抗菌肽對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、養(yǎng)分消化率、腸道微生物含量及絨毛結(jié)構(gòu)的影響

李 平，孫玉龍，廖吉林

(四川達(dá)州職業(yè)技術(shù)學(xué)院，四川達(dá)州 635000)

斷奶后由于飼料形態(tài)、環(huán)境和生理等方面發(fā)生變化，使仔豬承受許多壓力和應(yīng)激，導(dǎo)致采食量下降、生長(zhǎng)性能下降及疾病和死亡率增加。在斷奶仔豬飼料中一般添加抗生素來(lái)保持豬只健康，提高生長(zhǎng)性能，但抗生素帶來(lái)的藥殘和耐藥性也是養(yǎng)殖業(yè)面臨的一個(gè)難題。因此，尋找在體內(nèi)活性強(qiáng)、快速、廣譜、無(wú)細(xì)菌耐藥性和副作用的新型抗菌藥物是目前的研究熱點(diǎn)（單安山等，2018）。從這個(gè)意義上說(shuō)，抗菌肽被認(rèn)為是理想的候選物之一，因?yàn)樗哂刑烊豢咕匦?、廣譜活性、作用速度和細(xì)菌耐藥性較低的特點(diǎn)（潘行正等，2010）。Marr等（2006）推測(cè)，與目前使用的抗生素不同的是，細(xì)菌對(duì)抗菌肽的耐藥性被認(rèn)為是不可能的，因?yàn)榭咕淖饔玫哪繕?biāo)很多，但消除一個(gè)目標(biāo)的意義不大。抗菌肽是一種小的基因編碼肽，對(duì)革蘭氏陰性和革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌、真菌和分枝桿菌具有廣泛的抗菌作用（Zasloff，2002）。由于抗菌肽的快速和廣譜特性可以用于治療微生物感染，特別是由抗生素耐藥細(xì)菌引起的感染（Hadley和Hancock，2010）。但目前關(guān)于抗菌肽的研究報(bào)道大多集中在體外研究，對(duì)幼齡動(dòng)物的研究數(shù)據(jù)較少。因此，本試驗(yàn)以21 d斷奶仔豬為研究對(duì)象，研究抗菌肽替代鹽霉素對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、養(yǎng)分消化率、腸道微生物含量及絨毛結(jié)構(gòu)的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)分組 試驗(yàn)選擇平均體重為（5.76±0.02）kg的21 d斷奶的杜×長(zhǎng)×大仔豬672頭，根據(jù)個(gè)體大小隨機(jī)分為4組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)42頭。試驗(yàn)分為1～14 d和15～28 d兩個(gè)階段，對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧+60 mg/kg鹽霉素，抗菌肽組飼喂基礎(chǔ)日糧+0、50或100 mg/kg抗菌肽（由上海邦成生物工程有限公司提供）。兩階段仔豬日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 兩階段仔豬日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.2 數(shù)據(jù)收集與分析 分別在試驗(yàn)14 d和28 d對(duì)豬只進(jìn)行稱(chēng)重，統(tǒng)計(jì)各階段的采食量，試驗(yàn)結(jié)束后計(jì)算階段采食量、日增重和料重比。在試驗(yàn)第11和25天每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選擇5頭仔豬進(jìn)行代謝試驗(yàn)，采用全收糞法收集3 d糞樣。糞樣混合后-20℃保存，同時(shí)收集各階段飼料樣品，飼料和糞樣用于分析營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)，同時(shí)分析糞樣總厭氧菌、大腸桿菌和梭菌含量。在14和28 d早上每個(gè)重復(fù)選擇3頭豬進(jìn)行屠宰，收集血清，分離小腸各片段。血清用于分析免疫球蛋白A、G和M的含量，測(cè)定十二指腸、空腸和回腸絨毛高度和隱窩深度，計(jì)算絨毛高度與隱窩深度比值。

1.3 數(shù)據(jù)分析 采用SAS軟件一般線性模型（GLM）程序分析數(shù)據(jù)，試驗(yàn)對(duì)照組與不同抗菌肽添加水平組之間的差異用Tukey法進(jìn)行多重比較，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 日糧添加不同水平抗菌肽對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響 由表2可知，對(duì)照組較抗菌肽組顯著提高了斷奶仔豬28 d體重（P＜0.05），1～14 d和1～28 d日增重（P＜0.05），1～14 d、15～28 d、1～28 d采食量，顯著降低了1～28 d料重比（P＜0.05）。隨著日糧抗菌肽添加水平的升高，28 d體重、1～14 d、15～28 d及1～28 d日增重顯著升高（P＜0.05）。日糧抗菌肽添加水平對(duì)各階段日采食量和料重比均無(wú)顯著影響（P＞0.05）。

表2 抗菌肽對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響

2.2 日糧添加不同水平抗菌肽對(duì)斷奶仔豬養(yǎng)分表觀消化系數(shù)的影響 由表3可知，對(duì)照組較抗菌肽組顯著提高了斷奶仔豬14和28 d干物質(zhì)、14 d粗蛋白質(zhì)表觀消化系數(shù)（P＜0.05）。同時(shí)，隨著日糧抗菌肽添加水平（0～100 mg/kg），14和28 d干物質(zhì)和粗蛋白質(zhì)表觀消化系數(shù)顯著升高（P＜0.05）。對(duì)照組和抗菌肽組對(duì)斷奶仔豬必需氨基酸和非必需氨基酸表觀消化系數(shù)均無(wú)顯著影響（P＞0.05）。

2.3 日糧添加不同水平抗菌肽對(duì)斷奶仔豬糞和腸道細(xì)菌含量的影響 由表4可知，對(duì)照組較抗菌肽組顯著降低了14和28 d糞中大腸桿菌含量（P＜0.05），且總厭氧菌、梭菌和大腸桿菌含量隨抗菌肽添加水平的升高而顯著降低（P＜0.05）。

表3 抗菌肽對(duì)斷奶仔豬養(yǎng)分消化率的影響

與抗菌肽組相比，對(duì)照組顯著降低了回腸總厭氧菌含量（P＜0.05）。對(duì)照組與抗菌肽組對(duì)回腸總厭氧菌、梭菌和大腸桿菌含量無(wú)顯著影響（P＞0.05）。28 d斷奶仔豬回腸和盲腸總厭氧菌和大腸桿菌及盲腸梭菌含量隨日糧抗菌肽添加水平的升高而升高（P＜0.05）。

2.4 日糧添加不同水平抗菌肽對(duì)斷奶仔豬血清免疫球蛋白含量的影響 由表5可知，對(duì)照組和抗菌肽組對(duì)斷奶仔豬14和28 d血清IgG、IgA和IgM含量均無(wú)顯著影響（P＞0.05）。

表4 抗菌肽對(duì)斷奶仔豬糞和腸道細(xì)菌含量的影響???????????????????????????????lg?CFU/g

表5 抗菌肽對(duì)斷奶仔豬血清免疫球蛋白含量?????????????????的影響?????????????mg/mL

2.5 日糧添加不同水平抗菌肽對(duì)斷奶仔豬腸絨毛形態(tài)的影響 由表6可知，飼喂對(duì)照組日糧的斷奶仔豬較抗菌肽組顯著降低了空腸隱窩深度（P＜0.05），顯著提高了空腸絨毛高度與隱窩深度的比值（P＜0.05）。十二指腸和空腸絨毛高度隨著抗菌肽添加水平的升高而升高（P＜0.05），而絨毛高度和隱窩深度的比值顯著降低（P＜0.05）。對(duì)照組與抗菌肽組對(duì)回腸絨毛形態(tài)無(wú)顯著影響（P＞0.05）。

3 討論

抗菌肽提高了斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能，這與Jin等（2008）的研究結(jié)果一致。Shan等（2007）研究發(fā)現(xiàn)，日糧添加乳酸發(fā)酵的抗菌肽對(duì)斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能無(wú)顯著差異?？咕膶?duì)仔豬生長(zhǎng)性能影響的差異與抗菌肽種類(lèi)、添加水平及其作用類(lèi)型不同有關(guān)。同時(shí)試驗(yàn)結(jié)果也發(fā)現(xiàn)，抗菌肽提高了仔豬干物質(zhì)和粗蛋白質(zhì)的表觀消化率，這與Jin等（2008）的研究結(jié)果一致?？股馗纳茽I(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的表觀消化率可能是由于提高腸道對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收的效率，抑制了有害腸道菌群的生長(zhǎng)和代謝活動(dòng)，同時(shí)改變了腸道形態(tài)，提高了腸上皮厚度和上皮細(xì)胞的周轉(zhuǎn)速度（Choi等，2011）。另一方面，添加日糧添加抗菌肽提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率可能是由于其可以調(diào)節(jié)腸道微生物平衡，刺激黏膜免疫系統(tǒng)（Wang等，2007）。

表6 抗菌肽對(duì)斷奶仔豬小腸絨毛形態(tài)的影響

斷奶仔豬自身的免疫系統(tǒng)隨生長(zhǎng)而發(fā)育，直到仔豬4～5周才能產(chǎn)生有效的免疫反應(yīng)（Wang等，2006）。斷奶仔豬在斷奶后的前2周非常容易受到疾病和應(yīng)激的影響，在這一階段，非特異性免疫對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、免疫功能更重要。血清免疫球蛋白是調(diào)節(jié)和增強(qiáng)免疫功能的必要條件，對(duì)斷奶仔豬具有保護(hù)作用，可以減輕斷奶應(yīng)激，提高斷奶仔豬的健康狀況和生長(zhǎng)性能。但本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，日糧抗菌肽添加水平對(duì)斷奶仔豬血清免疫球蛋白的含量無(wú)顯著影響，這與Shan等（2007）的報(bào)道不一致。

抗菌肽通過(guò)改善宿主腸道平衡和腸道微生態(tài)環(huán)境，抑制有害微生物（如梭菌和大腸菌群），利于有益微生物（如乳酸菌和雙歧桿菌），對(duì)宿主動(dòng)物具有有益作用（Wang等，2007）。試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，28 d斷奶仔豬回腸和盲腸總厭氧菌和大腸桿菌以及盲腸梭菌含量隨日糧抗菌肽添加水平的升高而升高，這與Jin等（2008）的研究結(jié)果一致。十二指腸、空腸和回腸的絨毛形態(tài)包括絨毛高度、隱窩深度和絨毛高度與隱窩深度比值，可以反映豬腸道的健康水平。絨毛高度提高表明絨毛表面積增大，可以促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的有效吸收（Caspary，1992）。十二指腸和空腸絨毛高度隨抗菌肽添加水平的升高而升高，而絨毛高度和隱窩深度的比值顯著降低。Wang等（2006）也發(fā)現(xiàn)，日糧添加抗菌肽-乳鐵蛋白提高了斷奶仔豬小腸黏膜絨毛高度，降低了隱窩深度。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，抗菌肽可以改變斷奶仔豬腸道的組織形態(tài)，可以為抗生素替代品在豬上的應(yīng)用提供新的信息。

4 結(jié)論

日糧添加抗菌肽可以提高斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、干物質(zhì)和粗蛋白質(zhì)的表觀消化率、絨毛形態(tài)以及降低糞中有害菌的含量，可以作為抗生素的潛在替代物。