烯效唑、多效唑在果蔬中的殘留限量及檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展

李典晏 褚能明 張雪梅 向嘉 孟霞 唐偲雨 舒曉 王娜 康月瓊 楊俊英

摘? ?要? ?烯效唑、多效唑在作物和土壤中較為穩(wěn)定，殘效期長(zhǎng)，其殘留于作物體內(nèi)被人食用后可能對(duì)人體健康產(chǎn)生不利影響，殘留于土壤中對(duì)后茬作物產(chǎn)生藥害。簡(jiǎn)介烯效唑、多效唑在我國(guó)登記情況，國(guó)內(nèi)外有關(guān)殘留限量;闡述采用氣相色譜法（GC）、液相色譜法（LC）、氣相色譜 -質(zhì)譜法（GC-MS）和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/MS）測(cè)定水果和蔬菜中多效唑和烯效唑殘留的研究進(jìn)展。指出目前我國(guó)相關(guān)的限量標(biāo)準(zhǔn)很少，所涉及的農(nóng)產(chǎn)品種類和產(chǎn)品指標(biāo)比較局限，不利于市場(chǎng)監(jiān)管;亟待完善植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑相關(guān)的限量標(biāo)準(zhǔn)，并指導(dǎo)農(nóng)民合理用藥，且加強(qiáng)市場(chǎng)監(jiān)管，才能為人們的食品安全提供保障。

關(guān)鍵詞? ?果蔬;烯效唑;多效唑;殘留;檢測(cè)技術(shù)

中圖分類號(hào)：S132? ? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：C? ? DOI：10.19415/j.cnki.1673-890x.2019.1.025

烯效唑（Uniconazole）和多效唑（Paclobutrazol）是我國(guó)廣泛使用的兩種植物生長(zhǎng)延緩劑，可通過抑制赤霉素合成，抑制植物縱向生長(zhǎng)，促進(jìn)橫向生長(zhǎng)，使植株變矮，促進(jìn)側(cè)芽生長(zhǎng)和花芽形成，增進(jìn)植物抗逆性，提高產(chǎn)量。常用于水稻[1]、小麥[2]、花生[3]和油菜[4]等作物上，主要作用為增加分蘗，控制株高，提高抗倒伏能力;果樹上用來(lái)控梢[5];觀賞植物上用于控制株形，促進(jìn)花芽分化和多開花等[6];薯類、蘿卜等塊根塊莖類作物上使用該調(diào)節(jié)劑，增產(chǎn)效果顯著[7-9]。但烯效唑和多效唑在作物和土壤中較為穩(wěn)定，殘效期長(zhǎng)，其殘留于作物體內(nèi)被人食用后可能對(duì)人體健康產(chǎn)生不利影響，殘留于土壤中對(duì)后茬作物產(chǎn)生藥害，特別是多效唑，若使用或處理不當(dāng)，極易造成后茬種植的蔬菜藥物殘留超標(biāo)。近年來(lái)，由于生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的濫用及使用不當(dāng)導(dǎo)致的食品安全問題逐漸增多，引起了人們的關(guān)注。

1 概況

1.1 烯效唑和多效唑在我國(guó)登記情況

烯效唑和多效唑從上市以來(lái)就廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)，如水稻、小麥、油菜、棉花、大豆、花生、馬鈴薯，果樹等，在我國(guó)的具體登記情況見表1。

1.2 烯效唑和多效唑的國(guó)內(nèi)外有關(guān)殘留限量

有關(guān)烯效唑和多效唑的最大殘留限量（MRL），各國(guó)都有嚴(yán)格的規(guī)定，如日本規(guī)定：烯效唑在萵苣和洋蔥中的MRL值為0.05 mg·kg-1，在大米、甜菜根、卷心菜和草莓中的MRL值為0.1 mg·kg-1;多效唑在芒果、芭樂、香蕉、菠蘿、獼猴桃、木瓜和鱷梨中的MRL值為0.01 mg·kg-1，梨、柑橘和枇杷中的MRL值為1 mg·kg-1，蘋果和櫻桃中的MRL值為0.5 mg·kg-1，桃中的MRL值為0.2 mg·kg-1，大米中的MRL值為0.02 mg·kg-1，西紅柿中的MRL值為0.05 mg·kg-1 [10]。澳大利亞規(guī)定：多效唑在小麥、大麥和鱷梨中的MRL值為0.1 mg·kg-1，在番茄、青花菜和核果類水果的MRL值為0.01 mg·kg-1。韓國(guó)規(guī)定：多效唑在杏、櫻桃、桃和李子中的MRL值為0.05 mg·kg-1。新西蘭規(guī)定：多效唑在鱷梨和核果類水果中的MRL值為0.01 mg·kg-1。CAC和美國(guó)的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)中尚未見到有關(guān)規(guī)定。

我國(guó)《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)—食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB 2763—2016） [11]中，對(duì)部分農(nóng)產(chǎn)品中的烯效唑和多效唑的殘留限量作了規(guī)定，具體限量見表2、表3。

2 檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展

目前，研究報(bào)道的測(cè)定水果和蔬菜中多效唑和烯效唑殘留的方法主要有氣相色譜法（GC）、液相色譜法（LC）、氣相色譜 -質(zhì)譜法（GC-MS）、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/MS）等。

2.1 氣相色譜法

氣相色譜法（GC）具有高效、快速、樣品用量少和靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)，可以將分配系數(shù)相差很近的組分進(jìn)行分離，實(shí)現(xiàn)復(fù)雜組分的檢測(cè)，適用于分析大多數(shù)熱穩(wěn)定性良好、易氣化的物質(zhì)。

徐國(guó)鋒、聶繼云等采用（GC-ECD）氣相色譜法同時(shí)測(cè)定葡萄中的多效唑和烯效唑殘留。樣品經(jīng)乙腈提取，SPE柱凈化，GC-ECD檢測(cè)，結(jié)果表明：農(nóng)藥的添加水平在0.02～0.10 mg·kg-1范圍時(shí)，2種農(nóng)藥的添加回收率在87.3%～104.8%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為4.2%～10.7%，多效唑的定量限為0.02 mg·kg-1，烯效唑定量限為0.006 mg·kg-1 [12]。

趙健等建立了白菜和黃瓜中多效唑殘留量的氣相色譜測(cè)定方法。樣品經(jīng)乙腈提取凈化后，采用氣相色譜-氮磷檢測(cè)器測(cè)定，實(shí)驗(yàn)證明：白菜和黃瓜中多效唑的平均添加回收率在88.4%～102%，變異系數(shù)在3.4%～8.6%，最低檢出濃度為0.01 mg·kg-1 [13]。

2.2 液相色譜法

液相色譜法（LC）是以液體為流動(dòng)相的色譜分析方法，是一種通用型的分析方法，幾乎可以分析所有離子的，極性的、非極性的、高沸點(diǎn)不易汽化的、熱不穩(wěn)定的及具有生物活性的物質(zhì)，具有柱效高、分析速度快、重復(fù)性好、應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點(diǎn)，該法已成為現(xiàn)代分析技術(shù)的主要手段之一，目前在各大科學(xué)領(lǐng)域均有廣泛的應(yīng)用。

張敏等建立了一種簡(jiǎn)單、快速，同時(shí)檢測(cè)水果中赤霉素、多效唑和烯效唑殘留量的固相萃取-高效液相色譜（SPE-HPLC）方法。該方法用80%甲醇水提取樣品，C18固相萃取小柱凈化，采用DAD檢測(cè)器220 nm紫外掃描檢測(cè)，結(jié)果表明：3 種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑在0.5～10 ?g·mL-1內(nèi)線性關(guān)系良好;檢出限分別為赤霉素0.002 mg·kg-1、多效唑0.04 mg·kg-1、烯效唑0.02 mg·kg-1;在0.2～0.8 mg·kg-1加標(biāo)水平下，3種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑平均回收率為78%～91%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.4%～5.4%[14]。該方法適用于水果中赤霉素、多效唑和烯效唑多殘留分析檢測(cè)。

邵金良等建立同時(shí)測(cè)定果蔬中噻苯隆、氯吡脲、噻唑隆、多效唑和烯效唑5種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑殘留的高效液相色譜分析方法。該方法用乙腈提取樣品，經(jīng)NH2固相萃取小柱凈化，C18色譜柱分離后，225 nm波長(zhǎng)檢測(cè)，結(jié)果表明：5種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑在0.05～1.0 mg·kg-1范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，檢出限為0.008～0.01 mg·kg-1，定量限為0.020～0.032 mg·kg-1。在0.10， 0.20， 0.50 mg·kg-1添加水平，5種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑回收率在73.8%～113.7%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在4.68%～9.92%[15]。該方法能對(duì)果蔬中5種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑殘留實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確定量分析。

2.3 氣相色譜-質(zhì)譜法

氣相色譜-質(zhì)聯(lián)法（GC-MS）因同時(shí)具有GC的高分辨率和MS的高靈敏度，具有比GC更強(qiáng)的定性能力和更低的檢出限，被廣泛應(yīng)用于復(fù)雜組分的分離與鑒定，是樣品定性定量的有效工具。

徐宜宏等建立了蘋果、番茄、玉米中莠去津、甲萘威、三唑酮、西瑪津、戊唑醇、烯效唑、多效唑7種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（GC-MS/MS）確證方法。該法選用乙腈為提取溶劑，采用PSA粉末和石墨化炭黑粉末結(jié)合的基質(zhì)分散固相萃取技術(shù)為凈化方法，GC-MS/MS的多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式（MRM）定性測(cè)定，內(nèi)標(biāo)法定量，結(jié)果表明：7種農(nóng)藥在0.01～5.0 mg·L-1間具有良好線性，在0.01～0.1 mg·kg-1添加水平下，農(nóng)藥的回收率為74.8%～109.2%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.7%～14.8%[16]。

姜楠等利用氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法建立了14種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的高通量檢測(cè)技術(shù)。樣品經(jīng)酸化乙腈提取后，依據(jù)各目標(biāo)物性質(zhì)采取分級(jí)凈化，質(zhì)譜多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式（MRM）檢測(cè)，實(shí)現(xiàn)了對(duì)包括烯效唑、多效唑在內(nèi)的14種不同理化性質(zhì)的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的高通量檢測(cè)[17]。

2.4 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/MS），將LC的高分離能力與MS的高選擇性、高靈敏度等優(yōu)點(diǎn)結(jié)合起來(lái)，具有幾乎通用的多殘留分析能力、更低的檢出限、更強(qiáng)的抗基質(zhì)干擾的能力及更為準(zhǔn)確的定性能力，在分析檢測(cè)各領(lǐng)域，特別是多殘留檢測(cè)方面得到了廣泛的應(yīng)用。

于紅等采用高效液相色譜-電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定水果中2種植物生長(zhǎng)延緩劑多效唑和烯效唑殘留。該法以甲醇為提取溶劑，采用超聲波輔助溶劑萃取法萃取，C18色譜柱分離后，在正離子模式下測(cè)定，結(jié)果表明：多效唑和烯效唑在1.0～200.0 μg·L-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，在2.0， 10.0， 50.0 μg·kg-1的添加水平下，2 種目標(biāo)化合物的平均加標(biāo)回收率為87%～103%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于5 .0%，方法的檢出限分別為1.5μg·kg-1和2.0 μg·kg-1 [18]。該方法檢出限低、前處理方法簡(jiǎn)單、回收率高，適用于水果中多效唑和烯效唑的殘留檢測(cè)。

葉倩等建立了QuEChERS-超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（QuEChERS-UPLC-MS/MS）法檢測(cè)葉類蔬菜中5種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的方法。樣品經(jīng)QuEChERS法預(yù)處理，用乙酸乙腈溶液提取，GCB和PSA凈化，C18色譜柱分離，采用多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式（MRM）檢測(cè)，外標(biāo)法定量，結(jié)果表明：在1～1000 μg·L-1范圍內(nèi)，氯吡脲、多效唑、烯效唑、丙環(huán)唑和矮壯素5種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的質(zhì)量濃度與對(duì)應(yīng)的峰面積間呈良好的線性關(guān)系，檢出限為0.002～0.04 μg·kg-1，定量限為0.01 mg·kg-1。在 0.01， 0.1， 0.5 mg·kg-1添加水平下，5 種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑在菜心、芥藍(lán)和普通白菜中的平均回收率為71%～93%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.2%～10%[19]。

3 展望

常用的氣相色譜法、液相色譜法僅依靠保留時(shí)間進(jìn)行定性分析，易產(chǎn)生假陽(yáng)性或假陰性的問題，而質(zhì)譜技術(shù)在定性能力方面優(yōu)勢(shì)明顯，是法規(guī)確證技術(shù)之一，因此色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)的推廣和普及對(duì)該類植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的檢測(cè)及監(jiān)管發(fā)揮著不可替代的作用，定會(huì)加速向高靈敏度、高特異性、高通量等方向發(fā)展，以滿足快速、準(zhǔn)確、痕量分析的檢測(cè)要求。

另外，與烯效唑、多效唑等植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑廣泛使用的現(xiàn)狀不同的是目前我國(guó)相關(guān)的限量標(biāo)準(zhǔn)很少，所涉及的農(nóng)產(chǎn)品種類和產(chǎn)品指標(biāo)比較局限，不利于市場(chǎng)監(jiān)管。因此，我國(guó)亟待完善植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑相關(guān)的限量標(biāo)準(zhǔn)，并指導(dǎo)農(nóng)民合理用藥，且加強(qiáng)市場(chǎng)監(jiān)管，才能為人們的食品安全提供保障。

參考文獻(xiàn)：

[1] 黃熙志，孔德虞，柳長(zhǎng)澤.烯效唑?qū)λ镜脑霎a(chǎn)效果及應(yīng)用技術(shù)[J].農(nóng)業(yè)科技通訊，1994（7）：27-28.

[2] 關(guān)華，韓惠芳，楊文鈺.烯效唑?qū)π←溍缙谏L(zhǎng)的調(diào)控效應(yīng)（II）[J].中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2002（4）：56-58，89.

[3] 宮慶濤，張坤鵬，武海斌，等.15%多效唑可濕性粉劑對(duì)花生生長(zhǎng)及產(chǎn)量的影響[J].山西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2015，43（1）：25-27，53.

[4] 周偉軍，樓健，宋榮軍.烯效唑?qū)τ筒藟蜒硇?yīng)及增產(chǎn)作用探討[J].浙江農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1996，22（6）：609-613.

[5] 常瑞豐，王召元，張立莎，等.烯效唑在果樹上應(yīng)用的研究進(jìn)展[J].安徽農(nóng)學(xué)通報(bào)，2013，19（3）：61-63.

[6] 李寧毅，李之璞.烯效唑在園藝植物上的應(yīng)用[J].北方園藝，2008（6）：62-64.

[7] 抗艷紅，許寅生，薛蓮珍，等.2種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)馬鈴薯生長(zhǎng)的影響[J].中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2012，28（15）：52-55.

[8] 余凱凱，姚滿生，高虹，等.不同生育期噴施多效唑?qū)︸R鈴薯產(chǎn)量及品質(zhì)的影響[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，42（26）：8904-8906.

[9] 秦成萌，楊延杰，林多.植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)不同蘿卜品種抽薹效應(yīng)的影響[J].吉林農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，38（5）：77-78，85.

[10] Maximum Residue Limits （MRLs） List of Agricultural Chemicals in Foods[DB/OL]. http：//www.m5.ws001.squarestart.ne.jp/foundation/search.html. 2018-10-10.

[11] 中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部.GB2763-2016 食品國(guó)家安全標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量[S].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2016.

[12] 徐國(guó)鋒，聶繼云，李靜，等.GC/ECD測(cè)定葡萄中多效唑和烯效唑的殘留[J].農(nóng)藥，2014，53（10）：736-738.

[13] 趙健，楊挺，張歡，等.用氣相色譜法檢測(cè)白菜和黃瓜中多效唑的殘留量[J].江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2009，21（11）：104-105.

[14] 張敏，閆超杰，付海濱，等.固相萃取凈化-高效液相色譜測(cè)定水果中赤霉素、多效唑、烯效唑殘留量[J].食品與發(fā)酵工業(yè)，2014，40（2）：192-195.

[15] 邵金良，樊建麟，林濤，等.高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定果蔬中5種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑殘留[J].食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào)，2015（8）：3255-3261.

[16] 徐宜宏，蔣施，付海濱，等.蘋果、番茄、玉米中7種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)方法[J].農(nóng)藥，2014，53（2）：113-115.

[17] 姜楠，劉思潔，馬杰，等.QuEChERS法結(jié)合氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定果蔬中14種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2017，27（13）：1867-1871.

[18] 于紅，鹿毅，王靜靜，等.HPLC-MS/MS法測(cè)定水果中殘留的多效唑和烯效唑[J].新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，48（1）：187-193.

[19] 葉倩，黃健祥，孫玲，等.QuEChERS-超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定葉類蔬菜中5種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的殘留[J].農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào)，2017，19（5）：589-596.