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    飼料添加鉤吻干粉對(duì)仔豬生長性能的影響及機(jī)制

    2019-04-19 08:55:08孫志良
    中獸醫(yī)學(xué)雜志 2019年2期
    關(guān)鍵詞:轉(zhuǎn)氨酶血常規(guī)生化

    王 頡,孫志良

    (湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院,湖南 長沙410128)

    鉤吻(Gelsemium elegans (Gardn.& Champ.)Benth.,GEB)為馬錢科植物胡蔓藤的全草,又名斷腸草、野葛、毒根、大茶藥等,味苦、微辛,性熱,有大毒,主要分布在浙江、福建、廣東、廣西、湖南、貴州和云南等地。研究表明,鉤吻素子、鉤吻素甲等生物堿是其主要的有效成分[1]。

    中草藥是我國醫(yī)藥文化的瑰寶,部分中草藥作為飼料原料應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖也具有悠久的歷史。如《神農(nóng)本草經(jīng)》中有“梓葉喂豬,肥大三倍”的記載[3]。近年來,關(guān)于草藥在畜禽、水產(chǎn)養(yǎng)殖中應(yīng)用的報(bào)道逐漸增多,顯示出中草藥在促進(jìn)動(dòng)物生長、增進(jìn)動(dòng)物健康以及疾病防控與治療中的廣闊前景。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與處理

    選取30 頭56日齡的體況健康的長×大二元雜交育成豬,按體重平均分為兩組:對(duì)照組(CON,15 頭)飼喂基礎(chǔ)日糧,鉤吻組(GEB,15 頭)飼喂補(bǔ)充50mg/kg 劑量的鉤吻醇提物日糧。試驗(yàn)期為49天,每兩周記錄一次豬的體重和采食量;試驗(yàn)結(jié)束后,采集仔豬血液進(jìn)行相關(guān)血常規(guī)和生化指標(biāo)測(cè)定(每組生物學(xué)重復(fù)為15,技術(shù)重復(fù)為3),采集肝臟組織進(jìn)行基因表達(dá)分析(每組生物學(xué)重復(fù)為9,技術(shù)重復(fù)為3)。

    1.2 血常規(guī)檢測(cè)

    使用血液分析儀(邁瑞B(yǎng)C-2800vet)測(cè)定全血中的紅細(xì)胞數(shù)(RBC)、血紅蛋白(HGB)、紅細(xì)胞平均血紅蛋白含量(MCH)、紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度(MCHC)、白細(xì)胞數(shù)(WBC)等相關(guān)血常規(guī)參數(shù)。

    1.3 生化指標(biāo)測(cè)定

    使用血液生化儀測(cè)定血液生化指標(biāo)[2],按照試劑盒說明書分別測(cè)定血清中INS (胰島素)、TP(總蛋白)、ALB (白蛋白)、GLOB (球蛋白)、IGM(免疫球蛋白M)、IGG(免疫球蛋白G)、IGA(免疫球蛋白A)、ALT (谷丙轉(zhuǎn)氨酶)、AST (谷草轉(zhuǎn)氨酶)、AKP(堿性磷酸酶)、LDH(乳酸脫氫酶)、BUN(尿素氮)、TCHO(膽固醇)等血液生化指標(biāo)的含量。

    1.4 基因表達(dá)分析

    RT-PCR 使用TAKARA 試劑盒按照說明書進(jìn)行檢測(cè),步驟簡述如下:(1)反應(yīng)體系:20μL,其中上、 下引物各1.0 μL,SYBR Premix Ex Taq II 10 μL,cDNA 200 ng,補(bǔ)充dH2O 至20 μL 的總體積。(2)反應(yīng)程序: 95 ℃,30 s;,95 ℃5 s,60 ℃30 s,40 個(gè)循環(huán); 95 ℃15 s,60 ℃60 s,95 ℃15 s。使 用Applied Biosystems 7900HT Fast Real-Time PCR System 儀器上機(jī)。相對(duì)基因表達(dá)用2-(△△Ct)公式計(jì)算。

    1.5 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析

    試驗(yàn)數(shù)據(jù)均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示,試驗(yàn)結(jié)果采用GraphPad Prism 7.0 進(jìn)行U-paired t-test統(tǒng)計(jì)分析并作圖,P<0.05 表示差異顯著。

    2 結(jié)果

    2.1 生長性能

    試驗(yàn)期間1-15 天、16-31 天、32-49 天,飼料中添加鉤吻干粉顯著提高了仔豬的平均日增重并且降低料重比(圖1,P<0.05)。同時(shí),飼料中添加鉤吻干粉顯著提高了試驗(yàn)全程(0-49 天)仔豬的平均日增重(11%)并降低了全程料重比(12%)(圖1,P<0.05)。鉤吻對(duì)仔豬的平均日采食量無顯著性影響(圖1,P>0.05)。

    圖1 鉤吻對(duì)仔豬生長性能的影響(Mean±SD)

    2.2 血常規(guī)變化

    血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果顯示,GEB 組的紅細(xì)胞數(shù)量和血紅蛋白含量顯著高于CON 組 (P<0.05)(圖2,A、B),分別提高7.6%、8.5%。血小板、白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞的數(shù)量在GEB 組和CON 組之間沒有顯著性差異(P>0.05)(圖2,C、D、E)。

    圖2 鉤吻對(duì)仔豬血常規(guī)的影響(Mean±SD)

    2.3 血液生化參數(shù)變化

    與CON 相比,飼料中添加GEB 顯著提高了仔豬血清總蛋白(5.9%)、免疫球蛋白A(36%)、胰島素(11%)、尿素氮(17%)等指標(biāo)(P<0.05),同時(shí)降低血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶 (15%) 和谷草轉(zhuǎn)氨酶(23%) 活性以及谷丙轉(zhuǎn)氨酶與谷草轉(zhuǎn)氨酶比值(P<0.05)。(圖3,A、E、F、G、H、I、J)。血清白蛋白、球蛋白、免疫球蛋白M、免疫球蛋白G、總膽固醇等在兩組之間沒有顯著性差異(P>0.05)(圖3,B、C、D、L、K)。

    圖3 鉤吻對(duì)仔豬血液生化參數(shù)的影響(Mean±SD)

    2.4 基因表達(dá)變化

    與CON相比,GEB組的肝臟PPARD、ANGPT4、HMGCS2 三個(gè)基因的mRNA 豐度顯著增加 (P<0.05)(圖4,A、B、C)、PDK4 基因的表達(dá)量顯著降低(P<0.05)(圖4,D)。

    圖4 鉤吻對(duì)仔豬肝臟相關(guān)基因表達(dá)的影響(Mean±SD)

    3 討論

    在本研究中,飼料中添加鉤吻顯著提高仔豬的日增重并降低料重比,與前人報(bào)道一致,表明鉤吻具有開發(fā)成一種飼料添加劑促進(jìn)仔豬生長的前景。

    血液是在動(dòng)物機(jī)體內(nèi)氧氣、營養(yǎng)物質(zhì)及以及代謝物運(yùn)輸?shù)闹饕d體,血液生理生化指標(biāo)是動(dòng)物機(jī)體健康的重要參考標(biāo)志。鉤吻作為飼料添加劑對(duì)動(dòng)物血液生化具有調(diào)節(jié)作用,有可能進(jìn)一步影響仔豬的生長發(fā)育。

    研究發(fā)現(xiàn),鉤吻對(duì)仔豬的生長具有顯著的促進(jìn)作用并且降低了料重比,可以推測(cè)鉤吻對(duì)仔豬的促生長作用可能與其參與其肝臟糖脂的代謝、影響胰島素敏感性和機(jī)體能量代謝等具有一定的聯(lián)系。

    4 結(jié)論

    本研究結(jié)果表明,鉤吻作為飼料添加劑能夠顯著提高仔豬生長性能,其促生長作用可能與其參與血液生化以及糖脂代謝相關(guān)基因表達(dá)的調(diào)控有關(guān)。

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