兩廠家新城疫疫苗免疫效果試驗(yàn)

李文淼

本試驗(yàn)選用未免疫過雞新城疫疫苗的7日齡蛋雛雞，分為A、B組，每組500只。A組免疫雞新城疫活疫苗（Clone30株）;B組免疫雞新城疫活疫苗（VG/GA株）;免疫后每隔半個(gè)月采集血樣一次，用HI的方法進(jìn)行樣品抗體的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。結(jié)論如下：A廠家生產(chǎn)的雞新城疫活疫苗（Clone30株）與B廠家生產(chǎn)的雞新城疫活疫苗（VG/GA株）相比，能產(chǎn)生更高的免疫抗體滴度且免疫抗體產(chǎn)生更快、持續(xù)時(shí)間更長。

雞新城疫是一種具有高度傳染性的病毒性疾病，發(fā)病率和死亡率在90%以上。合理的選擇ND疫苗將有利于減少和防止免疫失敗的發(fā)生，進(jìn)而提高ND疫苗免疫效果。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

1.1.1.試驗(yàn)地點(diǎn)及試驗(yàn)動(dòng)物篩選

大興區(qū)某雞場(chǎng)試驗(yàn)雞舍。

大興區(qū)某雞場(chǎng)孵化的一周齡海蘭蛋雞1000只。雞只臨床檢查健康，均未免疫過雞新城疫疫苗。

1.1.2試驗(yàn)疫苗

試驗(yàn)用兩種疫苗均由大興區(qū)某雞場(chǎng)提供。

雞新城疫活疫苗（Clone30株），生產(chǎn)廠家：A廠家;規(guī)格：500羽份/瓶。

雞新城疫活疫苗（VG/GA株），生產(chǎn)廠家：B廠家;規(guī)格：1000羽份/瓶。

1.1.3試驗(yàn)材料及試劑配制

儀器：高壓滅菌器、離心機(jī)、96孔V型微量凝集試驗(yàn)板、微量吸液器等。

試劑：

（1）標(biāo)準(zhǔn)抗原;

（2）稀釋液：高壓滅菌生理鹽水;

（3）1%紅細(xì)胞液;

（4）紅細(xì)胞保存液;

（5）待檢血清：將被檢雞群編號(hào)登記，用消毒過的干燥注射器采血，注入潔凈干燥試管內(nèi)，在室溫中靜置或離心，待血清析出后使用。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1試驗(yàn)分組

試驗(yàn)雞隨機(jī)分為A、B組，每組500只;分別在相對(duì)隔離、條件相同的環(huán)境下飼養(yǎng)，直到試驗(yàn)結(jié)束。

A組：免疫A廠家雞新城疫活疫苗（Clone30株），首次免疫日期為4月7日（試驗(yàn)雞根據(jù)免疫程序免疫，7日齡時(shí)首免，21日齡進(jìn)行第二次免疫，免疫方式為滴鼻點(diǎn)眼）。

B組：免疫B廠家雞新城疫活疫苗（VG/GA株），首次免疫日期為4月7日（試驗(yàn)雞免疫程序同A組）。

1.2.2試驗(yàn)采血稱重計(jì)劃

采血計(jì)劃：每組在免疫后0、14、28、42、56、70、84、98天隨機(jī)采集20只雞血清。

稱重計(jì)劃：每組在7日齡和105日齡分別計(jì)算平均體重。稱重的同時(shí)檢查雞群的均勻度。

1.2.3雞新城疫抗體檢測(cè)

本試驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)采用雞新城疫血凝（HA）和血凝抑制（HI）抗體水平測(cè)定法

2結(jié)果與分析

2.1新城疫抗體檢測(cè)結(jié)果

根據(jù)試驗(yàn)采樣計(jì)劃，用HI進(jìn)行雞新城疫抗體監(jiān)測(cè)，記錄每次監(jiān)測(cè)的結(jié)果。

2.1.1試驗(yàn)雞免疫后抗體滴度動(dòng)態(tài)變化

結(jié)果表明：

A組抗體檢測(cè)均值在免疫后14天最低為4.15，之后逐漸升高，在免疫后28天上升到6.25，免疫后42天上升到8.35，而在免疫后56天達(dá)到峰值9.95，之后出現(xiàn)下降趨勢(shì)，免疫后70天下降到9.25，免疫后84天下降到8.65，免疫后98天下降到6.85。

B組抗體檢測(cè)均值在免疫后14天最低為3.75，之后逐漸升高，在免疫后28天上升到5.75，免疫后42天上升到7.95，而在免疫后56天達(dá)到峰值9.35，之后出現(xiàn)下降趨勢(shì)，免疫后70天下降到8.65，免疫后84天下降到8.05，免疫后98天下降到6.05。

A組疫苗免疫后抗體檢測(cè)均值在各個(gè)時(shí)期均高于B組。通過t檢驗(yàn)分析，結(jié)果A組與B組在每個(gè)階段都有極顯著的差異（p<0.01）。

2.1.2免疫后的增重情況

（1）兩組在7日齡、105日齡時(shí)分別空腹稱重。即7日齡時(shí)平均體重作為基礎(chǔ)體重，結(jié)果為A組：54.7g;B組：54.3g;在105日齡時(shí)稱重得出的平均體重為免疫后體重，結(jié)果為A組：875.5g;B組：869.7g。

結(jié)果表明：在7日齡和105日齡，A組平均體重均高于B組。A組的增重值也高于B組。通過t檢驗(yàn)分析，A組在105日齡的體重和增重值都顯著高于B組（P<0.05）。經(jīng)卡方檢驗(yàn)A組與B組的差異不顯著（P>0.05）。

3討論

本試驗(yàn)選擇在雛雞7日齡和21日齡分別免疫一次是因?yàn)殡r雞的母源抗體水平顯著地影響著新城疫疫苗的免疫效果。我們把母源抗體效價(jià)平均值降至log2為4時(shí)稱為免疫臨界線，如果雛雞HI抗體水平在4以上，免疫新城疫疫苗后7到10天，其HI抗體水平都會(huì)出現(xiàn)下降。母源抗體水平越高，免疫的新城疫抗體效價(jià)下降幅度越大，直至20日齡時(shí)才會(huì)有所好轉(zhuǎn)，但都不會(huì)高于原抗體水平。所以母源抗體水平低的雛雞，免疫接種新城疫疫苗10天后，其抗體均值會(huì)出現(xiàn)明顯上升，3周后稍有下降，但仍高于原水平。因此要適時(shí)接種疫苗。

4小結(jié)

（1）在整個(gè)試驗(yàn)過程中，分別對(duì)兩組雞的體重進(jìn)行監(jiān)測(cè)，得出結(jié)果即：試驗(yàn)A組的增重值明顯高于試驗(yàn)B組。

（2）在整個(gè)試驗(yàn)過程中，對(duì)兩組雞的抗體檢測(cè)結(jié)果顯示：試驗(yàn)A組在免疫后各階段的抗體滴度都高于試驗(yàn)B組。

（3）在本試驗(yàn)條件下，A廠家生產(chǎn)的雞新城疫活疫苗（Clone30株）與B廠家生產(chǎn)的雞新城疫活疫苗（VG/GA株）相比，能產(chǎn)生更高的免疫抗體滴度，且免疫抗體產(chǎn)生更快、持續(xù)時(shí)間更長。

（作者單位：102600北京市大興區(qū)動(dòng)物疾病控制中心）