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    大豆卵磷脂作為冷凍保護(hù)劑對(duì)澳洲白綿羊精液品質(zhì)的效果試驗(yàn)

    2019-03-21 05:59:56陳廣仁王曉平潘曉榮
    中獸醫(yī)學(xué)雜志 2019年1期
    關(guān)鍵詞:頂體射精保護(hù)劑

    陳廣仁,王曉平,潘曉榮,袁 勇,李 巖

    (甘肅省畜牧業(yè)產(chǎn)業(yè)管理局,甘肅 蘭州 730030)

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)動(dòng)物的飼養(yǎng)管理

    6只雄性澳洲白綿羊,平均月齡21.4±4.1,平均體重80.2±2.5 kg。單欄飼養(yǎng),自由飲水。早8點(diǎn)晚6點(diǎn),定量投料,粗飼料含苜蓿30%、全株玉米青貯40%、大麥秸稈30%;精料含豆粕14%、菜粕8%、DDGS 12%、麩皮5%、玉米55%、種羊用預(yù)混料15%、食鹽1%,總蛋白17.36%。在訓(xùn)練采精前15 d開始每天增加胡蘿卜500 g/只,采精期間每羊每天補(bǔ)充2枚雞蛋。利用假陰道法在有發(fā)情母羊的情況下訓(xùn)練采精。

    1.2 公羊體重與陰囊周長(zhǎng)的測(cè)定

    訓(xùn)練公羊采精后,即采精實(shí)驗(yàn)期間,當(dāng)天稱重;同時(shí)利用皮卷尺在陰囊最大直徑處測(cè)量陰囊周長(zhǎng),重復(fù)三次測(cè)量,取平均值。

    1.3 精液采集與冷凍保存

    采集精液后,將5微升精液于潔凈載玻片上,顯微鏡下觀察,精子密度≥20億、精子活力≥70%,并且精子畸形率≤20%的精液才能夠冷凍保存。先將每只羊的精液平均分為2份,分別用含大豆卵磷脂BioXcell和含卵黃Optidyl將精液進(jìn)行兩部分冷凍。

    1.4 精液品質(zhì)檢測(cè)

    1.4.1 精子活力檢測(cè)

    取出冷凍后的精子,于37℃水中 30 s。取 5 μL精液滴加于 Leja玻片腔室中,置于精液輔助分析儀下分析精液運(yùn)動(dòng)參數(shù)。

    1.4.2 精子頂體完整率和DNA完整性分析

    利用精子頂體染色試劑盒PSA-FITC進(jìn)行精子頂體完整率檢測(cè),利用精子染色體擴(kuò)散實(shí)驗(yàn)進(jìn)行DNA完整性分析。

    1.4.3 統(tǒng)計(jì)分析

    對(duì)同一只公羊采精8次,對(duì)每一次的精液質(zhì)量進(jìn)行檢測(cè),取平均值;每只羊的精液冷凍實(shí)驗(yàn)至少3次,解凍后的常規(guī)質(zhì)量和頂體完整率、DNA完整率等分析。采用 SPSS 21.0軟件中的One-Way AVNOVA對(duì)結(jié)果進(jìn)行差異顯著性分析,分析結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

    2 結(jié)果

    2.1 公羊體重與陰囊周長(zhǎng)的測(cè)定結(jié)果

    由于種公羊的體重在一定范圍內(nèi)與陰囊的大小呈正相關(guān),而陰囊大小直接關(guān)系到每次射精的總精子數(shù)量。對(duì)澳洲白綿羊進(jìn)行評(píng)定,發(fā)現(xiàn)公羊體重與陰囊周長(zhǎng)之間相關(guān)系數(shù)R2=0.98(圖1),而陰囊周長(zhǎng)與每次射精精子總數(shù)之間的相關(guān)系數(shù) R2=0.99(圖 2)。

    圖1

    圖2

    表1

    2.2 種公羊鮮精品質(zhì)評(píng)定

    通過(guò)表1可以看出澳洲白種公羊每次射精量約 1.0 mL,精液密度約為 19~32×108 個(gè)/mL,精子活力最低為73%,最高為81%,頂體完整率都在71%~76%之間,而精子DNA完整率在68%~74%之間。同時(shí)發(fā)現(xiàn)所有種公羊每次采取的精液外觀都為乳白色,略帶腥味。

    2.3 兩種冷凍保護(hù)劑的效果比較

    從表2可以發(fā)現(xiàn)含有大豆卵磷脂分冷凍保護(hù)劑BioXcell在頂體完整率、DNA完整率以及精子直線速度方面現(xiàn)在高于卵黃冷凍保護(hù)劑Optidyl;而在精子活力、曲線速度以及評(píng)價(jià)路徑速度方面兩種冷凍保護(hù)劑無(wú)顯著性差異。

    表2

    3 討論

    綜上所述,本研究發(fā)現(xiàn)引進(jìn)甘肅河西走廊地區(qū)的澳洲白種公羊鮮精質(zhì)量指標(biāo)分別為:精液量0.93±0.4 mL、精子密度 25.5±4.1 億/mL、精子活力0.78±0.09、 頂體完整率 0.73±0.04、DNA 完整率0.72±0.05。同時(shí)發(fā)現(xiàn)公羊體重與陰囊周長(zhǎng)成正比例關(guān)系(R2=0.98),陰囊周長(zhǎng)與每次射精量呈正相關(guān)(R2=0.99)。用含大豆軟磷脂 BioXcell對(duì)澳洲白種公羊精液進(jìn)行冷凍保存,在頂體完整率和DNA完整率方面顯著優(yōu)于含卵黃Optidyl。

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