綠茶水雙向調(diào)節(jié)離體家兔小腸平滑肌收縮活動

杜軍霞 武宇紅 朱秀敏 晉 思

（邢臺學(xué)院，河北 邢臺 054001）

綠茶在我國已有上千年歷史，在我國被譽(yù)為“國飲”。綠茶屬于非發(fā)酵茶，含有多種營養(yǎng)物質(zhì)并具有抗氧化、防治腫瘤、抗病毒等多種功能[1-4]。然而綠茶對于消化道生理功能的作用尚未明確結(jié)論。本研究以家兔離體小腸平滑肌為實驗對象，從消化生理角度研究綠茶對消化道功能的影響，并對其可能的作用機(jī)制進(jìn)行初步探討。

1 材料與方法

1.1 藥品及儀器：龍井綠茶（8.3 g龍井，加入100 mL的80 ℃熱水中，電爐加熱6 min，用紗布過濾綠茶水作為原液備用）、臺氏液、10 mg/mL組胺（合肥博美生物科技有限公司，ZH4251）、1 mg/mL鹽酸腎上腺素（天津金耀氨基酸有限公司，國藥準(zhǔn)字H12020526）、BL-420F生物功能實驗系統(tǒng)和恒溫平滑肌槽（均為成都泰盟軟件有限公司生產(chǎn)）。組胺和鹽酸腎上腺素均用臺式液配制。

1.2 家兔離體小腸平滑肌制備：健康家兔，雌雄不限，體質(zhì)量2～3 kg，購于河北醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心。實驗前禁食24 h，飲水不限，實驗時用木棍擊打兔頭部待其死亡后立即放到解剖盤中切開腹部，迅速找到空腸并剪取20～30 cm的腸段，將腸段放在盛有預(yù)冷臺式液的培養(yǎng)皿中，快速沖洗小腸內(nèi)容，將空腸剪成2～3 cm的腸段作為標(biāo)本[5-6]。

1.3 離體小腸平滑肌收縮活動的記錄：將標(biāo)本的一端固定于恒溫水浴槽的掛鉤上，另一端通過張力換能器連接BL-420生物信號采集系統(tǒng)，記錄收縮活動的幅度，待活動穩(wěn)定后給藥。

2 結(jié) 果

2.1 正常小腸平滑肌收縮曲線：在37 ℃的臺氏液條件下，收縮曲線顯示小腸平滑肌的收縮幅度、收縮頻率都較穩(wěn)定，在正常狀態(tài)下的波形無明顯變化（圖1）。

圖1 正常家兔小腸平滑肌的收縮曲線

2.2 不同濃度綠茶水對小腸平滑肌收縮幅度的影響：離體小腸平滑肌條在37 ℃的臺式液中收縮穩(wěn)定，加入不同終濃度的綠茶水溶液并觀察平滑肌條的收縮幅度變化。結(jié)果顯示，終濃度為1%的綠茶水（LGW）引起平滑肌條收縮強(qiáng)度逐漸增大，加藥后3 min左右波幅由（1.52±0.36）g逐漸增加至（2.04±0.57）g，與加藥前相比具有極顯著性差異（P＜0.01）（表1、圖2）。而2.5%綠茶水（MGW）、5%綠茶水（HGW）對離體小腸平滑肌收縮活動表現(xiàn)出先短暫增強(qiáng)、后抑制的效應(yīng)，且抑制效應(yīng)隨濃度加大而增加（表1、圖3、圖4）。結(jié)果顯示，在加入MGW后約1 min時平滑肌條收縮幅度由基礎(chǔ)值（2.46±0.49）升高至（3.47±0.54）g，隨后趨于平穩(wěn)，3 min時收縮幅度降低至（2.01±0.45）g，與加藥前相比具有顯著性差異（P＜0.05）；加入HGW后平滑肌收縮幅度由（2.11±0.84）g升高至1 min時（3.17±1.40）g，之后明顯降低至3 min時（1.02±0.52）g，與加藥前相比具有極顯著性差異（P＜0.01）（表1）。

表1 不同濃度綠茶水對家兔小腸平滑肌收縮幅度的影響（±s）

表1 不同濃度綠茶水對家兔小腸平滑肌收縮幅度的影響（±s）

注：* P＜ 0.05，** P＜ 0.01

綠茶水濃度(%)用藥前平滑肌收縮波幅(g)用藥后1 min收縮波幅(g)用藥后3 min收縮波幅(g)1% (n=6) 1.52±0.36 1.85±0.53* 2.04±0.57**2.5% (n=4) 2.46±0.49 3.47±0.54* 2.01±0.45*5% (n=7) 2.11±0.84 3.17±1.40** 1.02±0.52**

圖2 加入LGW后小腸平滑肌收縮曲線變化

2.3 不同濃度綠茶水對小腸平滑肌收縮頻率的影響：該部分結(jié)果見表2。結(jié)果顯示，LGW對小腸平滑肌收縮頻率幾乎沒有影響（P＞0.05），而 MGW、HGW組小腸平滑肌收縮的頻率顯著下降，下降程度與綠茶水濃度呈正相關(guān)，與對照組相比分別具有顯著差異（P＜0.05）和極顯著差異（P＜0.01）。加藥后1 min左右，平滑肌條的收縮頻率并未出現(xiàn)波動現(xiàn)象，而是持續(xù)降低，于加藥后2 min內(nèi)趨于平穩(wěn)，這一點與綠茶水對平滑肌條收縮波幅的影響不同（表2）。

表3 腎上腺素作用下綠茶水對家兔小腸平滑肌收縮幅度的影響（±s）

表3 腎上腺素作用下綠茶水對家兔小腸平滑肌收縮幅度的影響（±s）

注：*** ：加腎上腺素后與用藥前相比P＜ 0.001；##：加LGW后與加腎上腺素后相比P＜0.01

用藥前收縮波幅(g) 加腎上腺素后收縮波幅(g) 加LGW后收縮波幅(g)2.26±0.49 1.34±0.61*** 1.91±0.50##

表4 LGW增強(qiáng)組胺對家兔小腸平滑肌收縮幅度的促進(jìn)作用（±s）

表4 LGW增強(qiáng)組胺對家兔小腸平滑肌收縮幅度的促進(jìn)作用（±s）

注：** ：加組胺后與加組胺前相比P＜0.01； ##：加綠茶水后與加組胺后相比P＜0.01

綠茶水濃度(%) 正常收縮波幅(g) 加組胺后收縮波幅(g) 加綠茶水后收縮波幅(g)1% (n=6) 1.52±0.32 2.24±0.53** 2.97±0.73##

圖3 加入HGW后小腸平滑肌收縮曲線變化

圖4 加入HGW后小腸平滑肌收縮曲線變化

表2 不同濃度綠茶水對家兔小腸平滑肌收縮頻率的影響（±s）

表2 不同濃度綠茶水對家兔小腸平滑肌收縮頻率的影響（±s）

注：* P＜ 0.05，** P＜ 0.01

綠茶水濃度(%)用藥前收縮頻率(次/分)用藥后1 min收縮頻率(次/分)用藥后3 min收縮頻率(次/分)1%(n=6) 10.17±0.98 9.68±1.54 9.50±1.22 2.5% (n=4) 14.75±1.90 12.88±2.14 13.00±2.16*5%(n=7) 11.86±1.57 9.17±2.13** 7.00±2.00**

2.4 LGW挽救腎上腺素對小腸平滑肌收縮的抑制作用：臺式液中加入終濃度為10-4 g/L的腎上腺素，引起平滑肌條的收縮波幅由（2.26±0.49）g立刻降低至（1.34±0.61）g，與用藥前相比，具有極顯著性差異（P＜0.001），在此基礎(chǔ)上加入LGW，則平滑肌條的收縮波幅明顯回增，增加至（1.91±0.50）g，與加腎上腺素后收縮波幅相比，具有極顯著性差異（P＜0.01）（表3、圖5）?；卦龇燃s為用藥前正常波幅的84.4%，說明LGW對腎上腺素具有拮抗作用。

圖5 腎上腺素作用下加LGW后小腸平滑肌收縮曲線變化

2.5 LGW與組胺協(xié)同促進(jìn)小腸平滑肌收縮：向臺式液中加入終濃度為1.5×10-4g/L的組胺能夠引起平滑肌條收縮波幅顯著增加（表4、圖6），在此基礎(chǔ)上，LGW引起平滑肌條收縮活動繼續(xù)增強(qiáng)，波幅由（2.24±0.53）g增至（2.97±0.73）g，與加組胺后波幅相比，具有極顯著性差異（P＜0.01）。

3 討 論

圖6 組胺作用下加LGW后小腸平滑肌收縮曲線變化

不同種類的茶對于消化道的作用不同[1-3]，但是關(guān)于不同濃度綠茶對于消化系統(tǒng)的綜合作用研究較少，目前結(jié)論不明。本研究從消化系統(tǒng)生理功能角度對綠茶水進(jìn)行了實驗，結(jié)果表明，綠茶水對于消化道平滑肌的收縮活動有顯著影響，有趣的是，其效應(yīng)因濃度不同而不同。在一定濃度范圍內(nèi)，綠茶水對小腸平滑肌條收縮活動表現(xiàn)出顯著的抑制作用（表1、表2），這與其他一些研究結(jié)論相符[1]，說明喝濃茶的確會抑制消化道的機(jī)械性運(yùn)動，影響食物的消化吸收。然而，當(dāng)綠茶水終濃度降低至一定程度（本實驗中為1%）時，則表現(xiàn)出對小腸平滑肌條收縮強(qiáng)烈的促進(jìn)作用，主要體現(xiàn)在平滑肌條的收縮幅度上，對于收縮頻率影響不大（表2），這一結(jié)果與Kim等在培養(yǎng)的Cajal細(xì)胞上的研究結(jié)論相符[2-4]。上述結(jié)果表明，綠茶水中存在重要的活性物質(zhì)，能夠促進(jìn)胃腸道蠕動，并且在濃度較低時作用明顯，隨著濃度增加，其作用會被綠茶中其他活性物質(zhì)削弱甚至翻轉(zhuǎn)，但這一促進(jìn)蠕動作用的活性物質(zhì)成分是什么？需要進(jìn)一步研究確定。

組胺是一種能使支氣管、胃腸平滑肌強(qiáng)烈收縮的生物胺，通過激動胃腸平滑肌上的H1受體，進(jìn)而增強(qiáng)平滑肌的收縮[5]。腎上腺素為腎上腺髓質(zhì)分泌的一種激素，腎上腺素通過興奮α受體和β受體，降低平滑肌的收縮。結(jié)果顯示，LGW能協(xié)同促進(jìn)組胺對家兔離體小腸平滑肌收縮的促進(jìn)作用（表4），拮抗腎上腺素對家兔離體小腸平滑肌收縮的抑制作用（表3），提示低濃度綠茶水這種作用可能通過競爭性拮抗腎上腺素與其受體的結(jié)合而實現(xiàn)，而是否與H1受體途徑相關(guān)還有待進(jìn)一步研究。高濃度的綠茶水對小腸平滑肌的抑制作用很可能與其中的茶多酚、茶堿或鞣酸等物質(zhì)相關(guān)，作用機(jī)制可能與拮抗乙酰膽堿作用、鈣流失衡等因素有關(guān)[2,6]。

由此可知，綠茶水對于消化道作用不可一概而論，低濃度綠茶水能夠促進(jìn)小腸平滑肌收縮活動，具有一定的促消化作用，該作用可能與腎上腺素受體途徑相關(guān)。較高濃度綠茶水則對小腸機(jī)械活動表現(xiàn)出抑制作用，且呈劑量依賴性。上述作用的活性物質(zhì)以及作用機(jī)制具體如何，仍待進(jìn)一步研究。