常詩卓,律廣富,葉鴻博,馬 超,林 賀,吳中波,林 喆*
(1.長春中醫(yī)藥大學藥學院,長春 130117;2.吉林省德盛農牧科技發(fā)展有限公司,吉林 四平 130700)
血脂廣泛存在于人體中,是生命細胞的基礎代謝必需物質,由血漿中的三酰甘油(TG)和類脂(磷脂、糖脂、固醇、類固醇)的總稱。高脂血被定義為血漿中過量的脂質,如糖脂,脂蛋白和磷脂等含量的升高,也稱為高脂血癥。隨著生活水平的提高和生活方式的改變,高脂血癥的發(fā)病率也隨之增加。調查顯示,中國成人血脂異常的發(fā)生率為8.6%,人口約為2.4 億[3]。高脂血癥是腦血管和冠心病、中風等心血管疾病的重要危險因素。此外,它與肥胖、脂肪肝,高血壓,高血糖密切相關。目前,高脂血癥的防治已成為國內外重大的研究課題[1-2]。近年來我國肥胖及高血脂人群數量也呈迅猛增長趨勢,研究與開發(fā)具有輔助降血脂功能的保健產品具有重要現實意義和社會意義[4-6]。
近年來,國內已有一些關于榛子油等相關成分的研究,但有關榛子保健食品的研究還有限,降血脂功能上的研究還尚少[7-9]。本實驗的榛荷咀嚼片為長春中醫(yī)藥大學中藥藥理實驗室研制,以榛子為原料,添加有降脂作用的荷葉、山楂,采用現代工藝將其制成口感醇香。前期研究證實,榛子有降低膽固醇,食用后有強烈的飽腹感等特點,而荷葉中的荷葉堿及山楂黃酮被廣泛認為具有良好地降血脂功效。本研究從榛子的特性以及荷葉、山楂的傳統(tǒng)功效入手,分析榛荷咀嚼片對大鼠高血脂癥的影響。
1.1 動物 Wistar SPF 級健康雄性大鼠,72 只,體質量180 ~200 g,用維持性飼料適應性飼養(yǎng)1 周。
1.2 藥物及試劑 榛荷咀嚼片(長春中醫(yī)藥大學中藥藥理實驗室研制)、基礎飼料(長春億斯實驗動物有限公司);膽固醇(北京索萊寶科技有限公司);蛋黃粉(北京索萊寶科技有限公司);膽鹽(北京索萊寶科技有限公司);徽明山有機豬油(安徽徽明山農業(yè)股份有限公司);食用明膠)(億斯實驗動物有限公司);辛伐他?。ㄉ綎|魯抗醫(yī)藥集團賽特有限公司);血清總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)酶免酶聯免疫試劑盒(酶免);氯化鈉、水合氯醛(北京化學工業(yè)集團有限責任公司)。
1.3 儀器 電子天平HZQ-A30000(福州華志科學儀器有限公司);電子天平JA2003B(上海越平科學儀器有限公司);電熱恒溫鼓風干燥箱DHG-9245A(上海一恒科學儀器有限公司);恒溫培養(yǎng)箱SLI-700(上海愛明儀器有限公司);恒溫水槽ZSBB-724(海智城分析儀器制造有限公司);酶標儀(賽默費舍爾科技有限公司);手術器械;粉碎機(永歷制藥機械有限公司);離心機(德國艾本德股份公司)。
2.1 藥物的制備
2.1.1 大鼠高脂飼料的調配 由78.8%基礎飼料面為主料,1%膽固醇,10%豬油,10%蛋黃粉,0.2%膽鹽調配,食用明膠為黏合劑配制。
2.1.2 治療藥的準備 辛伐他?。焊鶕栃越M大鼠體質量,按給藥量0.5 mg/kg、給藥體積 1 mL/100 g 稱取辛伐他汀并溶于相應蒸餾水中;榛荷咀嚼片高、中、低劑量 藥物的制備:根據給藥量720、360、180 mg/kg 稱取榛荷咀嚼片,按給藥體積 1 mL/100 g 溶于相應蒸餾水中。
2.2 分組 72SPF 只健康大鼠,每組12 只,按體質量隨機分成空白組、模型組、陽性對照組(辛伐他汀,0.5 mg/kg)、榛荷咀嚼片高、中、低劑量組(720、360、180 mg/kg)。
2.3 造模 72 只健康雄性大鼠,在實驗環(huán)境下大鼠喂養(yǎng)普通基礎飼料7 d,自正式實驗開始后,各組動物換用高脂飼料喂養(yǎng)10 d,取尾血測定血清中總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDLC)、低密度脂蛋白(LDLC)水平,與喂飼高脂飼料前比以確定是否已形成高脂血癥模型。
2.4 給藥 高脂血癥模型確定后,灌胃給藥45 d,空白組和模型組給予生理鹽水、陽性組給予辛伐他汀0.5 mg/kg、榛荷咀嚼片高、中、低劑量組給予哈榛荷咀嚼片顆粒720、360、180 mg/kg,給藥體積均為1 mL/100 g。
2.5 動物處理 于麻醉前16 h 禁食,腹腔注射10%水合氯醛(300 mg/kg)予以麻醉,腹主動脈采樣取血。血液樣品3 000 r/min 離心15 min,取血清即為樣品。
2.6 統(tǒng)計學方法 實驗數據用 SPSS 19.0 進行統(tǒng)計分析,數據用均數±標準差(±s)表示,組間比較并進行t檢驗,P<0.05 具有統(tǒng)計學意義。
3.1 對大鼠血清中總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDLC)、低密度脂蛋白(LDLC)的影響 與正常組相比,模型組均具有顯著性差異,高脂血癥模型建立;給藥后,與模型組相比,陽性對照組、高劑量組TC、TG、LDLC 含量降低,HDLC 含量升高,具有顯著性差異,有統(tǒng)計學意義(P< 0.01)。中劑量組、低劑量組有差異,有統(tǒng)計學意義(P<0.05),見表1。
表1 各組大鼠腹主動脈血中TC、TG、HDLC、LDLC 含量變化(± s,n = 10) mmol/L
表1 各組大鼠腹主動脈血中TC、TG、HDLC、LDLC 含量變化(± s,n = 10) mmol/L
注:與空白組比較,## P <0.01;與模型組比較,△P <0.05,△△P <0.01
組 別 總膽固醇/TC 三酰甘油/TG 高密度脂蛋白/HDLC 低密度脂蛋白/LDLC空白組 1.31±0.21 0.21±0.07 0.91±0.15 0.31±0.09模型組 2.31±0.18## 0.62±0.06## 0.78±0.07## 1.11±0.07##陽性對照組 1.90±0.24△△ 0.29±0.05△△ 1.14±0.14△△ 0.86±0.05△△榛荷咀嚼片高劑量組 1.86±0.27△△ 0.32±0.07△△ 1.09±0.12△△ 0.81±0.08△△榛荷咀嚼片中劑量組 1.90±0.31△ 0.45±0.06△ 1.05±0.16△ 0.97±0.12△榛荷咀嚼片低劑量組 1.93±0.28△ 0.50±0.04△ 0.99±0.18△ 1.08±0.06△
本實驗是用本實驗室研制的榛荷咀嚼片對高血脂癥大鼠進行研究,結果表明在用高脂飼料飼喂10 d,以確定是否有高血脂指標的變化。飼喂后,血清中的TC、TG 的含量明顯升高,HDLC 的含量降低,判定大鼠模型誘導成功。通過本實驗證明,在用辛伐他汀陽性對照組、榛荷咀嚼片高劑量組(720 mg/kg/d)、榛荷咀嚼片中劑量組(360 mg/kg/d)、榛荷咀嚼片低劑量組(180 mg/kg/d)均可使大鼠血清中的TC、TG、LDLC 降低,使HDLC 升高表明榛荷咀嚼片有明顯的降低血脂的作用,同時對高脂飲食所致的高血脂癥有良好的防治作用。榛荷咀嚼片對大鼠高脂血癥影響的研究,開辟了以榛子為原材料研究保健食品的新方向,為榛子的多方向研究提供了理論基礎。