在結(jié)核病診斷中應(yīng)用酶標(biāo)法和金標(biāo)法兩種方法的效果分析

寇永鴻

【摘要】選擇結(jié)核病患者、非結(jié)核性呼吸道疾病患者和健康體檢者作為研究對(duì)象，分為3個(gè)實(shí)驗(yàn)小組，分別采用酶標(biāo)法和金標(biāo)法這兩種方法檢測(cè)結(jié)核抗體，對(duì)其陽(yáng)性率和特異性進(jìn)行對(duì)比。結(jié)果顯示，在本中心實(shí)際所用試劑的條件下，經(jīng)過實(shí)驗(yàn)比較，在結(jié)核病診斷中，金標(biāo)法的標(biāo)記物較為穩(wěn)定，存放條件較為便利，操作簡(jiǎn)便迅速，結(jié)果可靠。

【關(guān)鍵詞】酶標(biāo)法;金標(biāo)法;結(jié)核病;體液抗體;細(xì)胞免疫

【中圖分類號(hào)】R446

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B

【文章編號(hào)】2095-6851（2019）04-230-01

為了比較酶標(biāo)法和金標(biāo)法兩種免疫學(xué)方法在結(jié)核病診斷中的效果差異，本研究選擇結(jié)核病患者、非結(jié)核性呼吸道疾病患者和健康體檢者作為研究對(duì)象，分為3個(gè)實(shí)驗(yàn)小組，分別采用這兩種方法檢測(cè)結(jié)核抗體，對(duì)其陽(yáng)性率和特異性進(jìn)行對(duì)比。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2016年5月至2018年5月本中心診治的結(jié)核病患者80例作為研究對(duì)象，設(shè)為a組;選擇同期非結(jié)核性呼吸道疾病患者80例作為疾病對(duì)照，設(shè)為b組;選擇健康體檢人員80例作為對(duì)照，設(shè)為c組。a組包括男性45例，女35例，年齡18-82歲，平均年齡（55. 83士4. 26）歲，其中肺結(jié)核疾病48例，結(jié)核性胸膜炎疾病16例，結(jié)核性腦膜炎疾病16例。b組包括男42例，女38例，年齡19-83歲，平均年齡（56. 34士3.87）歲，其中肺炎疾病47例，急慢性支氣管炎及哮喘疾病15例，肺心病16例，原發(fā)性肺癌2例。c組包括男46例，女34例，年齡20一81歲，平均年齡（56. 12士4.08）歲。a、b、c三組研究對(duì)象在基礎(chǔ)資料方面，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法 對(duì)3組研究對(duì)象分別采集血樣，然后采用金標(biāo)法和酶標(biāo)法對(duì)血清中的結(jié)核抗體實(shí)施檢測(cè)。采用金標(biāo)法對(duì)樣本實(shí)施檢測(cè)時(shí)，在同樣的室溫和時(shí)間下，由至少2位檢驗(yàn)人員通過肉眼對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行認(rèn)真觀察，盡量避免主觀因素對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的影響;采用酶標(biāo)法實(shí)施檢測(cè)時(shí)，實(shí)施37℃水浴有效孵育，嚴(yán)格按照規(guī)范操作，采用酶聯(lián)免疫分析儀進(jìn)行吸光度分析。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 均采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS17. 0完成，檢測(cè)陽(yáng)性率比較采用x2檢驗(yàn)，P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

檢測(cè)后發(fā)現(xiàn)，a組肺結(jié)核患者，采用金標(biāo)法測(cè)得的陽(yáng)性率為75.58%;采用酶標(biāo)法測(cè)定的陽(yáng)性率為80.46%;對(duì)于b組非結(jié)核性呼吸道疾病患者，采用金標(biāo)法測(cè)得的陽(yáng)性率為2. 6%，采用酶標(biāo)法測(cè)定的陽(yáng)性率為7.04 %;對(duì)于c組健康人員，采用金標(biāo)法測(cè)得結(jié)果全部表現(xiàn)為陰性，采用酶標(biāo)法測(cè)定的陽(yáng)性率為3.87%。

3 討論

體液的免疫學(xué)診斷即血清學(xué)診斷，通過測(cè)定血中的結(jié)核抗體，結(jié)合其他指標(biāo)來佐證是否患有結(jié)核。酶聯(lián)法及金標(biāo)法檢測(cè)結(jié)核抗體均屬于血清學(xué)診斷的范疇。酶聯(lián)法的檢測(cè)原理是抗原或抗體吸附于固相載體，加入被檢物和酶結(jié)合物反應(yīng)后，通過酶催化底物顯色來檢測(cè)抗體或抗原。其操作步驟比金標(biāo)法繁瑣，影響因素較多，標(biāo)本未離心完全、標(biāo)本被污染等因素可引起假陽(yáng)性，應(yīng)盡量避免;同時(shí)有些患者（肝硬化、自身免疫性疾病等）體內(nèi)含有非特異性抗體，在反應(yīng)過程中具有一定的吸附作用，從而引起假陽(yáng)性。金標(biāo)法檢測(cè)原理是采用現(xiàn)代生物工程技術(shù)提純的結(jié)核分枝桿菌特異性的外膜蛋白做抗原，點(diǎn)樣于檢測(cè)板反應(yīng)孔中硝酸纖維，若滴入的被檢血清標(biāo)本中含有抗外膜蛋白抗體，則會(huì)與外膜蛋白抗原相結(jié)合，這時(shí)加入膠體金顆粒，與抗原抗體復(fù)合物相結(jié)合。膠體金本身即可顯示紅色，不需加入底物，減少了操作誤差，節(jié)省了時(shí)間，而且特異度強(qiáng)，敏感度高，但其需肉眼判斷結(jié)果，需注意主觀因素的影響，至少需2人認(rèn)真觀察結(jié)果。

本研究在對(duì)象的選擇方面，涵蓋了經(jīng)臨床已確診的結(jié)核患者、非結(jié)核性呼吸道疾病患者及健康人員，從而使得研究結(jié)果的分析比較更有針對(duì)性。對(duì)于3組研究對(duì)象，分別采用酶標(biāo)法及金標(biāo)法檢測(cè)結(jié)核抗體后發(fā)現(xiàn)，a組肺結(jié)核患者，金標(biāo)法測(cè)得的陽(yáng)性率為75.58%;采用酶標(biāo)法測(cè)定的陽(yáng)性率為80.46%;對(duì)于b組非結(jié)核性呼吸道疾病患者，采用金標(biāo)法測(cè)得的陽(yáng)性率為2. 6%，采用酶標(biāo)法測(cè)定的陽(yáng)性率為7.04 %;對(duì)于c組健康人員，采用金標(biāo)法測(cè)得結(jié)果全部表現(xiàn)為陰性，采用酶標(biāo)法測(cè)定的陽(yáng)性率為3.87%。

通過分析發(fā)現(xiàn)，采用酶標(biāo)法對(duì)患者進(jìn)行檢測(cè)，敏感率較金標(biāo)法略高，但綜合非結(jié)核性呼吸道疾病患者及健康人員仍然表現(xiàn)出一定的陽(yáng)性率的情況。從而表明采用此種方法進(jìn)行診斷，存在一定的概率出現(xiàn)假陽(yáng)性的情況，可能與人為操作因素，試劑盒不同抗原包被，某些疾病（如類風(fēng)濕）患者體內(nèi)含有非特異性抗體引起反應(yīng)孔本底升高等因素有關(guān)。因此在實(shí)施臨床診斷過程中需要給予高度關(guān)注。采用金標(biāo)法的檢測(cè)靈敏度略低于酶標(biāo)法，從而使得特異性相對(duì)提高，而且操作簡(jiǎn)便，出結(jié)果迅速，不須特殊儀器，適合于基層醫(yī)院開展。所以臨床在確定診斷結(jié)果過程中，需要對(duì)患者的臨床癥狀及臨床體征加以認(rèn)真觀察，同時(shí)結(jié)合實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果，綜合其他指標(biāo)，例如抗酸染色、結(jié)核菌涂片鏡檢、結(jié)核菌素試驗(yàn)、胸片檢查等全面分析以求最終有效確診。

綜上所述，臨床采用金標(biāo)法進(jìn)行結(jié)核抗體的檢測(cè)，最終可以獲得較高的特異度及敏感性，作為一種快速免疫學(xué)診斷方法，臨床應(yīng)用價(jià)值較為顯著。同酶標(biāo)法進(jìn)行比較，金標(biāo)法的標(biāo)記物較為穩(wěn)定，存放條件較為便利，操作簡(jiǎn)便迅速，無需選擇精密儀器進(jìn)行配合;同時(shí)可以將結(jié)果獲得時(shí)間顯著縮短，有效減少工作人員勞動(dòng)強(qiáng)度，最終使臨床獲得可靠診斷依據(jù)，為結(jié)核病的臨床治療提供準(zhǔn)確參考依據(jù)，將結(jié)核病對(duì)患者帶來的危害性有效減少。而采用本中心的酶聯(lián)試劑對(duì)患者進(jìn)行檢測(cè)，敏感率相對(duì)金標(biāo)法略高，但存在一定的假陽(yáng)性率，建議同時(shí)結(jié)合其他指標(biāo)例如痰涂片鏡檢、胸片等全面綜合分析。以上研究結(jié)果只針對(duì)本中心所使用的相關(guān)試劑，隨著檢驗(yàn)試劑質(zhì)量的不斷提高，臨床可根據(jù)不同檢驗(yàn)?zāi)康倪x擇不同的檢測(cè)方法，以期獲得更好的臨床診斷依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

[1] 顏京瑞.檢測(cè)結(jié)核抗體對(duì)結(jié)核病的臨床診斷價(jià)值[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2016，7（2）;113.

[2] 李常教.946例肺結(jié)核患者痰直接涂片鏡檢結(jié)果分析[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2015（8）;1941-1943.