廣元市曾家山?jīng)錾较x草資源調(diào)查及人工栽培研究

閆寶榮，蒲遠(yuǎn)波，孫學(xué)才

(川北幼兒師范高等專科學(xué)校，四川 廣元 628017)

涼山蟲草CordycepsliangshanensisZang，Liuet Hu 始載于《四川通志》，是1982年發(fā)現(xiàn)的新物種，為麥角菌科真菌寄生于鱗翅目昆蟲幼蟲的體內(nèi)，產(chǎn)生的菌核及子座[1]。涼山蟲草是四川省涼山州藥品檢驗(yàn)所于1979年在涼山州雷波縣一帶發(fā)現(xiàn)的，主要產(chǎn)于四川、云南等省區(qū)，為西南地區(qū)的特有種，分布于海拔較低的山區(qū)。涼山蟲草入藥性甘、味平、歸腎、肺經(jīng)，具有補(bǔ)肺益腎的功效，主治虛喘勞嗽，具有極高的藥用價值[2]?；瘜W(xué)成份和藥理作用與冬蟲夏草相似，可作為冬蟲夏草的替代品。但野生涼山蟲草資源有限，不能滿足日益增加的市場需求，為了更好地利用和保護(hù)，開展涼山蟲草的人工栽培研究，意義深遠(yuǎn)。廣元市曾家山國有林場在1989年發(fā)現(xiàn)了野生涼山蟲草，顏色主要為褐色或黑褐色，蟲體肥大，子座多單一，分枝纖細(xì)而曲折，高20～30 cm，粗1.5～2.5 mm，頭部圓柱狀或棒狀[2](圖1)。

1 化學(xué)成分

涼山蟲草含門冬氨酸、蘇氨酸、絲氨酸、甘氨酸、丙氨酸、黃丙氨酸、纈氨酸、蛋氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸、組氨酸、精氨酸、脯氨酸、谷氨酸等17種氨基酸。此外，還含有甘露醇、麥角甾醇、腺苷、硬脂酸、生物堿及有機(jī)酸[3～4]。涼山蟲草的氨基酸總含量為34.21%，冬蟲夏草為39.22%；涼山蟲草的甘露醇含量為5.02%，冬蟲夏草為5.185。

由于涼山蟲草化學(xué)成份和藥理作用與冬蟲夏草相似，還含鈷(0.50)、鎳(0.95)、鎘(0.01)、鉻(2.72)、鉛(1.95)、鎂(23.50)、銅(14.72)、鍶(5.35)、釩(18.18)、鐵(822.5)、鋅(55.59)、硼(8.62)和錳(34.65)等微量元素(μg·g-1)[5]。因此，可作為冬蟲夏草的替代品，具有較高的藥用價值。

圖1 涼山蟲草

2 生長習(xí)性

在曾家國有林區(qū)，涼山蟲草大多生長在海拔1 500～1 800 m的陰坡地，特別是低洼處，旱陽坡地和晚陽坡地也有少量分布。分析其土壤狀況，主要是黃壤，砂壤土中亦有分布。并且此類土壤的地表覆蓋有半尺厚的黑褐色腐殖質(zhì)層，腐殖質(zhì)層上覆蓋有約1.5～3 cm厚未腐爛的枯枝和落葉。從植被條件來看，涼山蟲草通常分布在雜草較少，木竹茂密的林中，林中青杠樹等殼斗科植物較為常見，亦有楊柳科植物和野櫻桃等。從含水量方面來看，土壤和枯枝落葉上含水量較多的地段易生長蟲草。從氣候條件來看，廣元市曾家山地區(qū)年平均氣溫較低，每年11月到來年2-3月為積雪期，為涼山蟲草的生長提供了較適宜的氣候條件。

3 蟲草資源調(diào)查

通過實(shí)地調(diào)查和訪問座談，曾家山的涼山蟲草在歷史上有過相當(dāng)大的數(shù)量，但近年來面積和數(shù)量不斷減少。原因一是自然生態(tài)環(huán)境的改變，過去木竹、闊葉林、針葉林所構(gòu)成的混交林是涼山蟲草生長的理想環(huán)境。二是濫采亂挖等人為破壞現(xiàn)象比較嚴(yán)重。在曾家國有林場初建立時有人只用半天時間就曾采到兩斤蟲草，足見歷史上分布之多，產(chǎn)量之大。

根據(jù)蟲草藥用的最佳時間和蟲草自然生長周期制定出調(diào)查方案，按照方案于2006年3月28日至4月26日對曾家山的涼山蟲草進(jìn)行了實(shí)地調(diào)查，結(jié)果見表1：

表1 曾家山各地涼山蟲草分布情況

4 涼山蟲草人工栽培

(1)采挖野生涼山蟲草，分離培養(yǎng)出野生涼山蟲草菌絲。

采集野生的涼山蟲草進(jìn)行菌種的分離、純化，然后將涼山蟲草菌接種在固體培養(yǎng)基上,于20～25℃及一定的濕度和光照條件下培養(yǎng)，培養(yǎng)基選用PDA培養(yǎng)基或加富培養(yǎng)基[6～8]。

(2)培養(yǎng)出的野生涼山蟲草菌絲成功接種入寄主家蠶體內(nèi)。

分別采用注射法、浸漬法和液體菌種噴灑等方法進(jìn)行接種試驗(yàn)，具體做法有以下四種：①在鮮桑葉上涂蟲草孢子(溶化瓊脂，冷后加入蟲草孢子，孢子在桑葉上就會沾貼緊密)，目的是讓家蠶吃桑葉的同時，食入蟲草孢子染病。②在家蠶體上涂蟲草孢子液，目的是讓蠶體上的孢子萌發(fā)入寄主體內(nèi)而染病。③在蠶體上涂蟲草孢子液的同時，也在給蠶喂食的桑葉上涂孢子液，觀察其感染情況。④將液體菌種注射入蠶蛹體內(nèi)，觀察感染情況。接種時注意要在無菌條件下進(jìn)行[9～11]。結(jié)果表明，液體菌種注射法效果最好。

(3)將已接種的蛹體埋入適宜蟲草生長的土壤環(huán)境中，等待長出子實(shí)體后采挖蟲草。

2016年4月1日和5月29日，去曾家國有林場采集野生“涼山蟲草”，進(jìn)行了蟲草菌絲分離培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)?，F(xiàn)已有25條蛹體已著生蟲草菌絲。12月4日已將感染菌絲的蛹體20根，消毒滅菌后裝入試管中，在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行恒溫培養(yǎng)，并有部分埋入曾家國有林場曾經(jīng)挖到蟲草的土壤中，等待長出子實(shí)體。

5 蟲草資源的合理開發(fā)與保護(hù)

隨著生態(tài)環(huán)境的破壞日趨嚴(yán)重，以及過度采集，廣元曾家山野生涼山蟲草資源日愈貧乏。因此，必須采取保護(hù)與利用相結(jié)合的方針，合理利用蟲草資源，并積極開展人工栽培研究，實(shí)現(xiàn)當(dāng)?shù)叵x草資源可持續(xù)利用。根據(jù)當(dāng)前較為普遍存在的問題，提出以下建議：

一是加強(qiáng)林地的保護(hù)和管理，禁止亂采濫挖。近年來，當(dāng)?shù)厝罕娭鸩搅私饬藳錾较x草的藥用價值和經(jīng)濟(jì)價值，私采私挖現(xiàn)象較為普遍，生態(tài)環(huán)境遭到破壞，產(chǎn)量有所下降。希望政府部門引起重視，并制定相關(guān)條例規(guī)定，制止這種一窩蜂的混采現(xiàn)象。涼山蟲草是能夠自我繁殖更新的自然資源，如果保護(hù)管理得當(dāng)，處理好長遠(yuǎn)利益和近期效益的關(guān)系，加強(qiáng)生態(tài)環(huán)境的保護(hù)，就能實(shí)現(xiàn)蟲草資源的可持續(xù)開發(fā)利用。

二是加強(qiáng)林地病蟲害防治，保護(hù)涼山蟲草的生態(tài)環(huán)境。曾家山國有林地新種樹木主要是以日本落葉松為主，這種較單一的生態(tài)環(huán)境易受病蟲害威脅。因此，曾家山國有林場的病蟲害防治應(yīng)受到林業(yè)部門的高度重視，以保護(hù)涼山蟲草的野生環(huán)境，從而改善其自然生態(tài)環(huán)境，才能增加涼山蟲草的野生產(chǎn)量，保持最大的持續(xù)蘊(yùn)藏量，使得野生涼山蟲草資源能夠持續(xù)更新。

三是繼續(xù)做好資源調(diào)查，全面規(guī)劃。目前課題組已經(jīng)進(jìn)行了廣元市曾家國有林場的蟲草資源的初步調(diào)查，基本摸清了我市的蟲草種類和資源分布情況，初步研究掌握了其生物學(xué)特性和生態(tài)學(xué)規(guī)律。但是由于時間和人力等的限制，調(diào)查還不夠全面和深入。因此，還需進(jìn)一步摸清家底，對涼山蟲草資源進(jìn)行一次全面徹底的核查。需要高校和地方政府以及農(nóng)林業(yè)部門的通力配合，向當(dāng)?shù)厝罕姾土謽I(yè)工人了解第一手資料，明確每一山頭、每一鄉(xiāng)村涼山蟲草分布的確切位置及蘊(yùn)藏量，并制定綜合的資源保護(hù)措施，進(jìn)行全面規(guī)劃。野生涼山蟲草是本地非常寶貴的自然資源，高校和地方政府有義務(wù)，也有責(zé)任對這一重要資源做好全面規(guī)劃和保護(hù)。如果保護(hù)和開發(fā)利用得當(dāng)，該資源不僅會為當(dāng)?shù)乩习傩諑砬袑?shí)的經(jīng)濟(jì)效益，還會有力地推動廣元本地生態(tài)旅游康養(yǎng)名市的建設(shè)。

四是繼續(xù)進(jìn)行人工栽培研究，實(shí)現(xiàn)工廠化生產(chǎn)。課題組從2016年開始就進(jìn)行了涼山蟲草的人工栽培研究，取得了一定的進(jìn)展。菌絲的分離和蟲體的感染實(shí)驗(yàn)已獲成功，室內(nèi)和室外培養(yǎng)正在探索進(jìn)行。但目前仍存在很多問題，如采集的實(shí)驗(yàn)用野生涼山蟲草非常有限，實(shí)驗(yàn)條件較為落后，實(shí)驗(yàn)場地較為緊缺，經(jīng)費(fèi)不足等都限制了研究的進(jìn)展。另外，菌絲分離過程中方法單一、經(jīng)驗(yàn)不足，這些關(guān)鍵技術(shù)問題亟待取得突破。后續(xù)研究中，嘗試采用子實(shí)體分離法、孢子分離法等多種方法分離菌種，并對不同方法進(jìn)行比較，并取子實(shí)體的不同組織部位(如頂端、中部、根部)進(jìn)行試驗(yàn)研究。在消毒方式上，嘗試用無菌水沖洗3次、75%酒精浸泡30 s、1 min等多種方法反復(fù)試驗(yàn)，以期得到優(yōu)質(zhì)菌種。此外，對培養(yǎng)條件也要深入研究，找出最適的生長溫度和濕度。期望深入研究菌絲分離和培養(yǎng)方法，實(shí)現(xiàn)人工培養(yǎng)，最終為實(shí)現(xiàn)工廠化、規(guī)模化生產(chǎn)提供理論依據(jù)和數(shù)據(jù)支撐。

涼山蟲草從化學(xué)成分和藥理作用方面與名貴藥材冬蟲夏草極為相似，是值得開發(fā)利用的新資源，人工培育一旦成功，可作為冬蟲夏草的替代資源。從近年來的經(jīng)濟(jì)發(fā)展和市場綜合分析看，市場需求量大，經(jīng)濟(jì)效益好，開發(fā)應(yīng)用具有極大的市場潛力。但該自然資源在日趨減少，廣元本地野生資源非常有限，因此合理開發(fā)利用迫在眉睫，其人工栽培研究任重而道遠(yuǎn)。應(yīng)該加大投入力度，加快研究步伐，實(shí)現(xiàn)關(guān)鍵技術(shù)的突破，努力實(shí)現(xiàn)人工培育，將對地區(qū)經(jīng)濟(jì)發(fā)展和生態(tài)改善具有重要的意義。在栽培時，應(yīng)加強(qiáng)菌種的選育與保存，選育出優(yōu)質(zhì)菌種，液體發(fā)酵法生產(chǎn)菌絲體將是今后涼山蟲草產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)的重要發(fā)展方向。隨著人們對涼山蟲草的研究越來越深入，涼山蟲草這一藥用真菌必將具有更廣闊的開發(fā)應(yīng)用前景，為資源開發(fā)開拓新的領(lǐng)域。自然物種的保護(hù)是我們這一代人的責(zé)任，我們要不斷探索、推進(jìn)涼山蟲草的可持續(xù)開發(fā)利用，盡早實(shí)現(xiàn)人工栽培，為生態(tài)環(huán)境的改善和地方經(jīng)濟(jì)社會的發(fā)展不斷努力。