漳州市部分種豬場(chǎng)偽狂犬病gE抗體血清學(xué)調(diào)查

王藝娟

（福建省漳州市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，福建 漳州 363000）

豬偽狂犬病是由豬偽狂犬病病毒（Pseudorabies virus,PRV）引起的豬急性高度接觸性傳染病。豬是偽狂犬病病毒的貯存宿主，病豬、帶毒豬以及帶毒鼠類為本病重要傳染源。該病呈暴發(fā)性流行，可引起妊娠母豬流產(chǎn)、死胎；公豬不育，表現(xiàn)出睪丸腫脹、萎縮，喪失種用能力；肥育豬呼吸困難、生長(zhǎng)緩慢；新生仔豬出現(xiàn)拉稀、神經(jīng)癥狀和大量死亡等，這是危害全球養(yǎng)豬業(yè)的重大傳染病之一[1]。偽狂犬病病毒主要經(jīng)口鼻接觸、空氣飛沫、精液等途徑傳播，豬既是感染宿主，又是病毒的長(zhǎng)期貯存和排出者[2]。近幾年筆者發(fā)現(xiàn)豬場(chǎng)多發(fā)偽狂犬病，出現(xiàn)死胎或仔豬突然體溫升高，不食，間或有嘔吐或腹瀉，精神高度沉郁；部分病豬張口伸舌，運(yùn)動(dòng)失調(diào)，兩前肢張開或倒地抽搐；母豬配不上種，返情率高，甚至有反復(fù)配種數(shù)次都屢配不上的情況。目前最常用的檢測(cè)方法是運(yùn)用ELISA檢測(cè)gE抗體區(qū)分野毒和疫苗毒，這給豬場(chǎng)偽狂犬病的控制與凈化帶來便利條件[3]。另外PCR方法也是一種敏感快速的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法。本次血清學(xué)調(diào)查主要是通過對(duì)2017年漳州市部分種豬場(chǎng)采用偽狂犬病gE-ELISA抗體檢測(cè)，了解我市部分種豬場(chǎng)偽狂犬病帶毒情況，調(diào)查結(jié)果表明，我市部分種豬場(chǎng)仍存在偽狂犬病病毒感染。偽狂犬病gE抗體血清學(xué)調(diào)查，是為今后制定科學(xué)的偽狂犬病免疫程序和凈化方案作參考。1 材料與方法

1.1 被檢血清

2017年開始對(duì)漳州市11個(gè)縣（市、區(qū)）種豬場(chǎng)進(jìn)行摸底調(diào)查，分階段采血檢測(cè)，首先隨機(jī)采血26個(gè)種豬場(chǎng)種豬，每場(chǎng)抽樣數(shù)為30～70份不等，共抽檢806份。

1.2 檢測(cè)試劑盒

豬偽狂犬病gE抗體ELISA檢測(cè)試劑盒購自IDEXX公司。

1.3 檢測(cè)方法

試驗(yàn)操作及結(jié)果判定，參照試劑盒說明書操作進(jìn)行。具體方法如下：用樣品稀釋液將被檢樣品稀釋2倍，按要求加入陰陽性對(duì)照后，在其余的孔內(nèi)分別加入100 μL已稀釋好的被檢樣品→室溫下孵育1 h或2～7℃孵育過夜→用300 μL洗滌液洗滌板孔，重復(fù)3～5次→每孔加入100 μL辣根過氧化物酶標(biāo)記抗PRV gpI抗體→室溫下孵育20 min。用300 μL洗滌液洗滌板孔，重復(fù)3～5次→每孔加入100 μL TMB底物液→室溫下孵育15 min→每孔加入50 μL終止液→酶標(biāo)儀讀數(shù)OD650nm→結(jié)果判定S/N值≤0.60，樣品應(yīng)判定為PRV gE抗體陽性。

2 結(jié)果

根據(jù)gE-ELISA檢測(cè)結(jié)果顯示，被檢豬血清806份，gE陽性抗體127份，陽性率為15.76%，陽性樣品主要集中在4家種豬場(chǎng)，其余22家種豬場(chǎng)未檢出陽性抗體。

表1 種豬場(chǎng)的豬偽狂犬病檢測(cè)結(jié)果

3 分析與討論

（1）通過本次部分種豬場(chǎng)偽狂犬病gE抗體抽樣檢測(cè)情況調(diào)查，偽狂犬病野毒感染平均陽性率為15.76%，陽性場(chǎng)主要集中在龍海市和云霄縣，特別是龍海市種豬場(chǎng)感染率較高，說明我市部分種豬場(chǎng)仍存在豬場(chǎng)偽狂犬病病毒感染的情況，不同種豬場(chǎng)存在不同感染率，這可能與豬場(chǎng)的飼養(yǎng)環(huán)境、管理水平、免疫情況、豬群個(gè)體差異等因素相關(guān)，對(duì)于高感染率的豬場(chǎng)，及時(shí)分析原因，制定科學(xué)的免疫程序和定期監(jiān)測(cè)，不斷清除野毒感染豬，逐步凈化豬群。這給我市疫病凈化項(xiàng)目開展和推進(jìn)提供了參考。

（2）本次調(diào)查種豬場(chǎng)豬偽狂犬病病毒的平均感染率為15.76%，比陳如敬等報(bào)道2009年福建部分地區(qū)規(guī)?；i場(chǎng)的野毒抗體陽性率23.56%低[4]，比程晶等調(diào)查2006—2008年規(guī)模化豬場(chǎng)陽性率分別為39.64%、19.12%、17.93%低[5]。但比國(guó)內(nèi)其他省份報(bào)道[6-9]，江西部分種豬場(chǎng)陽性率為13.1%、山西省部分種豬場(chǎng)陽性率為9.12%、廣西部分種豬場(chǎng)檢測(cè)的陽性率為2.7%等均高，這表明我市豬偽狂犬病部分豬場(chǎng)的感染情況仍不容樂觀。要引起高度重視，消除隱患，減少豬場(chǎng)因感染偽狂犬病引起母豬流產(chǎn)、死胎、木乃伊胎以及仔豬大量發(fā)病死亡造成經(jīng)濟(jì)損失。因此對(duì)陽性豬場(chǎng)應(yīng)全面的定期監(jiān)測(cè)并及時(shí)清除野毒感染豬，使豬群逐步得到凈化。

（3）本次調(diào)查種豬場(chǎng)豬偽狂犬病病毒的感染情況反映的是部分種豬場(chǎng)部分種豬的感染，具體豬場(chǎng)的免疫程序和凈化方案應(yīng)視豬場(chǎng)全場(chǎng)的感染情況而定。龍海市和云霄縣偽狂犬病感染率較高，這可能與該地區(qū)生豬飼養(yǎng)密度大，豬場(chǎng)防控措施和免疫水平較薄弱有關(guān)。有部分種豬場(chǎng)抽檢的結(jié)果陽性數(shù)為零，這與豬場(chǎng)生產(chǎn)水平提高，免疫程序優(yōu)化和平時(shí)淘汰健康狀況差的母豬有關(guān)；但也可能與采血數(shù)量相關(guān)，種豬的采血數(shù)為30～70份不等，沒有種豬采血全覆蓋。有研究和實(shí)踐表明，種豬群的更新淘汰和gE缺失苗的使用能有效降低豬群中g(shù)E抗體的陽性率[3]。因此可采取制定相應(yīng)的免疫和一系列生物安全措施控制和凈化豬偽狂犬病，達(dá)到疫病凈化的有效目的。