新診斷輕度活動(dòng)的系統(tǒng)性紅斑狼瘡病人免疫及血管內(nèi)皮功能的改變研究

王寶安，楊愛(ài)成，黃澤

系統(tǒng)性紅斑狼瘡病人的動(dòng)脈粥樣硬化的患病率較正常人明顯增加，系統(tǒng)性紅斑狼瘡病人早期就可出現(xiàn)血管功能異常，研究結(jié)果表明，微血管損傷和功能障礙是系統(tǒng)性紅斑狼瘡相關(guān)心血管病理的一部分[1]，以往的研究也表明在系統(tǒng)性紅斑狼瘡病人中免疫系統(tǒng)積極參與動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成[2]，但其機(jī)制尚未明確。在傳統(tǒng)意義上，內(nèi)皮細(xì)胞功能失調(diào)是動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生的起始環(huán)節(jié)[3]，但是其在系統(tǒng)性紅斑狼瘡所致的動(dòng)脈粥樣硬化所起的作用尚未明確，本研究著重觀察新診斷輕度活動(dòng)的系統(tǒng)性紅斑狼瘡病人免疫及血管內(nèi)皮功能的改變，旨在探討新診斷輕度活動(dòng)的系統(tǒng)性紅斑狼瘡病人免疫功能的改變與血管內(nèi)皮功能改變的關(guān)系，為臨床治療提供新的思路。

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇2014年3月至2016年10月在江門市五邑中醫(yī)院腎病科住院治療的新診斷尚未開始治療的系統(tǒng)性紅斑狼瘡病人72例(SLE組)，其中男32例，女40例，年齡(29.32±6.74)歲。入選標(biāo)準(zhǔn)：符合1997年美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)修訂的SLE診斷標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)系統(tǒng)性紅斑狼瘡疾病活動(dòng)度評(píng)分(SLEDAI)為5～9分的輕度活動(dòng)病人。所有入選病人均排除泌尿系統(tǒng)急慢感染、血液系統(tǒng)疾病、急慢性腎炎、原發(fā)性高血壓、慢性腎病、腫瘤等。另選擇同期進(jìn)行健康體檢者30例作為對(duì)照組，其中男12例，女18例，年齡(27.36±5.63)歲。兩組的性別、年齡比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。本研究符合《世界醫(yī)學(xué)協(xié)會(huì)赫爾辛基宣言》相關(guān)要求,征得病人或其近親屬同意并簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1血標(biāo)本采集及測(cè)定 所有受檢者均采集空腹靜脈血標(biāo)本，酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)法 (ELISA)檢測(cè)血清中一氧化氮(NO)、內(nèi)皮素-1(ET-1)、γ-干擾素(IFN-γ)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)及白細(xì)胞介素4(IL-4)水平。采用免疫比濁法測(cè)定超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)表達(dá)水平。實(shí)驗(yàn)操作均按試劑盒說(shuō)明書嚴(yán)格執(zhí)行。

1.2.2肱動(dòng)脈血流介導(dǎo)的內(nèi)皮依賴性血管舒張功能(flow mediated vasodilation，F(xiàn)MD) 的測(cè)定 應(yīng)用高分辨率彩色超聲，同步記錄心電圖。在測(cè)定基礎(chǔ)值(D0) 后進(jìn)行反應(yīng)性充血試驗(yàn)，充氣加壓阻斷血流后再釋放時(shí)測(cè)肱動(dòng)脈內(nèi)徑(D1)。FMD 的變化用百分比表示，F(xiàn)MD=(D1-D0)/D0×100%。當(dāng)FMD<10%時(shí)定義為內(nèi)皮損害。

2 結(jié)果

2.1 兩組一般臨床特征比較兩組年齡、性別、總膽固醇(total cholesterol，TC)、三酰甘油(trigalloyl glycerol，TG)、低密度脂蛋白膽固醇(low density lipoprotein cholestorol，LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(high density lipoprotein cholesferol，HDL-C)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表1。

2.2 ET-1、NO、hs-CRP、IFN-γ、TNF-α、IL-4及FMD水平的比較SLE組病人中ET-1、hs-CRP、IFN-γ、TNF-α水平較對(duì)照組明顯升高，NO、FMD及IL-4水平下降,均差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表2。

2.3 相關(guān)性分析SLE組hs-CRP、IFN-γ、TNF-α水平不符合正態(tài)性檢驗(yàn)，故采用Spearman分析FMD與hs-CRP、IFN-γ、TNF-α水平的關(guān)系。FMD與hs-CRP、IFN-γ、TNF-α呈顯著的負(fù)相關(guān)(r=-0.37、-0.43、-0.40，P=0.035、0.008、0.017)。

表1 兩組一般臨床特征比較

表2 兩組ET-1、NO、hs-CRP、IFN-γ、TNF-α、IL-4及FMD水平的比較

3 討論

與正常人相比，系統(tǒng)性紅斑狼瘡病人的心血管疾病的發(fā)病率和病死率大幅度增加[4]。加速性動(dòng)脈粥樣硬化通常被認(rèn)為是導(dǎo)致系統(tǒng)性紅斑狼瘡病人早發(fā)性心血管疾病的主要原因[5]。在這一過(guò)程中，內(nèi)皮細(xì)胞的活化與動(dòng)脈粥樣硬化的免疫病理過(guò)程相關(guān)，而且在系統(tǒng)性紅斑狼瘡的慢性全身炎癥過(guò)程中，主要是血管內(nèi)皮損傷導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化風(fēng)險(xiǎn)增加[6]。本研究結(jié)果表明，新診斷的系統(tǒng)性紅斑狼瘡病人較正常人FMD下降，提示存在血管內(nèi)皮受損，這與Lima等[7]研究結(jié)果相同。同時(shí)我們也發(fā)現(xiàn)在系統(tǒng)性紅斑狼瘡病人中ET-1升高，NO下降。ET-1和NO主要由血管內(nèi)皮細(xì)胞合成與分泌，血漿中ET-1和NO水平反映血管內(nèi)皮細(xì)胞功能，ET-1和NO比例失衡反映存在血管內(nèi)皮受損或失調(diào)，而動(dòng)脈壁內(nèi)皮細(xì)胞受損導(dǎo)致動(dòng)脈壁炎癥是動(dòng)脈粥樣硬化的重要啟動(dòng)因素[8]。這些均表明在系統(tǒng)性紅斑狼瘡的早期即存在內(nèi)皮功能障礙，同時(shí)我們發(fā)現(xiàn)在新診斷的系統(tǒng)性紅斑狼瘡病人中hs-CRP水平明顯升高，同時(shí)與FMD呈負(fù)相關(guān)，表明新診斷的系統(tǒng)性紅斑狼瘡病人機(jī)體存在持續(xù)微炎癥狀態(tài)，內(nèi)皮功能障礙發(fā)生與炎癥密切相關(guān)。

Th1、Th2細(xì)胞是輔助性CD4+T細(xì)胞(Th細(xì)胞)的兩個(gè)重要亞群，Th1細(xì)胞分泌IFN-γ、TNF-α等，以輔助細(xì)胞免疫反應(yīng)；Th2細(xì)胞分泌IL-4等，以輔助體液免疫反應(yīng)[9]。正常時(shí)Th1/Th2處于動(dòng)態(tài)平衡，而在系統(tǒng)性紅斑狼瘡的發(fā)生、發(fā)展中Th1/Th2失衡起到了重要作用，不同時(shí)期，Th1、Th2優(yōu)勢(shì)各不相同。本研究結(jié)果顯示，在新診斷的系統(tǒng)性紅斑狼瘡病人血清中Th1細(xì)胞分泌因子明顯升高，Th2細(xì)胞分泌因子明顯下降，提示新診斷的系統(tǒng)性紅斑狼瘡病人存在向Th1細(xì)胞反應(yīng)的失衡。同時(shí)也發(fā)現(xiàn)IFN-γ、TNF-α與FMD成負(fù)相關(guān)，提示免疫異常參與了系統(tǒng)性紅斑狼瘡病人的血管內(nèi)皮功能障礙的發(fā)生、發(fā)展。在以往研究中TNF-α被認(rèn)為是一種促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化形成的炎性標(biāo)志物，但其作用的機(jī)制目前仍不十分明確，可能與以下相關(guān)：TNF-α通過(guò)內(nèi)部的核因子-κB和過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體-γ，上調(diào)LDL-C的轉(zhuǎn)運(yùn)，并截留穿過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞促進(jìn)血管壁內(nèi)低密度脂蛋白顆粒[10]。而IFN-γ則在動(dòng)脈粥樣病變中高表達(dá)，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡，上調(diào)黏附分子水平促進(jìn)白細(xì)胞的募集[11]。

綜上所述，在新診斷的輕度活動(dòng)的系統(tǒng)性紅斑狼瘡病人中即存在內(nèi)皮功能障礙，其發(fā)生與炎癥密切相關(guān)，同時(shí)Th1和Th2兩類細(xì)胞因子的失衡參與了系統(tǒng)性紅斑狼瘡所致的內(nèi)皮功能障礙的發(fā)生。但本研究仍有局限性，研究對(duì)象均為新診斷的輕度活動(dòng)的系統(tǒng)性紅斑狼瘡者，且樣本例數(shù)相對(duì)較少，需要進(jìn)一步擴(kuò)大范圍和數(shù)量。