超高效液相色譜法在藥物檢驗中的運(yùn)用

王婉婷，孫立麗，金立弟

吉林市食品藥品檢驗所，吉林 吉林 132011

應(yīng)用高效液相色譜法是在生化、醫(yī)學(xué)、藥物等各個領(lǐng)域當(dāng)中最常見的一種分離手段，臨床上通過使用這種手段能夠保障藥物的質(zhì)量，對新藥進(jìn)行分析開發(fā)[1]。高效液相色譜法的靈敏度和分析時間并不太理想，因此，為了能全面提高檢測的靈敏度和縮短分析的時間。本文對超高效液相色譜法在藥物檢驗中的運(yùn)用進(jìn)行了分析，詳細(xì)如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇80例利福平藥物作為研究對象，并按照檢驗方法的不同分為對照組和觀察組，對照組（40例，高效液相色譜法），觀察組（40例，超高效液相色譜法）。檢驗結(jié)束后對所有藥物的檢驗結(jié)果進(jìn)行分析，包括檢驗藥片花費(fèi)的平均分析時間和徹底分離率。

1.2 方法 所有藥物均選取利福平（國藥準(zhǔn)字H35020382，0.15g，福建匯天生物藥業(yè)有限公司），高效液相色譜儀（DG55-2/3/4，天津奧特賽恩斯），超高效液相色譜儀（Acquity,UPLC,nanoAcquity,UPC2,2695，美國,沃特斯,nanoACQUITY,P）。

對照組使用高效液相色譜法。將40片利福平磨成粉狀，并放置入50mL的量瓶，溶解、稀釋、過濾，最后放入紫外線進(jìn)行掃描，紫外線的范圍設(shè)置為200nm-400nm，對波長進(jìn)行測定，并吸取20ul的稀釋液注射入高效液相色譜儀，分析記錄出現(xiàn)的色譜圖。

觀察組使用超高效液相色譜法。同樣，將40片利福平磨成粉狀，放置入50mL的量瓶，溶解、稀釋、過濾，最后放入紫外線進(jìn)行掃描，紫外線的范圍設(shè)置為200nm-400nm，對波長進(jìn)行測定，并吸取20ul的稀釋液注射入超高效液相色譜儀器中，最后對色譜圖進(jìn)行分析記錄。

1.3 療效標(biāo)準(zhǔn) 通過比較兩組藥品進(jìn)行分析所花費(fèi)的平均時間和徹底分離率來判斷超高效液相色譜法在藥物檢驗中的運(yùn)用效果。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 將兩組藥品的數(shù)據(jù)納入SPSS 20.0軟件中分析，計量資料比較采用t檢驗，并以（Mean±SD）表示，計數(shù)資料采用χ2檢驗，并以率（%）表示，（P＜0.05）為差異顯著，有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

兩組進(jìn)行研究的藥片各有40例，對照組花費(fèi)的藥片平均分析時間（15.26±2.41）min明顯高于觀察組花費(fèi)的藥片平均分析時間（2.50±0.36）min，數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（t=33.119，P=0.001）；對照組的藥品徹底分離15例（37.50%）明顯低于觀察組的藥品徹底分離29例（72.50%），數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=9.899，P=0.002）。

3 討論

由于大量樣品需要在短時間內(nèi)得到快速分離，以達(dá)到生產(chǎn)力的需求，因此對檢測樣品的技術(shù)提出了更高的要求，超高效液相色譜法就是在高效液相色譜法的基礎(chǔ)上被提出[2]。它的應(yīng)用范圍更廣，能為藥品的檢測和研發(fā)提供更加安全的平臺，具有高效的作用。

應(yīng)用高效液相色譜法雖然也能夠快速對藥品進(jìn)行分離，縮短樣品分析的時間，但是在同樣更具挑戰(zhàn)性的環(huán)境下，效果遠(yuǎn)不如超高效液相色譜法，因此，無法取得理想的分離效果。

與之相比，應(yīng)用超高效液相色譜法的速度更快，對藥物進(jìn)行檢驗的平均分析時間更短，這是因為它是采用新型全多孔球形1.7 um反相固定相，所應(yīng)用的是“雜化顆粒技術(shù)”；其靈敏度也顯著高于高效液相色譜法，利用聚四氟乙烯池壁的全析射特征，從而增加了檢測的靈敏度；經(jīng)過充分的發(fā)展后，還可通過使用針內(nèi)針進(jìn)樣探頭，減少死體積，降低了進(jìn)樣時的交叉污染幾率，與高效液相色譜相比，它的環(huán)境適應(yīng)性更強(qiáng)，并能在高速、高壓的環(huán)境下保障藥品分離的質(zhì)量。也因為其超高的靈敏度和較強(qiáng)的選擇性使得得到的質(zhì)譜譜圖數(shù)據(jù)更加完整、品質(zhì)高，因此，在天然產(chǎn)物，新藥的開發(fā)，定性、定量分析研究方面占有著重要的地位。

本文的研究發(fā)現(xiàn)，應(yīng)用超高效液相色譜法進(jìn)行檢驗藥物的平均分析時間和徹底分離率明顯優(yōu)于對照組，P＜0.05，數(shù)據(jù)差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

綜上所述，超高效液相色譜法在藥物檢驗中的運(yùn)用能夠取得顯著的效果，幫助提高檢驗藥物的質(zhì)量和檢驗的效率，值得在臨床進(jìn)行應(yīng)用。