黃建華,辛鵬程*
(甘肅省天水市麥積區(qū)畜牧獸醫(yī)局,甘肅 天水 741020)
豬圓環(huán)病毒(PCV),圓環(huán)病毒科圓環(huán)病毒屬,是目前發(fā)現(xiàn)的最小的動(dòng)物病毒,根據(jù)抗原性分為2種血清型,PCV-1和PCV-2。主要感染斷奶仔豬,引起豬的免疫抑制性病變,易引起感染豬發(fā)生繼發(fā)感染而出現(xiàn)相關(guān)綜合征。主要表現(xiàn)為豬的體質(zhì)下降,消瘦,皮膚和可視黏膜蒼白,并伴有呼吸困難,腹瀉等。
豬圓環(huán)病毒感染及其所致疾病已成為我國養(yǎng)豬業(yè)具有嚴(yán)重威脅的免疫抑制性疫病之一。有國外學(xué)者對(duì)感染豬圓環(huán)病毒病的病因?qū)W、病理學(xué)以及其他病原體在發(fā)生中的作用等進(jìn)行了大量的研究,研究表明,能單獨(dú)引發(fā),但只產(chǎn)生不典型的、輕微的或中等程度的臨床癥狀和病理損傷,必需有其他協(xié)同因子,如豬流感病毒及豬肺炎支原體的共同感染。國內(nèi)研究學(xué)者對(duì)豬圓環(huán)病毒病的病原學(xué)、基因組學(xué)、診斷技術(shù)、流行病學(xué)以及疫苗研制等進(jìn)行了廣泛深入的研究,取得良好的效果。
豬圓環(huán)病毒有2種不同的血清型,一種為豬圓環(huán)病毒Ⅰ型(PCV-1);另一種為豬圓環(huán)病毒Ⅱ型(PCV-2),試驗(yàn)研究證明,一般認(rèn)為PCV1血清型無致病性,而PCV2血清型有致病性。豬圓環(huán)病毒病是由豬圓環(huán)病毒Ⅱ型(PCV-2)引起的傳染病。PCV-2能引發(fā)豬呼吸道綜合征(PRDC)、豬皮炎腎病綜合征(PDNS)、增生性壞死性肺炎(PNP)、新生仔豬先天性顫抖病(CT)和母豬流產(chǎn)及死亡綜合征。
豬圓環(huán)病毒主要感染6~8周齡的仔豬,一般于斷奶后1周開始發(fā)病,急性發(fā)病豬群中,病死率可達(dá)10%。血清學(xué)調(diào)查研究表明,PCV在世界范圍內(nèi)流行,在德國豬場(chǎng),豬群PCV抗體陽性率高達(dá)90%以上。
豬圓環(huán)病毒感染不僅會(huì)嚴(yán)重降低豬群免疫力,并會(huì)增強(qiáng)一些疾病的易感性,易誘發(fā)其他病原菌混合感染綜合征,并導(dǎo)致發(fā)病豬癥狀更加嚴(yán)重。
育肥豬多表現(xiàn)為隱性感染,不表現(xiàn)臨床癥狀。主要感染斷奶仔豬,引起斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征,主要癥狀表現(xiàn)為豬體質(zhì)消瘦,全身不同程度的肌肉萎縮,淋巴結(jié)腫大顯著,呼吸困難,皮膚發(fā)生不規(guī)則隆起,還可引起母豬繁殖障礙、流產(chǎn),仔豬腹瀉,斷奶前死亡率高,先天性顫抖。
病豬及其排泄物、分泌物等,通過胎盤、消化道等方式垂直感染豬體??筛腥緫言心肛i,引起不同懷孕母豬的流產(chǎn)或者死胎或弱仔及繁殖障礙。相關(guān)研究表明,豬圓環(huán)病毒主要侵害豬的免疫系統(tǒng),導(dǎo)致免疫抑制及機(jī)體抵抗力下降,病死率可達(dá)10%。
根據(jù)豬只生長情況,出現(xiàn)食欲減退、消瘦,生長停止,被毛雜亂,伴有呼吸困難及咳嗽,少數(shù)豬只拉稀等,根據(jù)上述癥狀可初步判斷為疑似病例,需配合實(shí)驗(yàn)室診斷方法確診。
豬感染豬圓環(huán)病毒后,全身淋巴結(jié),尤其是腹股溝淋巴結(jié)腫大異常,血管擴(kuò)張,伴有黃疸等。肺部有腫塊,明顯支氣管炎,肺泡出血,脾臟腫大,大、小腸出血,腎盂周圍組織水腫。
2.3.1 血清學(xué)方法
2.3.1.1 酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA) 以抗體抗原反應(yīng)為原理的一種抗體或抗原的免疫酶技術(shù),技術(shù)簡(jiǎn)單、靈敏、快速,在臨床診斷中已經(jīng)得到了廣泛應(yīng)用。有研究表明,用PCV2 全病毒和桿狀病毒表達(dá)建立了2種ELISA檢測(cè)方法,結(jié)果顯示,這2種檢測(cè)方法均能檢測(cè)血清中相應(yīng)的PCV2抗體,均有良好的重復(fù)性、靈敏性和特異性。
根據(jù)ELISA的基本原理,主要分為競(jìng)爭(zhēng)ELISA、間接ELISA、抗原捕獲ELISA等。競(jìng)爭(zhēng)ELISA主要用于大規(guī)模豬群的PCV 快速診斷。
2.3.1.2 間接免疫熒光(IFA) 利用已知血清的抗體,用于病毒分離效果的鑒定及病變組織或豬源細(xì)胞感染情況的檢測(cè)。IFA作為經(jīng)典抗體檢測(cè)方法,國內(nèi)外多位研究者研制了多種PCV抗體檢測(cè)試劑盒。本方法成本低、快速、靈敏,但實(shí)際操作較復(fù)雜,因此不適合臨床上的快速診斷。
2.3.1.3 免疫組化化學(xué)檢測(cè) 在抗原抗體特異性防疫的前提下,利用酶細(xì)胞化學(xué)的手段,檢測(cè)抗原或抗體??稍陲@微鏡下進(jìn)行觀察,且顏色穩(wěn)定,樣本容易保存。
2.3.2 分子生物學(xué)方法
2.3.2.1 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR) 是一種快速、簡(jiǎn)便、特異的診斷方法,可疑直接檢測(cè)病毒核酸,在獸醫(yī)臨床檢測(cè)病原中廣泛應(yīng)用,主要包括常規(guī)PCR、多重PCR、套式PCR、熒光定量PCR等方法。
2.3.2.2 原位雜交(ISH) 是利用核酸分子單鏈間互補(bǔ)的堿基順序,通過堿基對(duì)之間非共價(jià)鍵形成穩(wěn)定的雜交雙鏈,可以精確定位病毒DNA在細(xì)胞中的部位。
2.3.2.3 DNA芯片檢測(cè)技術(shù) 主要根據(jù)豬圓環(huán)病毒序列制成相應(yīng)的探針,構(gòu)建出DNA芯片,從而檢測(cè)出PCV發(fā)病率,本方法具有靈敏度高,特異性強(qiáng),可重復(fù)利用的優(yōu)點(diǎn)。
做好豬只主要傳染病的免疫工作,疫苗免疫接種是有效的防控手段,主要包括滅活疫苗、重組疫苗、DNA疫苗及嵌合病毒疫苗,我國商品化疫苗主要包括PCV-2滅活疫苗、PCV-2弱毒疫苗及PCV-2基因工程疫苗。由哈爾濱獸醫(yī)研究所、南京農(nóng)業(yè)大學(xué)和大北農(nóng)集團(tuán)分別研制的滅活疫苗LG 株、SH 株和DBN-SX07 株上市,在國內(nèi)各大養(yǎng)殖場(chǎng)使用。
3.2.1 建立健全疫病監(jiān)控體系 做好免疫預(yù)防,提高豬群整體免疫水平,制定相應(yīng)免疫程序,適時(shí)監(jiān)測(cè)PCV2 感染的發(fā)生和流行,實(shí)行淘汰陽性抗體豬,建立完善的生物安全技術(shù)體系。
3.2.2 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,減少各種應(yīng)激因素 改善豬舍環(huán)境衛(wèi)生,保持干燥,做好豬場(chǎng)的降溫保暖工作,夏天要通風(fēng)降溫,減少氨氣、硫化氫等有毒氣體的濃度。降低飼養(yǎng)密度,減少環(huán)境應(yīng)激。加強(qiáng)消毒滅源和早期疑似感染豬的診斷、隔離、淘汰等。
3.2.3 嚴(yán)格執(zhí)行生物安全措施 嚴(yán)格實(shí)行自繁自養(yǎng)制度,實(shí)行全進(jìn)全出,減少混群飼養(yǎng),避免病原交叉感染。引種前做好抗體水平檢測(cè)和隔離觀察等工作,防止輸入病例的傳入;同時(shí)加強(qiáng)滅鼠、消毒制度的落實(shí)。
3.2.4 早預(yù)防,早隔離,早治療 隨時(shí)觀察豬群狀況,一旦發(fā)現(xiàn)情況,及時(shí)診斷,將病豬進(jìn)行隔離,單獨(dú)治療,合理用藥,病死豬的及時(shí)無害化處理。并做好妊娠母豬和斷奶仔豬繼發(fā)性感染物預(yù)防工作。