大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗科(116011)
林 琳 朱 鴻 程艷杰 潘詩萌 趙 丹△
TORCH一詞是1971年Nahmias 等學(xué)者1971年總結(jié)出的病原群[1],一組病原微生物的英文名稱縮寫,其中T指剛地弓形蟲(toxo-plasma,TOX),O指其他微生物(others,如柯薩奇病毒、梅毒螺旋體、微小病毒、乙肝病毒),R指風(fēng)疹病毒(rubella virus,RV),C指巨細胞病毒(cytomegalovirus,CMV),H指單純皰疹病毒(herpes simplx virus,HSV)Ⅰ、Ⅱ型?;颊吒腥具@一組病原群中任何一種后,雖自身的癥狀不明顯或癥狀輕微,但病原體將會通過產(chǎn)道或胎盤感染新生兒,導(dǎo)致早產(chǎn)、習(xí)慣性流產(chǎn)、死胎、死產(chǎn)及一些嚴重的先天性缺陷和發(fā)育異常,隨著懷孕年齡增加胎兒感染率增加,在早期母體感染病例中有嚴重臨床表現(xiàn)者比例較低。因此產(chǎn)前進行TORCH相關(guān)檢查具有重要意義,是我們落實好優(yōu)生優(yōu)育政策的關(guān)鍵一步。研究主要對大連地區(qū)育齡女性感染TORCH病原體的情況進行分析,為指導(dǎo)婦女降低TORCH感染提供有效數(shù)據(jù),降低胎兒畸形的概率。
選擇2016年6月-2017年6月大連地區(qū)進行產(chǎn)前TORCH檢查的育齡期婦女,年齡為20~55歲,中位年齡為37歲,按年齡將孕婦分為小于35歲的低齡組(1104例)和大于等于35歲的高齡組(939例),總計2043人。所有樣本均來自大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗科。
清晨空腹,采血前未做過劇烈運動。肘靜脈抽取3.0 ml血液,注入含促凝劑及分離膠的采血管中,待血液完全凝固后,以3500r/min離心10min待檢。所有測定樣本均為血清,無溶血、乳糜及黃疸。
羅氏cobase601全自動電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀配套試劑弓形蟲、風(fēng)疹病毒、巨細胞病毒IgM抗體檢測試劑盒和弓形蟲、風(fēng)疹病毒、巨細胞病毒、Ⅰ型單純皰疹病毒、Ⅱ型單純皰疹病毒IgG抗體檢測試劑盒、高值和低值定標液、激發(fā)液和緩沖液。
電化學(xué)發(fā)光免疫系統(tǒng)中,磁性微粒為固相載體包被抗體(抗原),用三聯(lián)吡啶釕標記抗體(抗原),在反應(yīng)體系內(nèi)發(fā)生免疫反應(yīng)后,形成磁性微粒包被抗體-待測抗原-三聯(lián)吡啶釕標記抗體復(fù)合物,將反應(yīng)液吸入測量池中,通過電磁作用將磁珠吸附在電極表面。未與磁珠結(jié)合的物質(zhì)通過ProCell/Procell M被除去,當磁性微粒流經(jīng)電極表面時,未結(jié)合的標記抗體和標本被沖走。給電極加一定的電壓,使復(fù)合物化學(xué)發(fā)光,并通過光電倍增器測量發(fā)光強度。黃疸、溶血、脂血和生物素等一般不會干擾檢測結(jié)果,極少情況下極高滴度的免疫組分、鏈霉親和素和釕抗體會產(chǎn)生干擾。有關(guān)HIV患者、接受免疫抑制劑資料的患者或有其他導(dǎo)致免疫抑制疾病的患者的檢測結(jié)果的解釋,需特別謹慎。
所有數(shù)據(jù)采用excel 2003和SPSS 17.0軟件進行統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以率表示,組間陽性率比較用卡方檢驗,組間多重比較采用卡方分割法,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
在調(diào)查人群中,anti-CMVIgM的陽性檢出率最高為3.23%,其次為anti-RVIgM2.50%,anti-TOXIgM陽性檢出率最低為0.69%。結(jié)果見表1。
表1 Anti-TORCH IgM抗體檢測結(jié)果
由表2可見,低齡組中與其他兩種病原體比較anti-CMVIgM陽性檢出率最高,為3.26%;anti-TOXIgM陽性檢出率最低,為0.45%。在高齡組中,anti-CMVIgM在的陽性檢出率最高,為3.19%;anti-TOXIgM陽性檢出率最低,為0.96%。anti-TOXIgM、anti-RVIgM、anti-CMVIgM的陽性檢出率在兩年齡組間差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
表2 不同年齡組anti-TORCH IgM陽性檢出率[n﹙%﹚]
在低年齡組中,anti-CMVIgG陽性檢出率最高,為95.10%;anti-TOXIgG陽性檢出率最低,為3.80%。在高齡組中anti-CMVIgG的陽性檢出率最高,為94.89%;anti-TOXIgG陽性檢出率最低,為7.56%。由表3可知,anti-TOXIgG、anti-RVIgG、anti-HSVⅠIgG、anti-HSVⅡIgG在高年齡組陽性檢出率高,且差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。anti-CMVIgG陽性檢出率在兩年齡組間無差異(P>0.05)。
表3 不同年齡組anti-TORCH IgG陽性檢出率[n﹙%﹚]
在被檢測的2043人中,anti-CMVIgG陽性檢出率最高,為95.01%;弓形蟲抗體anti-TOXIgG陽性檢出率最低,僅為5.53%。結(jié)果見表4。
表4 Anti-TORCH IgG抗體檢測結(jié)果(n)
育齡期女性由于體內(nèi)激素水平的改變和免疫水平的下降,尤其是T淋巴細胞的功能減弱,而易感TORCH病原體,其感染易多發(fā)且呈世界性分布[2-4]。弓形蟲病感染通常通過檢測抗弓形蟲特異性IgG進行診斷,有時也對IgG抗體進行檢測。弓形蟲IgG抗體檢測則用于評價弓形蟲血清學(xué)狀態(tài),反映急性或潛伏性感染。弓形蟲IgM抗體陽性反應(yīng)急性、新近或復(fù)發(fā)感染。通過樣本中血清轉(zhuǎn)化或抗體IgG滴度明顯上升診斷懷孕期間急性獲得性感染[5]。風(fēng)疹抗體檢測可用于判斷個體免疫狀態(tài),有助于診斷急性風(fēng)疹感染。風(fēng)疹病毒IgG抗體的存在提示以往暴露(接種疫苗免疫或既往風(fēng)疹病毒感染)。巨細胞病毒IgM陽性結(jié)合其IgG的低親和力指數(shù)即可證實近4個月的巨細胞病毒感染。HSV感染通常結(jié)合臨床癥狀并通過其IgG抗體的檢測進行評價。診斷TORCH感染的有效方法是檢測血清中IgM抗體,IgM抗體在感染的最早期出現(xiàn),故IgM抗體陽性表示正在發(fā)生感染[6]。
本次調(diào)研檢測血清中IgM抗體和IgG抗體,主要采用捕獲法和夾心法,其中捕獲法能夠提高反應(yīng)的特異性,避免風(fēng)濕性因子或自身抗體等的干擾。本研究結(jié)果提示,任何年齡的妊娠均需進行TORCH病原體的檢測,防止孕婦不良妊娠的發(fā)生。比較兩年齡組TORCH病原體IgG抗體的感染情況,除anti-CMVIgG外其它四類抗體高齡組均高于低齡組(P<0.05)。IgG類抗體通常被定義為既往感染,或可通過IgG滴度進行感染診斷。此結(jié)果提示高齡婦女的產(chǎn)前TORCH篩查很有必要。此次調(diào)查的2043例TORCH檢查的育齡期婦女中,CMV的感染率最高,巨細胞病毒感染導(dǎo)致長期潛伏感染,對于任何年齡均有危險,個別可出現(xiàn)再次感染導(dǎo)致發(fā)病。CMV也是目前公認的宮內(nèi)感染最常見的病毒。新生兒無癥狀CMV感染時,僅在尿中排出,部分患兒在數(shù)年后出現(xiàn)智力發(fā)育異常,聽力或視力發(fā)育障礙等后遺癥[7-8]。HSV-2感染是HIV傳播的風(fēng)險因素之一,可導(dǎo)致孕早期的流產(chǎn)、胎兒的先天性畸形、早產(chǎn)或低體重兒等[9]。因此孕早期應(yīng)加強TORCH感染的篩查力度,并將CMV和HSV的感染作為防治重點。近年,TORCH感染已引起了廣泛關(guān)注[10]。本文針對大連地區(qū)的2043例血清篩查進行分析,為本地區(qū)流行病分析、指導(dǎo)提供參考依據(jù)。
綜上所述,TORCH檢測與優(yōu)生優(yōu)育密切相關(guān),應(yīng)提高待孕夫妻對TORCH感染危害性的認識,避免或減少接觸易感源,重視孕早期TORCH感染的血清學(xué)篩查,規(guī)范檢測方法并加強實驗室質(zhì)控管理,指導(dǎo)優(yōu)生優(yōu)育從而降低不良妊娠的發(fā)生率,以提高我國整體初生人口素質(zhì),響應(yīng)國家優(yōu)生優(yōu)育的號召。