炎性因子、嗜酸性粒細(xì)胞在變應(yīng)性鼻炎患兒中的水平變化及作用機(jī)制

金國(guó)松

(浙江省嵊州市人民醫(yī)院耳鼻咽喉科 嵊州 312400)

變應(yīng)性鼻炎(allergic rhinitis, AR)是一種由免疫球蛋白E(immunoglobulin E, IgE)介導(dǎo)的Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)性疾病，臨床表現(xiàn)為鼻癢、鼻塞、流清涕、打噴嚏等，病情反復(fù)且遷延難愈，與鼻竇炎、中耳炎、哮喘等疾病的發(fā)生息息相關(guān)[1]。近年來(lái)，兒童AR的發(fā)病率不斷升高，影響患兒的生活質(zhì)量[2]。有研究[3-4]發(fā)現(xiàn)，炎性因子及嗜酸性粒細(xì)胞(eosinophils, EOS)參與了AR的發(fā)病進(jìn)程，但針對(duì)AR患兒白細(xì)胞介素-25(interleukin-25, IL-25)、IL-33及EOS水平的研究較少。本研究以此為切入點(diǎn)，通過(guò)分析AR患兒外周血中IL-25、IL-33和EOS計(jì)數(shù)的水平變化及其臨床意義，為AR患兒的臨床治療提供參考。

1 資料與方法

1.1 資料 選取2017年3月～2018年3月在我院診斷且符合納入標(biāo)準(zhǔn)的59例AR患兒為研究對(duì)象，依據(jù)視覺(jué)模擬評(píng)分(visual analogue scale, VAS)對(duì)鼻塞、鼻癢、打噴嚏、流涕、流淚、眼癢、充血、腫脹這8個(gè)癥狀進(jìn)行評(píng)分，將0～5分的患兒納入輕度組(n=27)，6～10分的患兒納入重度組(n=32)。選取同時(shí)期參與體檢的28例健康兒童為對(duì)照組。輕度組男性15例、女性12例，平均年齡為(12.28±2.05)歲，平均體重指數(shù)(body mass index, BMI)為(21.05±4.11)kg/m2；重度組男性18例、女性14例，平均年齡為(12.85±2.33)歲，BMI為(21.16±4.17)kg/m2；對(duì)照組男性16例、女性12例，平均年齡為(12.52±2.19)歲，平均BMI為(21.11±4.23)kg/m2。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過(guò)，所有研究對(duì)象及其監(jiān)護(hù)人均知情同意。各組研究對(duì)象的性別、年齡、BMI等一般資料差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性(P>0.05)。

病例納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患兒均經(jīng)抽血檢測(cè)或皮膚點(diǎn)刺試驗(yàn)確診為AR，且至少存在一項(xiàng)變應(yīng)原(+++)。病例排除標(biāo)準(zhǔn)：合并存在萎縮性鼻炎、鼻竇炎、鼻息肉等其他鼻部疾病者。

1.2 方法

1.2.1 變應(yīng)原檢測(cè) 采用MAST型變應(yīng)原檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)戶塵螨、蟑螂等35種變應(yīng)原，各類變應(yīng)原均采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)。采用免疫印跡法測(cè)定血清變應(yīng)原特異性免疫球蛋白E(specific immunoglobulin E, SIgE)水平，所有操作均嚴(yán)格按照說(shuō)明書規(guī)定進(jìn)行。

1.2.2 炎性因子及EOS水平測(cè)定 抽取所有研究對(duì)象空腹?fàn)顟B(tài)下靜脈血4 mL，靜置30 min，于3 000轉(zhuǎn)/min離心10 min，取上層血清，置于-80 ℃環(huán)境中保存待檢。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)所有血清中的IL-25及IL-33水平，所有操作均按照說(shuō)明嚴(yán)格進(jìn)行。統(tǒng)計(jì)所有血清中的EOS計(jì)數(shù)，比較各組的炎性因子(IL-25、IL-33)水平及EOS計(jì)數(shù)水平。

2 結(jié)果

2.1 3組研究對(duì)象炎性因子及EOS水平比較 輕度組、重度組患兒的IL-25、IL-33水平均明顯高于對(duì)照組(P<0.05)，且重度組明顯高于輕度組(P<0.05)；重度組患兒的EOS計(jì)數(shù)水平明顯高于輕度組和對(duì)照組(P<0.05；表1)。

2.2 AR與炎性因子及EOS的相關(guān)性 Spearman相關(guān)性分析顯示，AR與患兒IL-25、IL-33及EOS水平呈正相關(guān)(r=0.765，0.855，0.863，P<0.05)。

表1 3組研究對(duì)象炎性因子、EOS水平比較()

注：a示與對(duì)照組比較，P<0.05；b示與輕度組比較，P<0.05

3 討論

近年來(lái)，AR的發(fā)病率逐年升高，多數(shù)患者在兒童時(shí)期便已確診為AR，若不及時(shí)治療則易出現(xiàn)變應(yīng)性哮喘、分泌性中耳炎及鼻息肉等并發(fā)癥，影響患兒生長(zhǎng)發(fā)育，因此AR患兒的臨床治療尤為重要。有研究[5]發(fā)現(xiàn)，炎性細(xì)胞及炎性因子在AR的發(fā)生、發(fā)展中扮演著重要角色，但針對(duì)患兒血清IL-25、IL-33水平變化的研究較少。本研究旨在分析AR患兒外周血中IL-25、IL-33和EOS計(jì)數(shù)的水平變化及其臨床意義，為AR患兒的合理干預(yù)提供參考。

通常認(rèn)為Th1/Th2失衡是AR的主要發(fā)病機(jī)制[6]。IL-25和IL-33均屬于Th2產(chǎn)生的炎性因子，其中，IL-25是Th2細(xì)胞免疫應(yīng)答的趨化因子，可調(diào)節(jié)黏膜免疫反應(yīng)，促進(jìn)免疫應(yīng)答與Th2細(xì)胞分化，加劇變態(tài)反應(yīng)和Th2細(xì)胞過(guò)敏反應(yīng)[7-8]；IL-33可通過(guò)誘導(dǎo)IL-4和IL-5表達(dá)促進(jìn)Th2細(xì)胞因子及趨化因子的產(chǎn)生，致使炎癥的發(fā)生。本研究結(jié)果顯示，輕度AR患兒和重度AR患兒的IL-25和IL-33水平均明顯高于健康兒童，且重度AR患兒的各指標(biāo)水平明顯高于輕度AR患兒，進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，IL-25、IL-33水平均與AR呈正相關(guān)。這是因?yàn)?，IL-25可通過(guò)激活絲裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase, MAPK)、核轉(zhuǎn)錄因子-κB(nuclear factor kappa B, NF-κB)及應(yīng)激活化蛋白激酶(stress-activated protein kinase, SAPK)等細(xì)胞因子的轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，激活炎性因子及炎性遞質(zhì)的釋放，增加氣道炎性反應(yīng)，誘導(dǎo)AR的發(fā)生[9]；同時(shí)可通過(guò)IL-13作用于上皮細(xì)胞，誘發(fā)鼻黏膜損傷、鼻甲肥大及呼吸道重構(gòu)，使鼻腔更為狹窄，加重AR患兒臨床癥狀。IL-33則可通過(guò)結(jié)合ST2，激活MAPK和NF-κB，促進(jìn)幼稚T細(xì)胞轉(zhuǎn)化為Th2細(xì)胞因子，誘導(dǎo)Th2細(xì)胞聚集在鼻黏膜，釋放炎性因子參與AR的發(fā)生[10]。此外Th2細(xì)胞也可反向促進(jìn)IL-33的分泌與釋放，加速AR的疾病進(jìn)展。輕度AR患兒雖然癥狀輕微，但體內(nèi)IL-25和IL-33水平明顯高于健康兒童，提示我們?cè)谂R床工作中不可忽略輕度AR患兒的治療。通過(guò)及時(shí)有效治療輕度AR患兒，降低其體內(nèi)炎性因子水平，調(diào)節(jié)機(jī)體免疫平衡，進(jìn)而有效緩解病情，從而降低輕度AR患兒進(jìn)展為重度AR患兒的概率，這對(duì)AR患兒的臨床治療有一定指導(dǎo)作用。

EOS是人體固有的一類免疫細(xì)胞，功能多樣，常見于變應(yīng)性疾病、感染性疾病、寄生蟲病等多種疾病，其計(jì)數(shù)水平變化對(duì)患者的診斷及預(yù)后有重要指導(dǎo)意義。有研究[11]發(fā)現(xiàn)，EOS計(jì)數(shù)的增加是AR的特征性變化。本研究結(jié)果顯示，AR與患兒EOS水平呈正相關(guān)。這是因?yàn)椋琁L-25可通過(guò)IL-5聚集EOS，抑制EOS細(xì)胞凋亡，致使EOS浸潤(rùn)的發(fā)生；IL-33可通過(guò)誘導(dǎo)Th2細(xì)胞的分泌，間接誘導(dǎo)EOS的增殖與活化。同時(shí)，IL-33還可促進(jìn)ST2受體的增加，IL-33與EOS表面ST2受體結(jié)合后，經(jīng)過(guò)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，可促進(jìn)EOS在鼻黏膜的聚集，提高血清EOS水平。另外，本研究發(fā)現(xiàn)，輕度AR患兒的EOS水平與健康兒童無(wú)明顯差異，但重度AR患兒的EOS水平與健康兒童差異明顯，表明隨著IL-25和IL-33水平的升高，EOS水平也會(huì)發(fā)生一定程度的升高。因此，臨床上一方面可通過(guò)檢測(cè)AR患兒炎性因子與EOS水平判斷患兒疾病進(jìn)展程度；另一方面可依據(jù)炎性因子及EOS水平展開相應(yīng)免疫治療，進(jìn)而改善患兒臨床癥狀，提高AR患兒臨床療效。

綜上所述，炎性因子和EOS在AR患兒中的水平變化明顯，對(duì)AR患兒的臨床治療有一定指導(dǎo)作用。但由于研究時(shí)間的限制，本研究并未動(dòng)態(tài)全面追蹤AR患兒炎性因子及EOS的變化趨勢(shì)，這也將成為我們下一階段的研究重點(diǎn)。