丁香酚對(duì)長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)麻醉效果的研究

張建明，田 甜，姜 偉

(1.中國(guó)長(zhǎng)江三峽集團(tuán)有限公司中華鱘研究所, 湖北 宜昌 443100;2.三峽工程魚(yú)類資源保護(hù)湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 湖北 宜昌 443100)

【研究意義】長(zhǎng)薄鰍(Leptobotiaelongate，Bleeker)，又稱薄鰍、花鰍，屬鰍科(Cobitidae)、沙鰍亞科(Botiinae)、薄鰍屬(Leptobotia)，系長(zhǎng)江珍稀特有魚(yú)類，自1998年起正式列入中國(guó)瀕危動(dòng)物紅皮書(shū)[1]。近年來(lái)，受過(guò)度捕撈、環(huán)境污染等人為因素的影響，長(zhǎng)薄鰍的棲息環(huán)境受到嚴(yán)重影響，導(dǎo)致其數(shù)量越來(lái)越少，種群結(jié)構(gòu)日益發(fā)生變化，親魚(yú)數(shù)量不足，個(gè)體呈現(xiàn)小齡化趨勢(shì)，長(zhǎng)薄鰍已達(dá)三級(jí)急切保護(hù)程度[2]。國(guó)內(nèi)進(jìn)行了有關(guān)長(zhǎng)薄鰍生物學(xué)特征、苗種培育、生長(zhǎng)發(fā)育、血液學(xué)、急性毒性試驗(yàn)等[3-7]方面的研究?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】魚(yú)體麻醉能有效抑制魚(yú)類在操作中的應(yīng)激反應(yīng)，對(duì)魚(yú)類起到保護(hù)作用。不同類型的操作需要不同濃度的麻醉劑進(jìn)行麻醉，以期達(dá)到適宜于操作的目的，同時(shí)最大程度降低對(duì)魚(yú)體的傷害，如長(zhǎng)途運(yùn)輸、魚(yú)體標(biāo)記、生物學(xué)性狀觀察測(cè)量等操作需要區(qū)別對(duì)待，針對(duì)不同類型的操作，進(jìn)行不同程度的麻醉。丁香酚(Eugenol)又稱丁香油、丁香油酚，是一種油狀的有類似于丁香香味的天然化合物，廣泛存在于丁香油、肉桂葉油、樟腦油等芳香油中，對(duì)魚(yú)類有強(qiáng)烈的麻醉作用。丁香酚已被智利、新西蘭、澳大利亞等多國(guó)認(rèn)定為沒(méi)有殘留期的合法水產(chǎn)麻醉劑，被廣泛用于魚(yú)類的麻醉[8]。【本研究切入點(diǎn)】在魚(yú)類麻醉研究方面已經(jīng)對(duì)中華鱘(Acipensersinensis)、斑馬魚(yú)(Daniorerio)、鯉魚(yú)(Cyprinuscarpio)、羅非魚(yú)(Oreochromisspp.)、斑點(diǎn)叉尾鮰(Ictaluruspunctatus)等多種魚(yú)類開(kāi)展了相關(guān)麻醉研究工作[9-12]，但丁香酚對(duì)長(zhǎng)薄鰍的麻醉研究尚未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道?！緮M解決的關(guān)鍵問(wèn)題】為此，本試驗(yàn)開(kāi)展了丁香酚對(duì)長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)麻醉效果的研究，旨在為丁香酚在長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)的長(zhǎng)途運(yùn)輸、標(biāo)記放流等人為操作方面提供參考數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)魚(yú)為中國(guó)長(zhǎng)江三峽集團(tuán)公司中華鱘研究所云南烏東德水電站魚(yú)類增殖放流站人工培育的長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)。挑選體格健康、行動(dòng)敏捷、無(wú)病無(wú)傷、規(guī)格基本一致的幼魚(yú)用于試驗(yàn)，試驗(yàn)魚(yú)規(guī)格為平均體長(zhǎng)(5.57±0.29)cm，平均體質(zhì)量(1.95±0.24)g，試驗(yàn)前在圓形暫養(yǎng)池(直徑3 m，水深0.7 m)中暫養(yǎng)5 d，試驗(yàn)開(kāi)始前2 d及試驗(yàn)期間不投喂。

試驗(yàn)用丁香酚由上海麥克林生化科技有限公司提供，含量99 %。使用前按丁香酚與無(wú)水乙醇1∶9比例配制溶液。

1.2 試驗(yàn)條件

試驗(yàn)在塑料盆內(nèi)進(jìn)行，試驗(yàn)用水為經(jīng)過(guò)曝氣和靜止沉淀后的金沙江水，水溫(22±1)℃，溶氧保持在6.0 mg/L以上。試驗(yàn)期間保持試驗(yàn)場(chǎng)所安靜、減少外界干擾對(duì)魚(yú)類造成的影響。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)麻醉階段和復(fù)蘇過(guò)程的分期觀察 選取5尾長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)置于60 mg/L的丁香酚麻醉液中進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，觀察魚(yú)體麻醉階段和復(fù)蘇過(guò)程中的行為變化，記錄各個(gè)麻醉階段和復(fù)蘇過(guò)程中的行為變化特征。根據(jù)長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)的試驗(yàn)觀察結(jié)果，并參考郭豐紅及劉長(zhǎng)琳等[13-14]的分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，將長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)麻醉程度劃分為Ⅰ～Ⅶ期(各階段分期名稱及行為特征詳見(jiàn)表1)，復(fù)蘇過(guò)程劃分為Ⅰ～Ⅳ期，各階段分期名稱及行為特征詳見(jiàn)表2。

1.3.2 不同濃度丁香酚麻醉劑對(duì)長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)的麻醉效果 根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，設(shè)計(jì)6個(gè)丁香酚濃度梯度，分別為20、40、60、80、100、120 mg/L，每個(gè)濃度梯度3個(gè)重復(fù)。每組試驗(yàn)選取10尾長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)，試驗(yàn)過(guò)程中記錄長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)的麻醉時(shí)間、復(fù)蘇時(shí)間、復(fù)蘇率、72 h存活率等指標(biāo)。麻醉所需時(shí)間是指魚(yú)被放進(jìn)麻醉劑溶液開(kāi)始到魚(yú)體側(cè)翻的時(shí)間，復(fù)蘇所需時(shí)間是指麻醉魚(yú)放入清水中開(kāi)始至魚(yú)的行為完全恢復(fù)正常狀態(tài)所需的時(shí)間。

表1 長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)麻醉程度分期及行為特征

表2 長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)復(fù)蘇過(guò)程分期及行為特征

1.3.3 不同濃度丁香酚麻醉劑對(duì)長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)呼吸頻率的影響 試驗(yàn)設(shè)置20、40、60、80、100、120 mg/L等6個(gè)濃度處理組，每組10尾長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)。呼吸頻率是指1 min內(nèi)魚(yú)體的呼吸次數(shù)，1次呼吸是以魚(yú)體鰓蓋一張一合為準(zhǔn)，統(tǒng)計(jì)連續(xù)呼吸30 s時(shí)各處理組長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)的呼吸次數(shù)，然后換算為1 min內(nèi)呼吸次數(shù)即為魚(yú)體對(duì)應(yīng)的呼吸頻率。每個(gè)處理組長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)的呼吸頻率取10尾長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)的平均值。

1.3.4 在空氣中暴露時(shí)間長(zhǎng)短對(duì)深度麻醉長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)復(fù)蘇的影響 為研究麻醉后離水操作的可行性，選用60 mg/L的丁香酚濃度對(duì)長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)進(jìn)行麻醉，待魚(yú)體麻醉后，將試驗(yàn)魚(yú)置于空氣中進(jìn)行暴露，暴露時(shí)間分別為2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26 min，之后轉(zhuǎn)入清水進(jìn)行復(fù)蘇，記錄復(fù)蘇所需時(shí)間、復(fù)蘇率及72 h存活率，每組10尾試驗(yàn)魚(yú)。

1.3.5 模擬長(zhǎng)途運(yùn)輸試驗(yàn) 選取4種模式對(duì)長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)進(jìn)行模擬長(zhǎng)途運(yùn)輸試驗(yàn)。模式1：長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)直接放入10 mg/L丁香酚麻醉液中連續(xù)浸泡10 h；模式2：長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)直接放入20 mg/L丁香酚麻醉液中連續(xù)浸泡10 h；模式3：長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)經(jīng)60 mg/L的丁香酚麻醉后，立即轉(zhuǎn)入10 mg/L丁香酚麻醉液中連續(xù)浸泡10 h；模式4：長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)經(jīng)60 mg/L的丁香酚麻醉后，立即轉(zhuǎn)入20 mg/L丁香酚麻醉液中連續(xù)浸泡10 h。試驗(yàn)期間各組微充氣保證溶氧，浸泡10 h后放入清水進(jìn)行復(fù)蘇，觀察統(tǒng)計(jì)各組的鎮(zhèn)靜效果、復(fù)蘇率及成活率，每組10尾試驗(yàn)魚(yú)。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)通過(guò)Excel軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，試驗(yàn)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差的形式表示，采用SPSS19.0軟件進(jìn)行單因素方差分析(One-way ANOVA)。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同濃度丁香酚麻醉劑對(duì)長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)的麻醉效果

從表3中可知，20～120 mg/L質(zhì)量濃度的丁香酚均能使長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)進(jìn)入第Ⅴ期(麻醉期)，并且麻醉后及時(shí)進(jìn)行復(fù)蘇的復(fù)蘇率均為100 %，復(fù)蘇后72 h內(nèi)的存活率也均為100 %；同時(shí)，從試驗(yàn)結(jié)果的多重比較得知，20、40 mg/L試驗(yàn)組的入麻時(shí)間與其它各組存在顯著差異(P<0.05)；60與80 mg/L試驗(yàn)組差異不顯著(P>0.05)，與其它各組差異顯著(P<0.05)；80 mg/L試驗(yàn)組與60、100 mg/L試驗(yàn)組差異不顯著(P>0.05)，與其余各組差異顯著(P<0.05)；100 mg/L試驗(yàn)組與80、120 mg/L試驗(yàn)組差異不顯著(P>0.05)，與其余各組差異顯著(P<0.05)；120 mg/L試驗(yàn)組與100 mg/L試驗(yàn)組差異不顯著(P>0.05)，與其余各組差異顯著(P<0.05)。不同組別之間復(fù)蘇所用時(shí)間均存在顯著差異(P<0.05)。

丁香酚濃度在20～120 mg/L范圍內(nèi)，平均入麻時(shí)間隨著丁香酚麻醉劑濃度的增加而減少，兩者呈負(fù)相關(guān)(圖1)，通過(guò)回歸計(jì)算得知，丁香酚濃度與平均入麻時(shí)間的相關(guān)關(guān)系為：y=232x-1.328，R2=0.9831；式中y為入麻所需時(shí)間(s)，x為丁香酚濃度(mg/L)。平均復(fù)蘇時(shí)間隨著丁香酚濃度的增加而增加，復(fù)蘇時(shí)間與丁香酚濃度呈正相關(guān)(圖1)，通過(guò)回歸計(jì)算得知，丁香酚濃度與平均復(fù)蘇時(shí)間的相關(guān)關(guān)系為：y=61.297x+95.027，R2=0.9802；式中y為平均復(fù)蘇時(shí)間(s)，x為丁香酚濃度(mg/L)。隨著麻醉劑量的增大，復(fù)蘇所需的時(shí)間也在增加，在高劑量(≥80 mg/L)麻醉劑濃度下，復(fù)蘇時(shí)間超過(guò)了Marking等[15]認(rèn)為的理想麻醉有效濃度，對(duì)魚(yú)的影響較大。

圖1 不同濃度丁香酚對(duì)長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)入麻時(shí)間和復(fù)蘇時(shí)間的影響Fig.1 Effects of different concentrations of eugenol on anesthesia time and recovery time of juvenile elongateloach

處理濃度(mg·L-1)Concentration麻醉所用時(shí)間(s)Anesthesia time復(fù)蘇所用時(shí)間(s)Recovery time范圍Range均值Mean范圍Range均值Mean復(fù)蘇率( %)Recovery rate72 h存活率( %)Survival rate of 72 hours20239～278257.20±16.32a167～181172.20±5.93a1001004063～8776.20±10.73b198～227212.20±11.26b1001006043～5352.40±7.13c256～291274.40±13.99c1001008031～5039.60±6.91cd307～351326.00±17.78d10010010025～3930.20±5.54de362～410385.80±17.68e10010012013～3020.40±6.47e433～534486.80±17.18f100100

注：同列數(shù)據(jù)中具相同小寫(xiě)肩標(biāo)字母的表示組間無(wú)顯著差異，具不同小寫(xiě)肩標(biāo)字母的表示組間差異顯著(LSD多重比較，P<0.05)。

Note: There was no significant difference between the groups in the same column with the same lowercase and shoulder acronym, with different lowercase and shoulder acronyms indicating significant differences between groups (LSD multiple comparisons,P<0.05).

2.2 不同濃度丁香酚麻醉劑對(duì)長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)呼吸頻率的影響

如圖2所示，當(dāng)試驗(yàn)魚(yú)放入麻醉液中后，各試驗(yàn)組長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)呼吸頻率均在短時(shí)間呈現(xiàn)出上升趨勢(shì)，之后在整個(gè)麻醉過(guò)程中呈現(xiàn)下降趨勢(shì)；對(duì)照組中長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)的呼吸頻率在整個(gè)觀察過(guò)程中沒(méi)有出現(xiàn)較大程度的變化。20、40 mg/L試驗(yàn)組長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)的呼吸頻率在經(jīng)歷了先升后降的過(guò)程之后，呼吸頻率趨于穩(wěn)定，在一定的區(qū)間內(nèi)小幅度的變化；60～120 mg/L范圍內(nèi)各試驗(yàn)組中的長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)呼吸頻率經(jīng)歷小幅上升之后，均呈現(xiàn)直線下降趨勢(shì)，并進(jìn)入第Ⅶ期(休克期)。

2.3 在空氣中暴露時(shí)間長(zhǎng)短對(duì)深度麻醉長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)復(fù)蘇的影響

由表4可知，以60 mg/L丁香酚將長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)麻醉后再在空氣中進(jìn)行暴露，隨著暴露時(shí)間的增加，復(fù)蘇所用的時(shí)間減少，其中暴露2、4、6 min試驗(yàn)組復(fù)蘇用時(shí)與其它各組存在顯著性差異(P<0.05)，而暴露8～26 min試驗(yàn)組之間的復(fù)蘇用時(shí)差異性不顯著(P>0.05)。暴露時(shí)間在2～24 min范圍內(nèi)的復(fù)蘇率和72 h存活率均為100 %，當(dāng)時(shí)間增加至26 min時(shí)，復(fù)蘇率降低到了70 %，72 h存活率僅為40 %。

圖2 不同濃度丁香酚麻醉劑對(duì)長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)呼吸頻率的影響Fig.2 Effect of different concentrations of eugenol on respiration rate of juvenile elongateloach

2.4 模擬長(zhǎng)途運(yùn)輸試驗(yàn)

由表5可知，長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)直接放入10 mg/L丁香酚麻醉液中連續(xù)浸泡10 h(模式1)，試驗(yàn)魚(yú)始終處于鎮(zhèn)靜期，復(fù)蘇率和成活率均為100 %；長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)直接放入20 mg/L丁香酚麻醉液中連續(xù)浸泡10 h(模式2)，試驗(yàn)魚(yú)始終處于麻醉期，復(fù)蘇率和成活率均為100 %；長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)經(jīng)60 mg/L的丁香酚麻醉后，立即轉(zhuǎn)入10 mg/L丁香酚麻醉液中連續(xù)浸泡10 h(模式3)，試驗(yàn)魚(yú)能夠調(diào)整身體保持正常狀態(tài)，可以從麻醉期轉(zhuǎn)入鎮(zhèn)靜期，之后始終保持在鎮(zhèn)靜期，復(fù)蘇率和成活率均為100 %；長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)經(jīng)60 mg/L的丁香酚麻醉后，立即轉(zhuǎn)入20 mg/L丁香酚麻醉液中連續(xù)浸泡10 h(模式4)，試驗(yàn)魚(yú)未從麻醉期轉(zhuǎn)入鎮(zhèn)靜期，反而麻醉程度進(jìn)一步加深，之后進(jìn)入休克期，復(fù)蘇率和成活率均為0。

3 討 論

3.1 丁香酚對(duì)長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)麻醉的有效質(zhì)量濃度

魚(yú)體麻醉后要需經(jīng)歷觸覺(jué)喪失期、興奮期和麻醉期這3個(gè)時(shí)期[16]。在水溫(22±1)℃條件下，20～120 mg/L的丁香酚麻醉液均能使長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)經(jīng)歷上述3個(gè)階段，且麻醉濃度與與平均入麻時(shí)間呈負(fù)相關(guān)，與平均復(fù)蘇時(shí)間呈正相關(guān)。這與丁香酚對(duì)蘇氏圓腹魚(yú)芒(Pangasiussutchi)[17]和日本黃姑魚(yú)(Nibeajaponica)[18]麻醉效果的研究結(jié)果相一致。本試驗(yàn)的研究結(jié)果表明20～120 mg/L的丁香酚麻醉液均能使長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)進(jìn)入麻醉階段，并可以完全復(fù)蘇，Marking等[15]認(rèn)為3 min內(nèi)能夠麻醉、并且5 min內(nèi)能夠蘇醒是理想麻醉劑的公認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)，按照此標(biāo)準(zhǔn)，40～60 mg/L的丁香酚麻醉液是長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)的理想麻醉濃度。此外，麻醉劑的麻醉效果還與魚(yú)體規(guī)格、水溫、水質(zhì)等因素有關(guān)[19-20]，相關(guān)的麻醉效果有待進(jìn)一步研究闡明。

表4 空氣中暴露時(shí)間長(zhǎng)短對(duì)深度麻醉長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)復(fù)蘇的影響

注：表中所示72 h存活率指72 h后存活的試驗(yàn)魚(yú)數(shù)量占該組試驗(yàn)魚(yú)總數(shù)的百分比。同列數(shù)據(jù)中具相同小寫(xiě)字母的表示組間無(wú)顯著差異，具不同小寫(xiě)字母的表示組間差異顯著(LSD多重比較，P<0.05)。

Note: The 72 hours survival rate showed in the table refers to the percentage of test fish surviving after 72 hours as a percentage of the total number of test fish in the group. There was no significant difference between the groups in the same column with the same lowercase and shoulder acronym, with different lowercase and shoulder acronyms indicating significant differences between groups (LSD multiple comparisons,P<0.05).

表5 不同運(yùn)輸模式對(duì)長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)的影響

3.2 丁香酚對(duì)長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)呼吸頻率的影響

呼吸頻率因麻醉程度不同而呈現(xiàn)變化。麻醉初期藥物首先作用于血液循環(huán)系統(tǒng)，呼吸頻率稍有變化，隨著麻醉時(shí)間的延長(zhǎng)，藥物進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)，從而導(dǎo)致行為能力和呼吸頻率均出現(xiàn)明顯變化。關(guān)于麻醉劑對(duì)魚(yú)體呼吸頻率的影響，一般認(rèn)為魚(yú)體呼吸頻率呈現(xiàn)先上升后下降趨勢(shì)，例如鱖(Sinipercachuatsi)[13]、圓斑星鰈(Veraspervariegates)[19]、鯉(Cyprinuscarpio)[21]等。本試驗(yàn)研究結(jié)果與其相似，各濃度組長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)呼吸頻率均呈現(xiàn)先上升后下降趨勢(shì)，且隨著麻醉劑質(zhì)量濃度的升高，呼吸頻率下降越來(lái)越快。在丁香酚濃度≤40 mg/L時(shí)，長(zhǎng)薄鰍呼吸頻率下降呈漸變趨勢(shì)，且后期趨于穩(wěn)定；在丁香酚濃度≥60 mg/L時(shí)，呼吸頻率基本上呈現(xiàn)直線下降趨勢(shì)，且進(jìn)入休克期?？梢?jiàn)麻醉劑劑量對(duì)魚(yú)體呼吸頻率具有較大影響，這與丁香酚麻醉許氏平鮋(Sebastesschlegelii)[22]、黃臘鲹(Trachinotusblochii)[23]等研究結(jié)果相一致。

3.3 空氣中暴露時(shí)間對(duì)長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)復(fù)蘇的影響

研究在空氣中暴露時(shí)間長(zhǎng)短對(duì)深度麻醉魚(yú)體復(fù)蘇的影響，對(duì)于活體離水操作具有一定的指導(dǎo)意義[16]。以60 mg/L丁香酚將長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)麻醉后再在空氣中進(jìn)行暴露，隨著暴露時(shí)間的增加，復(fù)蘇所用的時(shí)間減少，這可能是因?yàn)樵诒┞哆^(guò)程中長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)在不斷的對(duì)丁香酚麻醉劑進(jìn)行代謝導(dǎo)致進(jìn)入體內(nèi)的麻醉劑濃度降低造成的，這與丁香酚對(duì)蘇氏圓腹魚(yú)芒(Pangasiussutchi)[17]和鯽魚(yú)(Carassiusauratus)[20]的麻醉研究結(jié)果相似。同時(shí)，試驗(yàn)研究表明暴露2～24 min試驗(yàn)各組的復(fù)蘇率和72 h存活率均為100 %，當(dāng)暴露時(shí)間增加至26 min時(shí)，復(fù)蘇率降低到了70 %，72 h存活率僅為40 %。因此，麻醉后對(duì)長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)進(jìn)行稱重、測(cè)量、體外標(biāo)記等離水操作時(shí)，需將操作時(shí)間控制在26 min以內(nèi)，以確保長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)的安全。

3.4 丁香酚在長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)長(zhǎng)途運(yùn)輸中的安全性

活魚(yú)運(yùn)輸中使用麻醉劑既可以提高成活率又可以有效的增加運(yùn)輸距離[23]。麻醉劑的麻醉劑量對(duì)活魚(yú)運(yùn)輸具有重要意義，過(guò)高或過(guò)低均無(wú)法滿足運(yùn)輸需求。為了進(jìn)一步驗(yàn)證丁香酚對(duì)長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)長(zhǎng)途運(yùn)輸?shù)陌踩?，設(shè)計(jì)4種模擬長(zhǎng)途運(yùn)輸試驗(yàn)，研究結(jié)果表明：長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)直接放入10 mg/L丁香酚麻醉液中連續(xù)浸泡10 h，試驗(yàn)魚(yú)始終處于鎮(zhèn)靜期，復(fù)蘇率和成活率均為100 %，這是由于10 mg/L丁香酚麻醉液不能使長(zhǎng)薄鰍進(jìn)入麻醉期，而是長(zhǎng)期處于鎮(zhèn)靜期，既滿足了降低長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)的代謝，又未產(chǎn)生傷害；長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)直接放入20 mg/L丁香酚麻醉液中連續(xù)浸泡10 h，試驗(yàn)魚(yú)始終處于麻醉期，復(fù)蘇率和成活率均為100 %，這種模式雖然復(fù)蘇率和成活率均為100 %，但在整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程中長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)始終處在麻醉階段，這可能因長(zhǎng)期處于麻醉期會(huì)對(duì)其內(nèi)臟器官、神經(jīng)系統(tǒng)造成一定的傷害；長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)經(jīng)60 mg/L的丁香酚麻醉后，立即轉(zhuǎn)入10 mg/L丁香酚麻醉液中連續(xù)浸泡10 h，試驗(yàn)魚(yú)能夠調(diào)整身體保持正常狀態(tài)，可以從麻醉期轉(zhuǎn)入鎮(zhèn)靜期，之后始終保持在鎮(zhèn)靜期，復(fù)蘇率和成活率均為100 %，這種模式下長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)能夠從麻醉期轉(zhuǎn)入鎮(zhèn)靜期，可能是長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)在10 mg/L丁香酚麻醉液中能夠通過(guò)代謝不斷的降低體內(nèi)的麻醉液濃度而未長(zhǎng)時(shí)間的處于麻醉階段，對(duì)魚(yú)體影響較小，這種模式可以進(jìn)一步的降低在運(yùn)輸裝車、打包等環(huán)節(jié)的應(yīng)激反應(yīng)；長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)經(jīng)60 mg/L的丁香酚麻醉后，立即轉(zhuǎn)入20 mg/L丁香酚麻醉液中連續(xù)浸泡10 h，試驗(yàn)魚(yú)沒(méi)有從麻醉期轉(zhuǎn)入鎮(zhèn)靜期，反而麻醉程度進(jìn)一步加深，之后進(jìn)入休克期，復(fù)蘇率和成活率均為0，這可能是長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)在轉(zhuǎn)入20 mg/L丁香酚麻醉液中后，不能對(duì)體內(nèi)高濃度的麻醉劑進(jìn)行有效代謝造成的。學(xué)者們研究認(rèn)為深度鎮(zhèn)靜期是最適宜的運(yùn)輸時(shí)期[24-25]。建議采用10 mg/L丁香酚麻醉液和經(jīng)60 mg/L的丁香酚麻醉后立即轉(zhuǎn)入10 mg/L丁香酚麻醉液的運(yùn)輸模式，對(duì)長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)的影響較小，適合于長(zhǎng)途運(yùn)輸，可推廣至實(shí)踐應(yīng)用中。

4 結(jié) 論

40～60 mg/L的丁香酚麻醉液是長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)的理想麻醉濃度；以60 mg/L丁香酚將長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)麻醉后對(duì)其進(jìn)行稱重、測(cè)量、體外標(biāo)記等離水操作時(shí)，需將操作時(shí)間控制在26 min以內(nèi)，以確保長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)的安全；采用10 mg/L丁香酚麻醉液和經(jīng)60 mg/L的丁香酚麻醉后立即轉(zhuǎn)入10 mg/L丁香酚麻醉液的運(yùn)輸模式，可使長(zhǎng)薄鰍進(jìn)入鎮(zhèn)靜期，且對(duì)試驗(yàn)魚(yú)影響較小，推薦作為長(zhǎng)薄鰍幼魚(yú)長(zhǎng)途運(yùn)輸模式。