全自動酶聯(lián)免疫分析儀與手工酶聯(lián)免疫法檢測結(jié)果的一致性

孫立慧

天津市濱海新區(qū)大港醫(yī)院檢驗科 (天津 300270)

醫(yī)療技術(shù)的不斷發(fā)展使得臨床檢測的標(biāo)本大量增加，為適應(yīng)這一需求，臨床標(biāo)本的檢測均采用自動化程序化檢測儀器。全自動酶聯(lián)免疫分析儀逐漸代替手工檢測，越來越多的檢驗科免疫室將全自動酶聯(lián)免疫分析儀作為手工酶聯(lián)免疫檢測的輔助儀器[1]。但全自動酶聯(lián)免疫分析儀加樣系統(tǒng)采用的是非一次性Tef-lon涂層鋼針，易造成拖帶污染，對檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性造成一定影響。本研究采用全自動酶聯(lián)免疫分析儀與手工酶聯(lián)免疫法對血清標(biāo)本進(jìn)行檢測，分析檢測符合率，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年8月至2018年9月我院收治的患者80例，男49例，女31例；年齡25～75歲，平均(48.87±6.14)歲。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，患者均知曉研究詳情，并簽署知情同意書，女性入選者未處于妊娠期或哺乳期，均未患有血液系統(tǒng)疾病。

1.2 儀器與試劑

儀器：全自動酶聯(lián)免疫分析儀(瑞士TECAN公司生產(chǎn)，型號為Tecan Freedom Evolyzer-2200)；酶標(biāo)儀RT2100c(鄭州南北儀器設(shè)備有限公司生產(chǎn))；W5000洗板機(jī)(天美科學(xué)儀器有限公司生產(chǎn))。

試劑：甲型肝炎病毒抗體檢測試劑盒，上?？迫A生物工程股份有限公司提供，生產(chǎn)批號201608142；乙型肝炎病毒5項診斷試劑盒，北京萬泰藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，生產(chǎn)批號201709212；人類免疫缺陷病毒抗體診斷試劑盒，上?？迫A生物工程股份有限公司生產(chǎn)，生產(chǎn)批號201610161；丙型肝炎病毒抗體診斷試劑盒，英科新創(chuàng)科技公司，生產(chǎn)批號2016102617；戊型肝炎2項診斷試劑盒，北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司，生產(chǎn)批號EG20160101；梅毒螺旋體抗體診斷試劑盒，北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司，生產(chǎn)批號N20161017。

1.3 方法

清晨空腹?fàn)顟B(tài)下抽取5 ml靜脈血，3 500 r/min離心后取上層血清備測，分別采用手工酶聯(lián)免疫法和全自動酶聯(lián)免疫分析儀進(jìn)行檢測，自動酶聯(lián)免疫分析儀操作程序嚴(yán)格按試劑說明書設(shè)置，設(shè)置檢測參數(shù)。手工檢測由操作熟練工作人員進(jìn)行，并嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行，確保檢測質(zhì)量。觀察檢測結(jié)果。

1.4 臨床評價

觀察80例患者標(biāo)本經(jīng)手工酶聯(lián)免疫法與全自動酶聯(lián)免疫分析儀檢測的11項指標(biāo)符合率。

2 結(jié)果

全自動酶聯(lián)免疫分析儀檢測的80例患者標(biāo)本與手工酶聯(lián)免疫法對照，11項檢測結(jié)果符合率為96.59%。見表1。

3 討論

手工酶聯(lián)免疫法主要通過酶標(biāo)記顯色檢測抗體或抗原是否存在的試驗，特異度和靈敏度較高，且易于操作，成本低廉，是臨床重要的檢測方法之一，在醫(yī)學(xué)檢驗領(lǐng)域應(yīng)用廣泛[2]。手工酶聯(lián)免疫法檢測時，若檢測批次中不同反應(yīng)孔試劑標(biāo)本分配量、分配時間不一致，試劑反應(yīng)溫度、溫育時間不同，可影響試劑盒檢測水平，從而造成檢測誤差。手工酶聯(lián)免疫法檢測的相關(guān)操作由操作者遵循儀器和設(shè)備的說明完近年來，隨著免疫檢測儀器的不斷更新，全自動酶聯(lián)免疫分析儀通過自動化酶聯(lián)免疫吸附試驗，增強(qiáng)不同反應(yīng)孔試驗條件的一致性，在標(biāo)本識別、加樣全過程中采用全自動條碼識別管理，溫育、洗板、測定通過軟件控制，可以避免人為誤差，最大限度減少假陰性、假陽性的發(fā)生，從而提高檢測水平。同時，自動化的操作也可減輕實驗室人員工作壓力。

表1 80例患者標(biāo)本手工酶聯(lián)免疫法與全自動酶聯(lián)免疫分析儀的測定結(jié)果對照

注：HEV-IgG=戊型肝炎病毒IgG；HAV-IgM=甲型肝炎病毒IgM；HEV-IgM=戊型肝炎病毒IgM；HBeAb=乙型肝炎e抗體；HBcAg=乙型肝炎核心抗原；HIV=人類免疫缺陷病毒；TP=梅毒螺旋體；HCV=丙型肝炎病毒；HBsAg=乙型肝炎表面抗原；HBsAb=乙型肝炎表面抗體；HBcAb=乙型肝炎核心抗體成，但操作過程中若與陽性血清直接接觸，可造成交叉感染，由此可見，手工操作誤差較大，精密度不高，某一細(xì)節(jié)顧及不到易造成檢測結(jié)果出現(xiàn)假陰性、假陽性[3]。

本研究采用全自動酶聯(lián)免疫儀檢測結(jié)果顯示，全自動酶聯(lián)免疫儀假陰性檢出率較低，與臨床研究相似[4]。原因可能在于相較于人工操作，溫育溫度較為恒定，時間較為固定，在封閉環(huán)境下完成，且標(biāo)準(zhǔn)性與規(guī)范性較高，可降低交叉感染的可能性。全自動酶聯(lián)免疫儀試劑的洗板均一、加樣量準(zhǔn)確，可確保樣本檢測質(zhì)量[5]。本研究結(jié)果顯示，兩種檢測方法的檢測結(jié)果符合率高，提示全自動酶聯(lián)免疫分析儀精密度高，重復(fù)性好，可代替手工酶聯(lián)免疫法。但全自動酶聯(lián)免疫分析儀臨床操作過程中對工作人員要求較高，檢驗人員應(yīng)熟悉儀器原理及性能，掌握日常保養(yǎng)方法，并嚴(yán)格遵守試劑盒與儀器說明操作[6]。