銀杏葉注射液對丙泊酚麻醉后高齡大鼠認(rèn)知功能障礙的影響

溫曉輝， 王春愛

（1.甘肅中醫(yī)藥大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院，甘肅蘭州 730000；2.甘肅省中醫(yī)院麻醉科，甘肅蘭州 730030）

臨床常用全身麻醉藥可引起患者一過性精神癥狀 （如興奮、活躍、記憶障礙等），尤其在麻醉恢復(fù)后的短暫時(shí)間內(nèi)患者存在認(rèn)知功能及精神運(yùn)動方面變化，臨床上稱為術(shù)后認(rèn)知功能障礙[1-2］。研究顯示，老年人是發(fā)生認(rèn)知功能障礙的高危人群，輕者影響認(rèn)知能力及生活情緒，重者喪失獨(dú)立能力，嚴(yán)重影響生活質(zhì)量。

丙泊酚作為一種快速、短效的靜脈麻醉藥已廣泛應(yīng)用于臨床，具有誘導(dǎo)平穩(wěn)、蘇醒迅速等特點(diǎn)，但在臨床應(yīng)用中也有出現(xiàn)認(rèn)知功能障礙[3］，表明現(xiàn)代復(fù)合麻醉也無法有效減少其發(fā)生[4］。銀杏葉注射液對心、腦、腎等器官有一定保護(hù)作用，有助于術(shù)后的恢復(fù)[5-6］，本實(shí)驗(yàn)旨在觀察該制劑對丙泊酚麻醉后高齡大鼠認(rèn)知功能障礙的影響及其作用機(jī)制。

1 材料

1.1 動物 SPF級健康雄性Wistar大鼠80只，20月齡，體質(zhì)量560～610 g，由甘肅中醫(yī)藥大學(xué)科研實(shí)驗(yàn)中心提供，動物許可證號 SCXK （甘）2015-0004。

1.2 試藥 丙泊酚由四川國瑞藥業(yè)責(zé)任有限公司生產(chǎn)，規(guī)格20 mL∶200 mg，批號16080411；銀杏葉注射液由悅康藥業(yè)集團(tuán)有限公司生產(chǎn)，規(guī)格 5 mL∶17.5 mg，批號160503。IL-1β、IL-10 ELISA試劑盒購自上海閎巨實(shí)業(yè)有限公司。

1.3 儀器 Morris水迷宮及其動物行為視頻分析系統(tǒng) （上海欣軟信息科技有限公司）。

2 方法

2.1 分組及給藥 大鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、預(yù)防組、治療組，每組20只，各組大鼠腹腔注射丙泊酚60 mg／kg（6 mL／kg）麻醉，然后酌情追加，維持麻醉3 h后蘇醒，空白組腹腔注射等量生理鹽水 （6 mL／kg），預(yù)防組自麻醉前3 d開始腹腔注射銀杏葉注射液 （2 mL／kg），治療組自麻醉后開始腹腔注射銀杏葉注射液 （2 mL／kg），空白組、模型組腹腔注射生理鹽水 （2 mL／kg），均為1 次／d， 連續(xù) 3 d。

2.2 認(rèn)知功能檢測于麻醉后1 d，各組大鼠進(jìn)行Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)，連續(xù)7 d，于上、下午各進(jìn)行4次實(shí)驗(yàn)，記錄大鼠尋找平臺時(shí)間 （逃避潛伏期），每天8次成績的平均值作為當(dāng)日成績，取第1、3、5、7天數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。

2.3 IL-1β、IL-10水平檢測 各組大鼠抽血，ELISA法檢測IL-1β、IL-10水平。

2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 通過SPSS 13.0軟件進(jìn)行處理，數(shù)據(jù)用表示，結(jié)果采用單因素方差分析，組間兩兩比較時(shí)方差齊者采用LSD檢驗(yàn)，不齊者采用Tamhane檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 逃避潛伏期 表1顯示，與第1天比較，模型組第7天，預(yù)防組第5天，治療組第5、7天逃避潛伏期均顯著縮短 （P＜0.05）；與模型組比較，預(yù)防組、治療組不同時(shí)間點(diǎn)逃避潛伏期均顯著縮短 （除預(yù)防組第3天外）（P＜0.05）。

3.2 IL-1β、IL-10水平 表2～3顯示，與第1天比較，治療組第3、7天IL-1β、IL-10水平均顯著下降 （P＜0.05）；與模型組比較，預(yù)防組、治療組不同時(shí)間點(diǎn)兩者水平均顯著下降 （除治療組第1天兩者水平外）（P＜0.05）。

表1 各組平均逃避潛伏期時(shí)間比較 （s，s， n＝20）

表1 各組平均逃避潛伏期時(shí)間比較 （s，s， n＝20）

注：與第1天比較，?P＜0.05；與模型組比較，△P＜0.05

組別 第1天 第3天 第5天 第7天空白組 30.22±8.32△ 29.80±13.48 30.85±9.31△ 29.85±7.24△模型組 50.15±11.31 50.55±10.57 48.05±7.59 34.40±11.48?預(yù)防組 48.05±10.31△ 32.70±11.88 27.55±11.45?△ 27.15±10.89△治療組 47.80±6.31△ 47.40±8.48△ 27.95±10.31?△ 27.80±9.31?△

表2 各組IL-1β水平比較 （ng／Ls， n＝20）

表2 各組IL-1β水平比較 （ng／Ls， n＝20）

注：與第1天比較，?P＜0.05；與模型組比較，△P＜0.05

空白組 1.83±0.06△ 1.78±0.07△ 1.81±0.05△模型組 2.42±0.09 2.37±0.21 2.39±0.12預(yù)防組 1.58±0.04△ 1.56±0.14△ 1.51±0.08△治療組 2.31±0.24 1.51±0.12?△ 1.52±0.11?△

表3 各組IL-10水平比較 （ng／L，s， n＝20）

表3 各組IL-10水平比較 （ng／L，s， n＝20）

注：與第1天比較，?P＜0.05；與模型組比較，△P＜0.05

組別 第1天 第3天 第7天空白組 31.06±2.96△ 30.47±3.36△ 30.47±3.36△模型組 51.67±4.94 49.10±3.28 49.94±3.28預(yù)防組 33.98±5.12△ 31.41±4.38△ 31.41±4.38△治療組 49.34±2.89 34.08±5.08?△ 32.08±5.08?△

4 討論

認(rèn)知功能障礙是老年人手術(shù)和麻醉后出現(xiàn)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥之一，其發(fā)病原因尚有爭議，唯一確定的是危險(xiǎn)因素只有高齡。研究表明，手術(shù)等因素可破壞促炎、抑炎細(xì)胞因子間之的平衡及內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，引起促炎細(xì)胞因子產(chǎn)生和釋放過多，這些細(xì)胞因子可介導(dǎo)造成認(rèn)知功能障礙[7］，可見其發(fā)病與手術(shù)應(yīng)激和炎癥對神經(jīng)系統(tǒng)的損傷有關(guān)。

Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，銀杏葉注射液干預(yù)后預(yù)防組與治療組均能改善大鼠認(rèn)知功能障礙，但是預(yù)防組能更早起作用 （從第3天開始，而治療組從第5天才開始），即預(yù)防組短期效應(yīng) （治療后3 d）優(yōu)于治療組，而5 d后2組無明顯差異；與模型組比較，2組IL-1β、IL-10水平在第1天均有所下降，而在第7天基本接近正常。由此可知，銀杏葉注射液可抑制IL-1β、IL-10，而且兩者水平下降與給藥時(shí)間有關(guān)系，以預(yù)防組更優(yōu)，從而減輕炎性損傷，改善病情，與林舜艷等[8］報(bào)道一致。

綜上所述，銀杏葉注射液可改善丙泊酚麻醉后高齡大鼠認(rèn)知功能障礙，其機(jī)制復(fù)雜，抑制炎性損傷也是主要作用之一，雖然短期內(nèi)預(yù)防組效果明顯，但長期效應(yīng)尚不明確，需要作進(jìn)一步研究。另外，本實(shí)驗(yàn)中銀杏葉注射液僅應(yīng)用中等劑量，3 d療程，是否存在量效關(guān)系及時(shí)間依賴性也有待深入探索。