張璐瑤 孫婉 劉娟
摘? 要:為探討金魚(Carassius auratus auratus Linnaeus)、中華大蟾蜍(Bufo gargarizans)、雞(Gallus domesticus)、家鴿(Aplopelia bonaparte)和家兔(Oryctolagus cuniculus)心臟的組織結(jié)構(gòu)與其生境的適應(yīng)關(guān)系,制作了5種動(dòng)物心臟石蠟組織切片,并采集圖像進(jìn)行了分析。結(jié)果表明:5種動(dòng)物心臟所占體重百分比以家鴿最高,金魚最小。金魚心肌纖維細(xì)長(zhǎng),且分支少,家兔心肌纖維分支多。5種動(dòng)物心臟結(jié)構(gòu)的差異,與其從水生到兩棲再到陸生的生境遷移變化相適應(yīng)。
關(guān)鍵詞:金魚;中華大蟾蜍;家鴿;心臟;比較組織學(xué)
中圖分類號(hào) Q954? ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A? ?文章編號(hào) 1007-7731(2019)09-0065-3
Abstract:Paraffin tissue sections of hearts of five small animals were prepared to investigate the relationship between the structure of hearts of Carassius auratus auratus Linnaeus,Bufo gargarizans,Gallus domesticus,Aplopelia bonaparte and Oryctolagus cuniculus and their habitats.The results showed that Pigeons had the highest percentage of heart weight and goldfish had the smallest percentage.The myocardial fibers of goldfish are slender and less branched,and the myocardial fibers of rabbits are more branched.The differences of heart structure of five species of animals are adapted to the changes of their habitat migration from aquatic to amphibian to terrestrial.
Key words:Carassius auratus auratus Linnaeus;Bufo gargarizans;Aplopelia bonaparte;Heart;Comparative Histology
心臟是脊椎動(dòng)物循環(huán)系統(tǒng)中的重要器官,其主要功能是推動(dòng)血液流動(dòng),把血液運(yùn)行至身體各個(gè)部分。目前,關(guān)于初生麋鹿、非洲白犀牛、穿山甲等動(dòng)物的心臟組織結(jié)構(gòu)及其功能的研究已有報(bào)道[1-3],而從生物進(jìn)化與生境角度對(duì)多種動(dòng)物心臟結(jié)構(gòu)進(jìn)行比較的研究仍較少。石蠟組織切片技術(shù)是組織胚胎學(xué)、生理病理學(xué)以及細(xì)胞生物學(xué)中一種常用的試驗(yàn)方法,能夠反映組織細(xì)胞的真實(shí)狀況[4-5]。本試驗(yàn)根據(jù)脊椎動(dòng)物從水生、兩棲到陸生的進(jìn)化關(guān)系,選取金魚、中華大蟾蜍、雞、家鴿和家兔5種動(dòng)物,制作石蠟組織切片并采集圖像進(jìn)行比較分析,以期獲得5種動(dòng)物心臟的組織結(jié)構(gòu)在這一演化過程中的變化規(guī)律,為進(jìn)一步研究動(dòng)物心臟組織結(jié)構(gòu)以及進(jìn)化發(fā)育等相關(guān)研究提供科學(xué)依據(jù)。
1 材料
1.1 試驗(yàn)動(dòng)物 市購(gòu)健康成年金魚、中華大蟾蜍、雞、家鴿和家兔各10例,不分雌雄。各種動(dòng)物的基本形態(tài)特征見表1。
1.2 試劑與儀器 蘇木精,由南京奧多福尼生物科技有限公司生產(chǎn);伊紅(Y水溶),由天津市大茂化學(xué)試劑廠生產(chǎn);乙醇(分析純),由南京華嘉化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn);二甲苯(分析純),由廣州迪鑫多科學(xué)儀器有限公司生產(chǎn);切片機(jī)(2508型),由上海珂淮儀器有限公司生產(chǎn);體式顯微鏡(型號(hào)為MOTIC SMZ-140);倒置熒光顯微鏡(型號(hào)為徠卡DMI3000B)。
2 方法
2.1 取材 用適量乙醚將動(dòng)物麻醉后,迅速解剖取出心臟,生理鹽水清洗2~3次,然后用中性甲醛溶液固定約24h。
2.2 石蠟切片制作 將組織于70%乙醇中分別沖洗3次,脫水和透明程序依次為:70%乙醇→80%乙醇→95%乙醇I→95%乙醇II→無(wú)水乙醇I→無(wú)水乙醇II各歷時(shí)1h→無(wú)水乙醇∶二甲苯=1∶1→二甲苯I→二甲苯II各歷時(shí)40min。浸蠟步驟為蠟杯Ⅰ40min?蠟杯Ⅱ50min?蠟杯Ⅲ1h,然后包埋。用旋轉(zhuǎn)式切片機(jī)把蠟塊切成6μm厚的薄片,50℃烤片30min。脫蠟程序?yàn)槎妆剑á瘢┖投妆剑á颍└?5min,二甲苯∶無(wú)水乙醇=1∶1為5min。常規(guī)方法復(fù)水后磷鎢酸蘇木精染色30min,5%的冰乙酸分色40s后伊紅染色5min。常規(guī)方法脫水透明后制作成永久切片,倒置顯微鏡觀察并采集圖譜。
3 結(jié)果與分析
3.1 心臟解剖結(jié)構(gòu)比較 金魚的心臟比較小,約占體重的0.11%,由靜脈竇、心房和心室3個(gè)部分構(gòu)成。在心室的前方有1個(gè)膨大的動(dòng)脈球,是魚類腹大動(dòng)脈起始部的球狀肥厚部,動(dòng)脈球肌層厚且向內(nèi)凸起形成肉嵴(圖1A)。中華大蟾蜍心臟約占體重的0.13%,可分為心室、心房和靜脈竇3部分(圖1B)。心室較小,近似三角形,心室壁厚,向內(nèi)形成肉柱或肉嵴,可以緩沖由左右心房流進(jìn)心室內(nèi)的血。心房由房間隔分為左右2個(gè)部分(圖1C)。雞的心臟約為體重的0.44%,家鴿心臟約為體重的0.49%,鳥類心室和心房完全分隔開,左心室腔狹細(xì),壁厚;右心室腔稍大,壁稍薄;左右心房均較?。▓D1D和圖1E)。家兔的心臟約為體重的0.43%,分為4個(gè)腔,具有主動(dòng)脈弓,其管腔較大,管壁較厚;靜脈系統(tǒng)趨于簡(jiǎn)化(圖1F)。