜柱為安捷倫DB-5 ms(30 m×0.25 mm×0.25 μm)。程序升溫條件：初溫50 ℃，以30 ℃·min-1升溫至140 ℃，再以10 ℃·min-1升溫至300 ℃，保留5 min。前進(jìn)樣口溫度為230 ℃，不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣體積1 μL。

LC-MS/MS：島津超高效液相色譜儀LC-30A與三重四極桿質(zhì)譜儀AB ScieX Triple Quad 4500，色譜柱為Waters BEH C18(2.1 mm×100 mm，1.7 μm)。流動(dòng)相為甲醇和水，其中，甲醇和水中均含有5 mmol·L-1甲酸銨的甲醇/水混合溶液(甲醇與水的體積比為9∶1)，流速0.25 mL·min-1，柱溫為40 ℃，進(jìn)樣體積為2 μL，等度洗脫。

1.4 計(jì)算方法

Y=100CtfV÷m。

(1)

式(1)中，Y代表農(nóng)業(yè)投入品中隱性成分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)(%)，Ct是進(jìn)樣瓶中農(nóng)藥隱性成分的濃度(mg·L-1)，f是母液到進(jìn)樣溶液的稀釋倍數(shù)，V是農(nóng)業(yè)投入品母液定容體積(10 mL)，m是農(nóng)業(yè)投入品稱量質(zhì)量(0.1 g)。

表3 LC-MS/MS篩查參數(shù)及方法

2 結(jié)果與分析

2.1 國(guó)家禁限用農(nóng)藥參數(shù)匯總

近年來(lái)，我國(guó)多部委陸續(xù)頒布了蔬菜、果樹、茶葉、中草藥材等范圍的高毒高殘留農(nóng)藥的禁限用公告。這些農(nóng)藥中可以通過(guò)三重四級(jí)桿串聯(lián)質(zhì)譜進(jìn)行分析已經(jīng)或即將禁限用農(nóng)藥清單(統(tǒng)計(jì)信息截至2018年12月12日)如下：六六六、滴滴涕、除草醚、艾氏劑、狄氏劑、內(nèi)吸磷、硫環(huán)磷、氯唑磷、氰戊菊酯、丁酰肼(比久)、甲胺磷、對(duì)硫磷、甲基對(duì)硫磷、久效磷、磷胺、氟蟲腈、苯線磷、地蟲硫磷、甲基硫環(huán)磷、硫線磷、蠅毒磷、治螟磷、特丁硫磷、滅多威、滅線磷、涕滅威、氧樂(lè)果、水胺硫磷、三唑磷、毒死蜱、殺撲磷、氟苯蟲酰胺、克百威、甲基異柳磷、甲拌磷、三氯殺螨醇、乙酰甲胺磷、樂(lè)果、丁硫克百威、硫丹。一旦添加這些農(nóng)藥隱性成分，極易導(dǎo)致農(nóng)藥殘留超標(biāo)。

2.2 農(nóng)藥隱性成分篩查參數(shù)的確定

篩查參數(shù)的確定對(duì)于有效篩查農(nóng)業(yè)投入品中的農(nóng)藥隱性成分至關(guān)重要。禁限用農(nóng)藥在農(nóng)產(chǎn)品中的限量值通常極低，一旦使用極易引起農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留超標(biāo)，因此在隱性成分篩查時(shí)禁限用農(nóng)藥一直是重點(diǎn)關(guān)注目標(biāo)。另外，對(duì)于某些綠色食品生產(chǎn)企業(yè)，一旦使用含有化學(xué)農(nóng)藥成分的生物農(nóng)藥，也將給農(nóng)戶帶來(lái)重大經(jīng)濟(jì)損失，因而高效化學(xué)農(nóng)藥也是隱性成分篩查的重點(diǎn)目標(biāo)。本篩查方法參數(shù)的確定綜合了禁限用農(nóng)藥清單、農(nóng)業(yè)農(nóng)村部農(nóng)藥殘留例行檢測(cè)參數(shù)，以及歷年篩查案例，確定隱性成分篩查農(nóng)藥參數(shù)共215個(gè)(部分代謝產(chǎn)物以農(nóng)藥母體計(jì))，詳細(xì)參數(shù)如下：敵敵畏、茚蟲威、速滅磷、氟鈴脲、甲硫威、克百威(含三羥基克百威)、氟樂(lè)靈、氯苯胺靈、百治磷、惡蟲威、異口惡草松、治螟磷、蔬果磷、戊菌隆、甲拌磷、六六六、內(nèi)吸磷、西瑪津、五氯硝基苯、特丁硫磷、二嗪磷、地蟲硫磷、磷胺、乙烯菌核利、嘧霉胺、七氟菊酯、敵惡磷、乙拌磷、百菌清、皮蠅磷、異稻瘟凈、乙硫苯威、除線磷、馬拉氧磷、甲基毒死蜱、四氟苯菊酯、甲基對(duì)硫磷、甲草胺、莠滅凈、撲草凈、甲萘威、對(duì)氧磷、噻唑膦、甲基嘧啶磷、特丁凈、噻蟲嗪、殺螟硫磷、二甲戊靈、馬拉硫磷、苯氟磺胺、異丙甲草胺、毒死蜱、甲基毒蟲畏、對(duì)硫磷、三唑酮、水胺硫磷、酞菌酯、嘧啶磷、三氯殺螨醇、多效唑、甲基異柳磷、氟啶脲、嘧菌環(huán)胺、氟蟲腈(含氟蟲腈硫醚、氟甲腈、氟蟲腈砜)、異柳磷、毒蟲畏、甲苯氟磺胺、滅蚜磷、烯丙菊酯、硫環(huán)磷、稻豐散、呋霜靈、喹硫磷、腐霉利、乙基溴硫磷、殺撲磷、殺蟲畏、丁草胺、苯硫威、甲醚菊酯、苯線磷、硫丹、硫丹硫酸鹽、敵草胺、殺螨酯、丙硫磷、丙溴磷、腈菌唑、滴滴涕、氟硅唑、氯唑磷、噻嗪酮、纈霉威、溴蟲腈、除草醚、烯唑醇、蟲螨磷、炔螨特、三唑磷、肟菌酯、惡霜靈、苯霜靈、三硫磷、苯腈磷、啶蟲脒、增效醚、芐呋菊酯、苯線磷亞砜、苯線磷砜、噠嗪硫磷、聯(lián)苯菊酯、胺菌酯、亞胺硫磷、苯氧威、溴螨酯、聯(lián)苯肼酯、甲氰菊酯、吡螨胺、苯醚菊酯、三氯殺螨砜、伏殺硫磷、溴苯磷、蚊蠅磷、氯氟氰菊酯、咪鮮胺、滅蟻靈、益棉磷、氯菊酯、蠅毒磷、噠螨靈、氯亞胺硫磷、乙氧苯甲胺、氟氯氰菊酯、氯氰菊酯、啶酰菌胺、氟氰戊菊酯、醚菊酯、氟硅菊酯、氟胺氰菊酯、氰戊菊酯、嘧菌酯、苯醚甲環(huán)唑、溴氰菊酯、唑蟲酰胺、烯酰嗎啉、滅蠅胺、烯啶蟲胺、涕滅威(含涕滅威砜、涕滅威亞砜)、甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧樂(lè)果、樂(lè)果、吡蚜酮、噻螨酮、噻蟲胺、吡蟲啉、蟲酰肼、除蟲脲、辛硫磷、唑螨酯、螺螨酯、氟蟲雙酰胺、氯蟲苯甲酰胺、氟苯蟲酰胺、阿維菌素、甲維鹽、氟啶蟲酰胺、戊菌唑、甲基硫菌靈、呋蟲胺、乙基多殺菌素、溴氰蟲酰胺、乙螨唑、硫雙威、多殺菌素、魚藤酮、除蟲菊素、苦參堿、氟蟲脲、稻瘟靈、多菌靈、滅多威、異丙威、敵百蟲、莠去津、羥基莠去津、脫乙基莠去津、脫異丙基莠去津、丙環(huán)唑、吡嘧磺隆、芐嘧磺隆、苯磺隆、乙草胺、己唑醇、三環(huán)唑、氟環(huán)唑、羥基百菌清、滅幼脲、霜霉威、氯吡脲、抗倒酯、6-芐基腺嘌呤、噻苯隆、矮壯素、烯效唑、甲哌啶、2,3,5-三碘苯甲酸、2,4-滴、對(duì)氯苯氧乙酸、赤霉素、二氯吡啶酸、吲哚乙酸、萘乙酸、脫落酸、丁酰肼。

2.3 前處理方法優(yōu)化

通過(guò)對(duì)生產(chǎn)基地和農(nóng)資店的調(diào)研發(fā)現(xiàn)，常見農(nóng)業(yè)投入品包括農(nóng)藥制劑和葉面肥等，制劑的常見類型有乳油(EC)、水分散粒劑(WG)、可濕性粉劑(WP)、水懸浮劑(SC)、水乳劑(EW)、水劑(AS)、微乳劑(ME)、種衣劑(FS)和熏蒸劑(VP)等。基于GC-MS/MS和LC-MS/MS篩查農(nóng)藥隱性成分的方法類似于農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留檢測(cè)[6-13]，不同的是農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留篩查通常在痕量級(jí)別(<0.01%)，而農(nóng)業(yè)投入品中檢測(cè)通常在常量級(jí)別(>1%)，因而稀釋進(jìn)樣是必要步驟。

稀釋濃度的確定。農(nóng)藥制劑在使用時(shí)，通常需要先用水稀釋500～4 000倍，如果其中隱性成分的添加濃度太低，則制劑無(wú)法發(fā)揮增強(qiáng)藥效的作用，篩查添加的質(zhì)量分?jǐn)?shù)大于0.1%。結(jié)合農(nóng)藥制劑登記有效成分含量通常在1%～90%的特點(diǎn)，以及歷年案例中添加的農(nóng)藥隱性成分含量普遍在1%～10%的情況，本方法對(duì)隱性成分的濃度篩查范圍確定在0.1%～90%，重點(diǎn)篩查濃度確定為0.1%～10%。本研究前處理方法中配置農(nóng)業(yè)投入品篩查母液濃度為10 g·L-1，按農(nóng)藥有效成分濃度篩查范圍確定為10 ～9 000 mg·L-1，重點(diǎn)篩查濃度確定為10～1 000 mg·L-1。

根據(jù)實(shí)驗(yàn)室三重四級(jí)桿質(zhì)譜儀器的特性，確定GC-MS/MS中MRM模式的常規(guī)檢測(cè)線性范圍在10～500 μg·L-1，LC-MS/MS中MRM模式的常規(guī)檢測(cè)線性范圍在5～250 μg·L-1，當(dāng)化合物檢測(cè)濃度過(guò)高時(shí)應(yīng)通過(guò)稀釋獲得適宜的上機(jī)濃度。在目標(biāo)物篩查過(guò)程中，GC-MS/MS中MRM模式檢測(cè)進(jìn)樣濃度(母液稀釋100倍)應(yīng)在100 ～9 000 μg·L-1，重點(diǎn)篩查濃度應(yīng)在100～1 000 μg·L-1；LC-MS/MS中MRM檢測(cè)進(jìn)樣濃度(再稀釋1 000倍)在10 ～900 μg·L-1，重點(diǎn)篩查濃度應(yīng)在10～100 μg·L-1。這樣，農(nóng)藥隱性成分目標(biāo)物篩查方法的前處理能獲得合適的樣品檢測(cè)濃度。在無(wú)目標(biāo)篩查過(guò)程中，GC-MS/MS中Scan(全掃描)模式檢測(cè)進(jìn)樣濃度應(yīng)在5～45 mg·L-1，也符合Thermo TSQ quantum GC全掃描模式下理想的檢測(cè)濃度。

凈化方法的確定。以往的農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留痕量分析方法，在凈化步驟確定時(shí)往往通過(guò)選取合適的凈化材料、做加標(biāo)回收來(lái)驗(yàn)證方法的可靠性。本研究針對(duì)農(nóng)業(yè)投入品中農(nóng)藥有效成分的檢測(cè)，將樣品稀釋1萬(wàn)～10萬(wàn)倍，稀釋后樣品中的雜質(zhì)濃度已極低，可以滿足質(zhì)譜檢測(cè)樣品的要求。同時(shí)由于隱性成分篩查目標(biāo)成分不確定，如果選擇凈化方法，可能會(huì)導(dǎo)致某些隱性農(nóng)藥成分與雜質(zhì)一起被去除；因此，在隱性成分篩查方法中，仍以稀釋作為主要的樣品凈化手段。

2.4 GC-MS/MS和LC-MS/MS目標(biāo)物精準(zhǔn)篩查方法

以往對(duì)農(nóng)業(yè)投入品的鑒定檢測(cè)，重點(diǎn)關(guān)注其有效成分含量是否與標(biāo)注一致，因此選擇合適的氣相色譜或液相色譜等儀器即可滿足對(duì)標(biāo)注農(nóng)藥有效成分進(jìn)行檢測(cè)的定量需要。色譜檢測(cè)器對(duì)農(nóng)藥化合物具有很強(qiáng)的特異性[14]，如氣相色譜的電子俘獲檢測(cè)器(ECD)對(duì)有機(jī)氯和擬除蟲菊酯類農(nóng)藥?kù)`敏度高，氣相色譜的火焰光度檢測(cè)器(FPD)對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥較靈敏。如果農(nóng)藥在不匹配檢測(cè)器上進(jìn)行分析，靈敏度可能很低甚至完全沒(méi)信號(hào)。因此，對(duì)于未標(biāo)注的農(nóng)藥隱性成分，色譜可能無(wú)法滿足檢測(cè)的需要。本檢測(cè)方法體系選用GC-MS/MS和LC-MS/MS等三重四級(jí)桿質(zhì)譜進(jìn)行檢測(cè)，適用于大多數(shù)農(nóng)藥參數(shù)的篩查。同時(shí)，農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留分析中三重四級(jí)桿質(zhì)譜的廣泛應(yīng)用[15-17]，也為本隱性成分篩查方法提供了設(shè)備基礎(chǔ)。

GC-MS/MS檢測(cè)。基于GC-MS/MS的農(nóng)藥多殘留方法，除具有更高的靈敏度、更低的噪音外，還可以通過(guò)縮短掃描范圍提高檢測(cè)效率，并能在同一方法中編輯更多的檢測(cè)參數(shù)。本研究中建立的GC-MS/MS檢測(cè)方法可同時(shí)分析149種化合物。具體步驟為：首先，確定一個(gè)農(nóng)藥多殘留分析的升溫程序，需要保證所有待檢化合物都能出峰并且分布較為合理；其次，在確定的升溫程序條件下，確定每個(gè)化合物的保留時(shí)間，并獲得相應(yīng)化合物的單離子檢測(cè)掃描(SRM)檢測(cè)的定量和定性離子對(duì)，包括母離子、子離子和碰撞能量，離子對(duì)的選定需要兼顧響應(yīng)值和特異性；最后，以化合物出峰時(shí)間，編輯保留時(shí)間在左右各0.3 min的掃描范圍。

LC-MS/MS檢測(cè)?；贚C-MS/MS的農(nóng)藥多殘留方法編輯時(shí)類似于GC-MS/MS，需要確定所有分析化合物的離子對(duì)信息、碰撞能量、去簇電壓，以及是ESI+還是ESI-源條件。

樣品定值時(shí)采用單點(diǎn)定值法，即通過(guò)上機(jī)樣品初檢獲得峰面積，通過(guò)逐級(jí)稀釋獲得和100 μg·L-1標(biāo)樣相靠近的峰面積進(jìn)行定值，再根據(jù)式(1)計(jì)算獲得隱性成分的添加濃度。

2.5 GC-MS/MS全掃描無(wú)目標(biāo)篩查方法

農(nóng)業(yè)投入品中添加的農(nóng)藥隱性成分如屬于2.2節(jié)所給出的215種農(nóng)藥，則GC-MS/MS和LC-MS/MS目標(biāo)物篩查方法可有效確定化合物的成分和濃度。但如果隱性添加成分不在精準(zhǔn)篩查農(nóng)藥清單中，串聯(lián)氣譜與質(zhì)譜的精準(zhǔn)篩查方法則不能篩查出農(nóng)藥隱性成分。如果該農(nóng)藥隱性成分在GC-MS/MS全掃描條件下有響應(yīng)，同時(shí)又收錄于標(biāo)準(zhǔn)化合物NIST數(shù)據(jù)庫(kù)中，則該隱性成分仍有較大可能被篩查發(fā)現(xiàn)。方法步驟如下：首先，通過(guò)無(wú)目標(biāo)篩查方法獲得農(nóng)業(yè)投入品中隱性成分的全掃描質(zhì)譜圖，表1～2中149種農(nóng)藥的全掃描圖譜如圖1所示。為扣除前處理和溶劑本底帶來(lái)的干擾，需要空白試劑經(jīng)前處理后的本底質(zhì)譜圖，扣除試劑空白，比對(duì)GC-MS/MS自帶的NIST數(shù)據(jù)庫(kù)，有較高匹配度的化合物可獲得初步判定，如果實(shí)驗(yàn)室存有響應(yīng)農(nóng)藥隱性成分的標(biāo)準(zhǔn)品，可以通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)品做進(jìn)一步定性并定量。

圖1 149種農(nóng)藥GC-MS/MS篩查方法的總離子流

2.6 方法應(yīng)用

從浙江省內(nèi)嘉善、諸暨、仙居、建德等地的農(nóng)戶和農(nóng)資店共采集90批次農(nóng)業(yè)投入品，包括73批次農(nóng)藥制劑和17批次肥料，其中，農(nóng)藥制劑中篩查出20批次存在農(nóng)藥隱性添加成分，17批次肥料中未檢出農(nóng)藥隱性成分。

如表4所示，在農(nóng)藥制劑中篩查出的農(nóng)藥隱性成分包括蟲酰肼、阿維菌素、克百威、馬拉硫磷、氧樂(lè)果、三唑酮、氯蟲苯甲酰胺、滅幼脲、嘧菌酯、多菌靈、苯醚甲環(huán)唑、甲基硫菌靈、吡蟲啉、戊菌唑、聯(lián)苯菊酯、烯酰嗎啉、百菌清、腐霉利、異丙威。這些農(nóng)藥隱性成分是否屬于人為添加，需要結(jié)合是否為代謝產(chǎn)物及添加目的再行判斷確認(rèn)。

表4 農(nóng)業(yè)投入品篩查樣品清單及檢出隱性成分情況

以在甲維鹽制劑中檢出阿維菌素為例，由于甲維鹽是通過(guò)生物農(nóng)藥阿維菌素合成的，故而存在阿維菌素成分屬于正?，F(xiàn)象，但濃度不應(yīng)過(guò)大。從檢出的3批次含阿維菌素的甲維鹽制劑濃度判斷，應(yīng)屬于非人為故意添加。再如，在苯醚甲環(huán)唑和醚菌酯復(fù)配殺菌劑中檢出0.1%的蟲酰肼，從功能上講，殺菌劑中添加殺蟲劑，兩者的目的不一致，且檢出濃度偏低(僅為0.1%)，推測(cè)可能是反應(yīng)釜中的殘留成分，而非故意添加。其余檢出隱性成分或檢出濃度較高，或添加成分與標(biāo)注信息的功能一致，故基本判定為檢出農(nóng)藥隱性成分的農(nóng)業(yè)投入品。

在篩查出農(nóng)藥隱性成分的16批次農(nóng)業(yè)投入品中：從隱性成分用途看，可分為殺蟲劑類農(nóng)藥添加9批次和殺菌劑類農(nóng)藥添加7批次；按農(nóng)業(yè)投入品的生物或化學(xué)農(nóng)藥分類，可分為2批次生物農(nóng)藥和14批次化學(xué)農(nóng)藥；按添加隱性成分是否屬于禁限用農(nóng)藥，可分為2批次禁限用農(nóng)藥，包括克百威和硫丹，以及14批次常規(guī)農(nóng)藥。

3 小結(jié)

基于GC-MS/MS和LC-MS/MS建立的農(nóng)業(yè)投入品中農(nóng)藥隱性成分篩查方法體系，可用于篩查215種農(nóng)藥的隱性添加及其他可在氣相色譜-質(zhì)譜全掃描有響應(yīng)且在NIST數(shù)據(jù)中被收錄的農(nóng)藥。將該篩查方法體系應(yīng)用于浙江省內(nèi)抽檢的90批次農(nóng)投品，共篩查出20批次樣品中含有未標(biāo)注農(nóng)藥隱性成分，其中4批次樣品判定為非故意添加，16批次樣品確定為含有增強(qiáng)藥效或增加功能的故意添加農(nóng)藥隱性成分。農(nóng)藥隱性成分篩查技術(shù)除用于農(nóng)業(yè)投入品安全使用預(yù)警和規(guī)范農(nóng)業(yè)投入品質(zhì)量外，還可用于農(nóng)作物除草劑藥害、因農(nóng)業(yè)投入品使用而導(dǎo)致蠶大量死亡等農(nóng)業(yè)生產(chǎn)糾紛或事故調(diào)查。農(nóng)藥隱性成分篩查方法的應(yīng)用難點(diǎn)在于農(nóng)藥多殘留篩查參數(shù)的確定，以及相應(yīng)混合標(biāo)準(zhǔn)品的獲得成本，未來(lái)需要政府部門引導(dǎo)，多個(gè)實(shí)驗(yàn)室共同參與。