鈍藥野木瓜果實全營養(yǎng)素分析測定

劉天虎，劉積光

(1.海南比奧康生物科技有限公司 海口 571100；2.海南大學 熱帶農(nóng)林學院 海口 570228)

鈍藥野木瓜(Stauntonialeucantha)為木通科野木瓜屬植物，中國特有植物，主要分布于我國江西、湖南、廣東、廣西、貴州、福建等南方地區(qū)，生長海拔高度300～940 m，一般生長在山谷溪邊、山地森林和丘陵林緣，目前尚未見人工引種栽培的報道[1]。鈍藥野木瓜在2003版《貴州省中藥材、民族藥材質(zhì)量標準》被收載入藥，入藥部位主要為莖葉[2]，性甘、溫，氣微，味淡、微苦澀，具有袪風活絡、利水消腫的功效。在民間主要用于風濕痹痛，小便不利，水腫等病癥的治療[3]。長期以來，民間都習慣食用鈍藥野木瓜果實，但國內(nèi)外卻鮮有文獻報道。胡冬群等進行了藤莖部位的中藥材鑒定及其荷苞花苷含量測定[3]，首次從鈍藥野木瓜中分離、純化和鑒定出4種五環(huán)三萜化合物，并建立HPLC法，同時測定鈍藥野木瓜藥材中羽扇豆醇和羽扇豆酮的含量[4]，但卻未見關于鈍藥野木瓜果實的相關報道。筆者以成熟的鈍藥野木瓜果實為研究對象，對其進行常規(guī)營養(yǎng)成分、維生素、氨基酸、脂肪酸、礦物質(zhì)和微量元素等分析，旨在為鈍藥野木瓜果新食品原料開發(fā)和功效利用提供科學依據(jù)和理論基礎。

1 材料與方法

1.1材料與儀器鈍藥野木瓜果實樣品來自于湖南省永興縣山區(qū)的野生植株，采收時間為2017年10月，材料保存于-20 ℃冰箱中，用時取出，充分解凍。實驗儀器：Master-S plus UVF 型超純水機(上海和泰)；DHG-9071A 型電熱恒溫干燥箱(上海精宏)； TU-1810 型紫外可見光分光光度計(北京普析)；F97 Pro 熒光分光光度計(上海棱光)；CCA-1112 型冷卻水循環(huán)裝置(上海愛朗)；ZSD-A1270A 型全自動新型生化培養(yǎng)箱(上海智城)；SHA-C 型水浴恒溫振蕩器(江蘇盛藍)； DK-98-Ⅱ型萬用電爐(天津泰斯特)；SY-1000E 多用途恒溫超聲提取機(北京弘祥隆)；STARTER 3100 pH 計(奧豪斯)。

1.2常規(guī)營養(yǎng)成分測定方法參照國家標準《食品安全國家標準食品中水分的測定》(GB 5009.3-2016)測定水分；使用葡萄糖制作標準曲線，根據(jù)硫酸-蒽酮法測定總糖；參照國家標準《食品安全國家標準食品中蛋白質(zhì)的測定》(GB 5009.5-2016)測定粗蛋白；參照國家標準《食品安全國家標準食品中脂肪的測定》(GB 5009.6-2016)測定總脂；參照國家標準《植物類食品中粗纖維的測定》(GB/T5009.10-2003)測定粗纖維；參照國家標準《食品安全國家標準食品中灰分的測定》(GB 5009.4-2016)測定總灰分。

1.3維生素測定方法參照國家標準《食品安全國家標準食品中維生素 A、D、E 的測定》(GB5009. 82-2016)測定維生素E；參照國家標準《食品安全國家標準食品中抗壞血酸的測定》(GB 5009.86-2016)測定維生素C；參照國家標準《食品安全國家標準食品中維生素B1的測定》(GB 5009.84-2016)測定維生素B1；參照國家標準《食品安全國家標準食品中維生素B2的測定》(GB 5009.85-2016)測定維生素B2。

1.4脂肪酸組成分析方法脂肪酸的甲酯化處理[5]：待石油醚揮干后，稱取少量油脂，并溶于 1%硫酸-甲醇 2 mL，置于 70 ℃恒溫水浴中加熱 1 h，加入正己烷搖勻，靜置分層后取上清液，再加入正己烷洗滌，取上清液，合并上清液，貯存?zhèn)溆?。使用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀進行檢測分析。氣相條件：色譜柱 Agilent HP-5MS(5 %苯基甲基氧化硅，325 ℃，30 cm×250 μm×0.25 μm)；進樣口溫度：270 ℃；載氣：He；柱流量：

1 mL·min-1；分流比為20∶1。質(zhì)譜條件：EI 源，電離電壓：70 eV，離子源溫度：230 ℃，掃描范圍：10～500 amu，進樣量為1.0 μL[6]。

1.5礦質(zhì)元素分析方法參考國標《食品安全國家標準食品中多元素的測定》(GB 5009.268-2016)對礦質(zhì)元素進行測定。采用電感耦合等離子體質(zhì)譜法(ICP-MS)進行多元素分析，使用原子吸收光譜法測定Ca，F(xiàn)e，Hg，K，Na 元素的含量[7]。

1.6氨基酸組成分析方法樣品進行水解處理后，用AccQ·Fluor Reagent Kit(P/N WAT052880)進行衍生化處理，氨基酸含量使用HPLC法測定[7]。HPLC檢測方法：AccQ·Tag柱(Nava-Pak C18，3.9 mm×150 mm， Φ0.4 μm)，柱溫37 ℃；進樣體積10 μL；進行梯度洗脫，洗脫液A為AccQ·Tag∶水(1∶10)，洗脫液B為乙腈∶水(3∶2)；流速1.0 mL·min-1，洗脫時間50 min。梯度洗脫程序如下：洗脫液B初始比例為0，在0.5 min升至1.0%，在17 min升至7.0%， 在21 min升至10.0%，在30 min升至33.0%， 在31 min升至100%，在35 min降到0，并維持15 min。

1.7單寧含量測定方法根據(jù)《飼料中單寧的測定分光光度法》(GB/T 27985-2011)對單寧含量進行測定。

2 結(jié)果與分析

2.1常規(guī)營養(yǎng)成分鈍藥野木瓜果實常規(guī)營養(yǎng)成分主要是水分、總糖、油脂、總灰分、粗蛋白和粗纖維，其含量分別為(80.53±2.23)%，(8.06±1.50)%，(2.71±0.03)%，(2.1±0.20)%，(1.39±0.40)%和(4.37±0.50)%；合計為(99.16±4.86)%。測定結(jié)果表明，鈍藥野木瓜果實水分含量較高。除去水分后，總糖含量最高，經(jīng)測定，鈍藥野木瓜果實的單寧酸含量為(1 865.8±24.2)mg·kg-1，這可能是其口味形成的關鍵因素[8-9]。

2.2礦質(zhì)元素鈍藥野木瓜中礦質(zhì)元素含量結(jié)果見表1。由表1可知，鈍藥野木瓜中鉀、鈣、鎂、鈉、錳的含量較高，鈍藥野木瓜中的鎳、鉻、砷、鎘、鉛、汞含量均未超標，符合國家食品限量標準，具有食品安全性。

2.3維生素含量鈍藥野木瓜維生素含量見表2，由表2可知，其維生素B1，維生素B2，維生素C，維生素F含量基本與木瓜果實內(nèi)含量[10]相當，維生素C含量達到1 033.8 mg·kg-1，這已經(jīng)高于大多數(shù)水果。還含有維生素B1，B2等，是人體生命活動必須的調(diào)節(jié)物質(zhì)。

2.4脂肪酸組成從鈍藥野木瓜中共檢出7種脂肪酸，分別為C14∶0，C15∶0，C16∶1(n-7) (棕櫚酸)，C16∶0，C18∶0，C18∶1(n-9) (油酸)和C18∶2(n-6) (亞油酸)，占脂肪酸總量為2.1%，1.57%，2.3%，45.37%，7.38%，21.02%和20.25%。其中C16∶1(n-7)，C18∶1(n-9)和C18∶2(n-6) 3種在脂肪酸總量中占比比較高，分別為45.37%，21.02%和20.25%。飽和脂肪酸(SFA)占比為56.41%，單不飽和脂肪酸(MUFA)占比為23.32%，多不飽和脂肪酸(PUFA)即亞油酸占比20.25%。

表1 鈍藥野木瓜礦質(zhì)元素含量

注： “*”標記為GB 2762-2017《食品安全國家標準食品中污染物限量》中的重金屬污染物

Note:“*” indicates the heavy metal pollutants stipulated in GB 2762-2017 “National Food Safety Standard Maximum Levels of Contaminants in Food” of China.

表2 鈍藥野木瓜維生素含量

2.5氨基酸組成鈍藥野木瓜氨基酸種類及含量結(jié)果見表3，共檢測出15種氨基酸，總含量1 813.8 mg·kg-1，有人體8種必需氨基酸中的7種，必需氨基酸占總氨基酸含量的41.14%，其中以蘇氨酸和賴氨酸含量較高。人體不能自身合成L-賴氨酸，必須從食物中攝取[10-12]，鈍藥野木瓜果實含量達到160.1 mg·kg-1，食用鈍藥野木瓜能在一定程度上補充人體必需的賴氨酸。

表3 鈍藥野木瓜氨基酸組成

注：EAA-必需氨基酸總量；TAA-氨基酸總量；“*”標記為人體必需氨基酸

Note: EAA-essential amino acids; TAA- total amino acids;“*” indicates essential amino acids in humans

3 討 論

營養(yǎng)成分分析結(jié)果表明，鈍藥野木瓜成熟果實營養(yǎng)成分豐富且全面，含有多種礦質(zhì)元素、維生素、氨基酸等成分。其藤莖和葉被列為貴州省民族藥材，具有袪風活絡，利水消腫的功效。其成熟果實水分含量、總糖占比高，單寧含量為1 865.8 mg·kg-1，鉀、鈣、鎂、鈉、錳的含量均高于王紹美等分析的鮮木瓜果實中的含量[10]，鉀元素含量高于白花木瓜[13]、光皮木瓜[14]、皺皮木瓜[15]等。在脂肪酸組成中含有占比達20.25%的亞油酸，而人體不能合成亞油酸，且亞油酸是公認的一種必需脂肪酸[16-17]。鈍藥野生木瓜含15種氨基酸，其中有7種人體必需氨基酸，而賴氨酸含量達到160.1 mg·kg-1，高于王紹美等分析的鮮木瓜果實中的賴氨酸含量[10]，與尹繼庭等分析的白花木瓜含量相當[15]，必需氨基酸含量占比也與木瓜和白花木瓜相當[16]。

綜上所述，鈍藥野木瓜果實營養(yǎng)成分豐富多樣，且含有多種礦質(zhì)元素、維生素、氨基酸等成分在食品、飼料、醫(yī)藥等方面均具有較大的發(fā)展?jié)摿?，有待進一步開發(fā)利用。