女性膀胱過度活動(dòng)癥患者尿液中腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子的表達(dá)及意義

張杰，潘永軍

(重慶市第九人民醫(yī)院泌尿外科，重慶 400700)

膀胱過度活動(dòng)癥(overactive bladder，OAB)為以尿急為表現(xiàn)特征的癥狀群，在我國的發(fā)病率高[1]。患者常有夜尿、尿頻癥狀，有時(shí)還伴有急迫性尿失禁，尿流動(dòng)力學(xué)上表現(xiàn)出逼尿肌的過度活動(dòng)[2]。目前，臨床上尚缺乏準(zhǔn)確、客觀、實(shí)用的檢測(cè)方法對(duì)OAB作出診斷和療效評(píng)估，診斷主要是根據(jù)患者的主訴與癥狀，通過完善相關(guān)檢查除外其它疾病進(jìn)行排除性診斷。腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(brain-derived neurotrophic factor，BDNF)的生成主要是小型到中型的各種肽能神經(jīng)細(xì)胞，非神經(jīng)細(xì)胞也可以產(chǎn)生，比如膀胱上皮細(xì)胞[3]，是人身體內(nèi)數(shù)量最多的神經(jīng)營養(yǎng)因子之一。國外有研究[4]報(bào)道，女性O(shè)AB患者尿液中的BDNF表達(dá)水平高于對(duì)照組，并由此認(rèn)為，BDNF可能成為OAB的生物診斷標(biāo)記物。本研究旨在通過探討我國女性O(shè)AB患者尿液中BDNF的表達(dá)水平及其與OAB嚴(yán)重程度的相關(guān)性，為臨床能更確切診斷該病尋找新途徑及方法。

1 材料與方法

1.1 研究的對(duì)象

40例研究組對(duì)象來為自2015年2月至2016年5月在重慶市第九人民醫(yī)院泌尿外科泌尿外科診斷為OAB的女性患者，年齡18～59歲，平均年齡(36.5±7.8)歲。對(duì)照組30名女性為健康志愿者，年齡19～58歲，平均(34.3±7.6)歲。兩組年齡比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0．05)。全部研究對(duì)象都由院倫理委員會(huì)進(jìn)行了嚴(yán)格的審查，并簽署了知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 診斷的標(biāo)準(zhǔn) OAB的診斷標(biāo)準(zhǔn)參照《中國泌尿外科疾病診斷治療指南》[2]：特征表現(xiàn)為尿急，常常合并有尿頻、夜尿癥狀(每個(gè)夜間排尿≥2次，每晝夜排尿≥8 次)，膀胱排空后往往仍有尿意；常常合并有突然的強(qiáng)烈的緊迫排尿感，伴有或者沒有急迫性的尿失禁表現(xiàn)。尿動(dòng)力學(xué)往往有逼尿肌的活動(dòng)過度。

1.2.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn) (1)納入標(biāo)準(zhǔn)：①患者女性，有尿急的癥狀，符合OAB診斷的標(biāo)準(zhǔn)；②尿常規(guī)檢查、尿培養(yǎng)檢查均為陰性；③按照膀胱過度活動(dòng)癥的評(píng)分(overactive bladder symptom scores，OABSS)標(biāo)準(zhǔn)[5]，尿急癥狀得分≥2 分，總得分≥3 分。其中，3 分

1.2.3 BDNF的表達(dá)水平測(cè)定 在清晨膀胱充盈想排尿時(shí)，采集所有研究對(duì)象尿液30 mL(室溫)，離心10 min(4 ℃ 5 000 r/min)后，用1.5 mL的凍存管分裝上清液，每個(gè)尿液標(biāo)本留取3份上，置-80 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩２捎妹嘎?lián)免疫吸附測(cè)定方法(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)，嚴(yán)格按照試劑說明書操作檢測(cè)BDNF(ELISA試劑盒由鈺博生物有限公司提供)，每份尿液標(biāo)本均進(jìn)行3 次重復(fù)檢測(cè)，取平均數(shù)做為最終BDNF值，結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)化采用BDNF/Cr值(pg/mg)為最后分析比較指標(biāo)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 尿液中BDNF/Cr表達(dá)水平

OAB組尿液中BDNF/Cr表達(dá)水平(892.1±420.7 pg/mg)顯著高于對(duì)照組(150.6±63.5 pg/mg)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 尿液中BDNF/Cr表達(dá)水平

*P<0.05，與對(duì)照組相比。

2.2 不同嚴(yán)重程度OAB患者尿液BDNF/Cr表達(dá)

根據(jù)OABSS評(píng)分，輕度、中度、重度OAB患者尿液BDNF/Cr平均值分別為(560.2±274.5)pg/mg、(825.3±402.6)pg/mg和(1148.5±510.2)pg/mg，兩兩比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

組別例數(shù)尿液BDNF/Cr(pg/mg)輕度9560.2±274.5中度20825.3±402.6?重度111148.5±510.2#

*P<0.05，與輕度相比；#P<0.05，與中度相比。

2.3 尿液BDNF/Cr與OABSS的相關(guān)性

40例OAB患者尿液BDNF/Cr與OABSS呈正相關(guān)(r=0.619，P<0.01)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見圖1。

3 討論

BDNF是由119個(gè)氨基酸殘基組成的一種堿性蛋白質(zhì)，分子量為13.15道爾頓，含有3對(duì)二硫鍵[6]，主要是由肽能神經(jīng)元細(xì)胞生成，也可由非神經(jīng)元細(xì)胞產(chǎn)生，分布于周圍神經(jīng)系統(tǒng)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)、膀胱組織和骨等廣泛區(qū)域內(nèi)，對(duì)神經(jīng)元的發(fā)育、生長、分化、存活等起著十分重要的作用[7]，是人體內(nèi)一種重要的神經(jīng)營養(yǎng)因子。

BDNF除了與神經(jīng)系統(tǒng)疾病如老年性癡呆、急性神經(jīng)系統(tǒng)損傷等的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)，也與泌尿系統(tǒng)疾病(如膀胱功能障礙)之間可能存在一定相關(guān)性。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)[8]，在大鼠的膀胱內(nèi)灌注環(huán)磷酰胺誘發(fā)膀胱炎，會(huì)導(dǎo)致大鼠膀胱里BDNF表達(dá)水平明顯升高，但如果將肉毒素A注射到膀胱壁則會(huì)降低BDNF的表達(dá)，進(jìn)而降低大鼠膀胱逼尿肌反射性，改善大鼠的膀胱功能。另有研究[9-10]顯示，間質(zhì)性膀胱炎/膀胱疼痛綜合征患者尿液中BDNF表達(dá)水平升高，在經(jīng)過透明質(zhì)酸治療或者膀胱內(nèi)注射肉毒桿菌毒素治療后，其表達(dá)水平會(huì)顯著下降。還有研究[11]認(rèn)為，膀胱感覺傳入神經(jīng)中酪氨酸激酶受體B的激活可能和周圍組織中BDNF表達(dá)水平的升高密切相關(guān)。

OAB是泌尿系統(tǒng)的常見疾病，主要表現(xiàn)為膀胱功能障礙，其具體發(fā)病機(jī)制至今還未明確。近年來，神經(jīng)營養(yǎng)因子在OAB中的作用受到越來越多學(xué)者的關(guān)注。國外Antunes-Lopes等[12-13]的研究發(fā)現(xiàn)，BDNF在健康志愿者尿液中的表達(dá)水平較低，而OAB患者尿液中的BDNF表達(dá)水平則顯著升高，且與尿液取樣時(shí)間(早晨、中午、晚上)無關(guān)。在3個(gè)月的行為方式調(diào)節(jié)治療后，隨著臨床癥狀的減輕，OAB患者尿液中BDNF的表達(dá)水平則明顯下降。國內(nèi)胡浩等[14]發(fā)現(xiàn)，合并有OAB的良性前列腺增生患者的膀胱尿液BDNF表達(dá)水平升高明顯，且該組患者尿液中的BDNF表達(dá)水平與OAB癥狀嚴(yán)重的程度基本呈正相關(guān)性。Wang等[15]的研究也顯示，女性O(shè)AB人群尿液BDNF的表達(dá)水平比正常人明顯升高，而且尿液BDNF在診斷膀胱過度活動(dòng)的敏感性等方面要優(yōu)于神經(jīng)生長因子，更適合作為OAB的診斷指標(biāo)。

本研究在研究對(duì)象的選擇上采取了嚴(yán)格的排除標(biāo)準(zhǔn)，盡可能排除神經(jīng)系統(tǒng)相關(guān)疾病對(duì)結(jié)果的干擾。結(jié)果顯示，40例女性O(shè)AB組尿液中BDNF/Cr的表達(dá)水平明顯高于對(duì)照組，且 BDNF/Cr與OABSS呈正相關(guān)(r=0.619，P<0.01)，與文獻(xiàn)報(bào)道[12-15]一致。根據(jù)OABSS評(píng)分，BDNF/Cr在輕、中、重度OAB患者尿液中表達(dá)水平分別為(560.2±274.5)pg/mg、(825.3±402.6)pg/mg和(1148.5±510.2)pg/mg，表明OAB患者尿液BDNF/Cr表達(dá)水平隨病情嚴(yán)重程度增加而升高。

綜上所述，女性O(shè)AB患者尿液中BDNF的表達(dá)水平明顯升高，且與病情嚴(yán)重程度有關(guān)。BDNF可能在OAB的發(fā)病機(jī)制中起著重要作用，有望成為診斷OAB的無創(chuàng)、有效、客觀的標(biāo)記物。但女性健康人群尿液中BDNF正常值的參考范圍及女性O(shè)AB診斷臨界值的確定，仍有待更深入研究。