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    同母異父雙胞胎親子鑒定1例

    2019-05-27 02:49:20楊澤登蘭玲梅謝平麗肖俊新孟凡明劉艷芳孫淑樂扎拉嘎白乙拉
    法醫(yī)學(xué)雜志 2019年2期
    關(guān)鍵詞:基因座同胞分型

    楊澤登,蘭玲梅,謝平麗,肖俊新,孟凡明,劉艷芳,孫淑樂,扎拉嘎白乙拉

    (1.中南大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院法醫(yī)學(xué)系,湖南 長沙 410013;2.中南大學(xué)湘雅司法鑒定中心,湖南 長沙 410013)

    1 案 例

    1.1 簡要案情

    某年7月,本鑒定中心受當(dāng)事人孔某文的委托,受理了孔某文及其雙胞胎孩子孔某萌(女)和孔某祥(男)有無血緣關(guān)系的案件。采集孔某文、孔某萌和孔某祥的血樣進行STR基因座分型檢測。

    1.2 檢驗方法

    1.2.1 DNA提取

    使用常規(guī)的Chelex-100法提取DNA[1]。

    1.2.2 常染色體STR基因座檢測

    采用Goldeneye?DNA身份鑒定系統(tǒng)20A[基點認(rèn)知技術(shù)(北京)有限公司]對上述3個血樣提取的DNA進行19個常染色體STR基因座和Amelogenin性別基因座的分型檢測。采用Goldeneye?DNA身份鑒定系統(tǒng)22NC[基點認(rèn)知技術(shù)(北京)有限公司]進行20個常染色體非CODIS STR基因座、1個常染色體CODIS STR基因座(D3S1358)和Amelogenin性別基因座的分型檢測。擴增體系均為10μL,擴增程序按相關(guān)試劑盒說明書進行,擴增反應(yīng)在9700型PCR儀(美國AB公司)上進行。擴增產(chǎn)物應(yīng)用3130xl基因分析儀(美國AB公司)電泳檢測之后,應(yīng)用GeneMapper?IDv3.2軟件進行數(shù)據(jù)分析。

    1.2.3 X-STR基因座檢測

    采用Goldeneye?DNA身份鑒定系統(tǒng)17X[基點認(rèn)知技術(shù)(北京)有限公司]檢測孔某文和孔某萌X染色體上17個X-STR基因座的分型。依據(jù)試劑盒說明書進行擴增、電泳和結(jié)果分析。

    1.2.4 同胞關(guān)系指數(shù)的計算

    采用ITO法[2-4]計算孔某萌和孔某祥間的全同胞指數(shù)(full sibling index,F(xiàn)SI)、半同胞指數(shù)(half sibling index,HSI)以及全同胞指數(shù)與半同胞指數(shù)的比值(FSI∶HSI)。

    1.3 檢測結(jié)果

    1.3.1 Goldeneye?DNA身份鑒定系統(tǒng)20A的檢測結(jié)果

    經(jīng)Goldeneye?DNA身份鑒定系統(tǒng)20A檢測,19個常染色體STR基因座和Amelogenin性別基因座的分型結(jié)果見表1。從表1可知:19個常染色體STR基因座中,孔某文和孔某萌在11個基因座(D19S433、D18S51、D6S1043、D3S1358、D7S820、D16S539、CSF1PO、Penta D、Penta E、D2S1338、FGA)的分型結(jié)果不符合孟德爾遺傳定律,經(jīng)計算,累積父權(quán)指數(shù)(combined paternity index,CPI)<10-30,不支持孔某文作為孔某萌的生物學(xué)父親;對于孔某文和孔某祥,19個常染色體STR基因座的分型結(jié)果均符合孟德爾遺傳定律,且CPI>10000(CPI=7581647.86),支持孔某文作為孔某祥的生物學(xué)父親。

    1.3.2 Goldeneye?DNA身份鑒定系統(tǒng)22NC的檢測結(jié)果

    三人的血樣采用Goldeneye?DNA身份鑒定系統(tǒng)22NC檢測后,21個常染色體STR基因座和Amelogenin性別基因座的分型結(jié)果見表2。從表2可知:孔某文和孔某萌的檢測結(jié)果中,除了與Goldeneye?DNA身份鑒定系統(tǒng)20A檢測的相同基因座D3S1358的基因分型不符合孟德爾遺傳定律外,還有9個常染色體STR基因座(D15S659、D14S608、D3S1744、D2S441、D18S535、D10S1435、D11S2368、D19S253、D10S1248)的分型結(jié)果不符合孟德爾遺傳定律,經(jīng)計算,該22NC系統(tǒng)的CPI為1.028 9×10-25,不支持孔某文作為孔某萌的生物學(xué)父親;對于孔某文和孔某祥,該檢測系統(tǒng)的基因分型結(jié)果表明,所有基因座的分型結(jié)果均符合孟德爾遺傳定律(CPI=419 736.75),明確支持孔某文作為孔某祥的生物學(xué)父親。

    表1 三人血樣經(jīng)Goldeneye?DNA身份鑒定系統(tǒng)20A檢測的結(jié)果

    表2 三人血樣經(jīng)Goldeneye?DNA身份鑒定系統(tǒng)22NC檢測的結(jié)果

    1.3.3 Goldeneye?DNA身份鑒定系統(tǒng)17X的檢測結(jié)果

    經(jīng)Goldeneye?DNA身份鑒定系統(tǒng)17X檢測孔某文和孔某萌在X染色體上的基因分型,結(jié)果見表3。孔某文和孔某萌在8個STR基因座(DXS6795、DXS8378、HPRTB、GATA165B12、DXS6807、DXS6803、DXS10134、DXS10159)上未檢見相同的等位基因。

    表3 孔某文和孔某萌的血樣經(jīng)Goldeneye?DNA身份鑒定系統(tǒng)17X檢測的結(jié)果

    1.3.4 同胞指數(shù)計算結(jié)果

    采用ITO法對Goldeneye?DNA身份鑒定系統(tǒng)20A和Goldeneye?DNA身份鑒定系統(tǒng)22NC共39個常染色體STR基因座的FSI、HSI和FSI∶HSI值進行計算,結(jié)果見表4。其中,HSI值明顯大于19,F(xiàn)SI∶HSI值明顯小于1,傾向于支持孔某萌和孔某祥為半同胞關(guān)系。

    表4 ITO法計算孔某萌和孔某祥間同胞關(guān)系的結(jié)果

    2 討 論

    本研究采用Goldeneye?DNA身份鑒定系統(tǒng)20A對被檢父親(孔某文)與異卵雙胞胎姐弟(孔某萌和孔某祥)進行親子鑒定,發(fā)現(xiàn)孔某文和孔某萌在11個常染色體STR基因座的分型結(jié)果不符合孟德爾遺傳定律,而孔某文與孔某祥在所有基因座的分型結(jié)果均符合孟德爾遺傳定律。因母親樣本缺失,所以本研究又采取了Goldeneye?DNA身份鑒定系統(tǒng)22NC進行了補充檢驗。最終兩次檢測結(jié)果均不支持孔某文作為孔某萌的生物學(xué)父親,支持孔某文作為孔某祥的生物學(xué)父親。由于父女之間X染色體上的STR基因座以單倍型的形式遺傳,檢測X-STR基因座在父女遺傳關(guān)系的鑒定中可以提供有效的認(rèn)定或排除信息,具有獨特的優(yōu)勢,故本研究采用Goldeneye?DNA身份鑒定系統(tǒng)17X檢測孔某文和孔某萌的17個X-STR基因座,結(jié)果表明,孔某文和孔某萌的X-STR基因座分型結(jié)果不符合X染色體遺傳定律。

    此外,在全同胞-半同胞的鑒定中,F(xiàn)SI與HSI的比值是較合適的定量指標(biāo)[5]。依據(jù)陸惠玲等[3]以常染色體STR基因座為基礎(chǔ)建立的同胞關(guān)系判定規(guī)則,即以 FSI∶HSI≥1 與 FSI∶HSI<1 分別作為全同胞和半同胞的判定標(biāo)準(zhǔn),以HSI≥19與HSI≤1分別作為半同胞和無關(guān)個體的判定標(biāo)準(zhǔn)。本例通過ITO法計算孔某萌和孔某祥的同胞關(guān)系指數(shù),結(jié)果表明,HSI值明顯大于19,F(xiàn)SI∶HSI值明顯小于1,傾向于支持孔某萌和孔某祥為半同胞關(guān)系。結(jié)合常染色體和X-STR基因座的檢測結(jié)果及案情,支持孔某萌和孔某祥為同母異父雙胞胎親緣關(guān)系。

    雙胞胎可以分為兩類,即同卵雙生子和異卵雙生子。同卵雙生子是由一個相同的受精卵分裂而來,雙生子的基因組DNA完全一致;異卵雙生子是由兩個卵子幾乎同時發(fā)生受精作用產(chǎn)生,雙生子的基因組DNA并不完全一致。雙胞胎的發(fā)生率很低,為1%~3%[6],而異卵雙生子的發(fā)生概率更低。據(jù)WENK等[7]報道,在13 000例雙胞胎親子鑒定案件中,只有1例案件的鑒定結(jié)果是同母異父雙胞胎;據(jù)JAMES[8]報道,在美國,每400對雙胞胎中只有一對雙胞胎的母親發(fā)生異父同期復(fù)孕。本案例中異卵雙生同母異父的情況非常罕見,近年來國內(nèi)只有個別相關(guān)案例的報道[9-10]。同母異父雙胞胎情況的發(fā)生,是由于育齡女性在排卵日一次排出兩個或者連續(xù)排出兩個成熟的卵子,且在24 h內(nèi)該育齡女性與兩名男子發(fā)生性關(guān)系,導(dǎo)致兩個卵子分別與兩名男性的精子發(fā)生了受精作用,故而出現(xiàn)異卵雙生的情況。本案例中,孩子生母承認(rèn)在排卵期間曾與另一名男子發(fā)生過性關(guān)系。這種案件很罕見,故在進行親子鑒定時應(yīng)當(dāng)謹(jǐn)慎,如果被檢父親與女兒之間不符合孟德爾遺傳定律,建議加做X染色體遺傳標(biāo)記,如果被檢父親與兒子之間不符合孟德爾遺傳定律,則建議加做Y染色體遺傳標(biāo)記。

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