高危型HPV感染與宮頸癌前病變及宮頸癌的相關(guān)性研究

方 莉,韓 瑜,許 媛，陳 瑩，鄭 陽

(1.川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院 檢驗(yàn)科，四川 南充637000；2.川北醫(yī)學(xué)院 醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)系，四川 南充637000)

宮頸癌嚴(yán)重威脅人類的健康，至今仍是全球女性生殖系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤，發(fā)病率僅次于乳腺癌，全球每年約有9%的女性新發(fā)癌癥病例為宮頸癌，約有8%的女性癌癥患者死于該病[1]。人乳頭瘤病毒(human papillomavirus,HPV)是一種具有高度宿主特異性噬上皮細(xì)胞的病毒，人類是其唯一宿主。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了100多種HPV基因型，其中至少有40多種基因型主要侵襲生殖道。根據(jù)其導(dǎo)致的病變程度，可將其分為高危型(HPV16，18，31，33，35，39，45，51，52，56，58，59，68，73，82等)和低危型(HPV6，11，42，43，44，53，61等)[2]。據(jù)Tommasion M等人研究顯示[3]：高危型人乳頭瘤病毒持續(xù)侵襲宮頸上皮細(xì)胞是引起宮頸病變的必要條件，其中HPV16是最常見的型別。本研究通過分析高危型HPV-DNA在宮頸上皮內(nèi)瘤變(CINI、CINII、CINIII)及宮頸癌中的分布情況，來探討高危型HPV持續(xù)感染與宮頸癌的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 研究對象

收集2015年6月至2016年3月來我院婦科就診的313名宮頸病變患者的標(biāo)本，患者年齡在22-79歲，平均年齡為40.15±8.95 歲 ，均有性生活史，均無相關(guān)手術(shù)史。按宮頸病變程度分為4組，其中CINI 66例、CINII 53例、CINIII 76例、宮頸癌118例。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1宮頸脫落細(xì)胞采集 用宮頸取樣器刷取宮頸病灶處脫落細(xì)胞，置于無菌玻璃管，密封送檢。

1.2.2檢驗(yàn)方法

檢測型別：HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68、82型。

檢測儀器：SLAN-96P熒光定量PCR檢測系統(tǒng)。

核酸提?。喊锤呶Ｐ腿巳轭^瘤病毒分型核酸測定試劑盒(上海之江生物科技股份有限公司)說明書操作要求進(jìn)行HPV-DNA提取。

PCR反應(yīng)體系見表1。

表1 PCR反應(yīng)體系

PCR反應(yīng)條件：94 ℃×2 min；93 ℃×10 sec→62 ℃×31 sec,循環(huán)40次；單點(diǎn)熒光檢測在62 ℃。

結(jié)果判斷：若待檢樣本Ct≤38,且擴(kuò)增曲線呈典型的S型，則結(jié)果判斷為陽性；若為非典型S型曲線，則判為陰性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，數(shù)值變量資料使用“均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”來表示，采用單因素方差分析進(jìn)行假設(shè)檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)P<0.05時(shí)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

分類變量資料使用“率，構(gòu)成比”來表示，采用卡方檢驗(yàn)進(jìn)行假設(shè)檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)P<0.05時(shí)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 高危型HPV的感染情況

將受檢標(biāo)本按宮頸病變程度分為4組，其中CINI組66例，CINⅡ組53例，CINⅢ組76例，宮頸癌組118例。各組陽性感染情況見表2。

表2 高危型HPV感染情況

由表2可知CINI組、CINⅡ組、CINⅢ組、宮頸癌組陽性感染率分別為16.67%，60.38%，69.74%，75.42%，χ2=65.77，P<0.01，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.2 宮頸病變程度與年齡的關(guān)系

按年齡區(qū)間將受檢者分為21-40歲，41-60歲，61-80歲3組，各年齡組宮頸病變的陽性感染率情況見表3。

表3 宮頸病變的年齡分布情況

由表3可知 CINII,CINIII和宮頸癌組的感染高峰年齡均為41-60歲。根據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)方法可知:CIN I組P>0.05，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。CINII、CINIII和宮頸癌組P<0.01，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.3 宮頸病變患者高危型HPV亞型分布

由表4可知，CINI組共檢出7種HPV高危型，分別為HPV16、18、35、39、52、56、58；癌前病變組(CINII-CINIII)和宮頸癌組共檢出了12種HPV高危型別，分別為HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59；CINI組感染率較高的亞型為HPV16(4.55%)、HPV35(3.03%)、HPV58(3.03%),χ2=0.3,P>0.05，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；癌前病變組感染率較高的亞型為HPV16(31.01%)、HPV58(14.73%)、HPV52(10.85%)，χ2=7.62，P<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；宮頸癌組感染率高的亞型為HPV16(47.46%)、HPV18(16.95%)、HPV58(11.86%)、HPV52(5.93%)，χ2=74.16，P<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表4 宮頸病變高危型HPV分布情況

3 討論

3.1 HPV高危型別在宮頸病變中的感染情況

目前已有足夠研究表明，高危型人乳頭瘤病毒(HR-HPV)的持續(xù)性感染，是導(dǎo)致宮頸上皮內(nèi)瘤變及宮頸癌的主要因素[4]。

女性感染HPV 后，絕大多數(shù)(80%以上)靠機(jī)體免疫力在1-2 年內(nèi)可自動(dòng)清除， 只有極少數(shù)婦女最終會(huì)發(fā)展為子宮頸癌。由感染HR-HPV 發(fā)展到子宮頸浸潤癌，通常需要8-15 年時(shí)間，期間要經(jīng)過漫長的癌前病變過程[5]，完全可以通過篩查來早期發(fā)現(xiàn)和診治宮頸癌。本實(shí)驗(yàn)主要通過分析宮頸病變各階段高危型HPV感染率的情況，來探討高危型HPV與宮頸病變的相關(guān)性。由上述結(jié)果可知宮頸癌的陽性感染率最高，達(dá)到75.42%。從CINI、癌前病變(CINⅡ、CINⅢ)到宮頸癌，隨著宮頸病變的加重，陽性率依次遞增。據(jù)劉金鳳等人的調(diào)查發(fā)現(xiàn)[6]，中國相關(guān)文獻(xiàn)Meta分析中調(diào)整后宮頸癌HPV感染率82.7%，相比本研究宮頸癌感染率較高。 HPV是最常見的宮頸癌致病因子，大多數(shù)的宮頸癌由其造成，其致病力的高低將宮頸癌劃分為高危型和低危型兩大類[7]。而本研究只討論HPV高危型的陽性率，未涉及HPV低危型別的討論。這可能是與相關(guān)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)存在出入的原因。

3.2 宮頸病變的年齡分布情況

近年宮頸癌的發(fā)病率呈上升且年輕化的趨勢[8]本實(shí)驗(yàn)主要分析年齡因素對宮頸病變的陽性率的影響。由上述結(jié)果可知CINI組的檢驗(yàn)水準(zhǔn)P>0.05,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，即年齡并不是CINI陽性率的影響因素。CINⅡ、CINⅢ和宮頸癌的檢驗(yàn)水準(zhǔn)P<0.01,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，感染陽性率與年齡有關(guān)，感染高峰年齡為41-60歲。分析原因，可能與該年齡段婦女性行為習(xí)慣和機(jī)體免疫功能等因素有關(guān)[9]。

3.3 宮頸病變患者HPV高危型的亞型分布情況

分析表4結(jié)果可知：CINI組數(shù)據(jù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，癌前病變組主要感染亞型為HPV16、58、52；宮頸癌組主要感染亞型為HPV16、18、58、52。范潔琳通過研究發(fā)現(xiàn)[10]：CINⅡ-CINⅢ患者高危型HPV感染率前三位依次是HPV16(50.94%),HPV58(18.87%),HPV52(13.21%)。與本研究結(jié)果基本相符。據(jù)烏恩奇等人研究顯示[11]：2013年在我國四川地區(qū)的調(diào)查顯示，宮頸癌患者中最主要的感染亞型為HPV16 (34.9%),HPV58 (8.3%),HPV 18(4.9%),HPV 52(2.8%)。與本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果基本符合，只是58型和18型的比例差別明顯，可能與本實(shí)驗(yàn)中樣本量數(shù)據(jù)過少有關(guān)。

通過研究分析可知：宮頸病變的發(fā)生與高危型HPV病毒的感染存在相關(guān)性。因此，高危型HPV病毒的篩查對于早期宮頸癌的防治具有重要的意義。