許春雨 張宇龍 袁 飛 張 翔
(青島易邦生物工程有限公司,山東青島 266114)
2018年10月22 日,某養(yǎng)殖戶自帶發(fā)病仔豬2頭到青島易邦生物工程有限公司診斷中心檢測(cè),包括1頭50日齡保育豬、1頭20日齡仔豬。
該豬場(chǎng)存欄母豬40頭左右,自繁自養(yǎng),從2018年10月份開始,未斷奶仔豬(10日齡左右)出現(xiàn)犬坐式喘氣、逐漸消瘦,體溫40℃左右,腹瀉,病程7~10天后死亡。使用抗生素注射治療有一定效果,窩死亡率在50%~70%??祻?fù)豬轉(zhuǎn)到保育階段后消瘦,生長(zhǎng)緩慢,反復(fù)出現(xiàn)呼吸道與腸道疾病。該場(chǎng)母豬舍與育肥舍豬群正常,保育豬除個(gè)別有扎堆現(xiàn)象外,其他表現(xiàn)基本正常,發(fā)病集中在產(chǎn)床上的未斷奶仔豬。出現(xiàn)病情后,曾使用氟苯尼考、頭孢類藥物、阿莫西林等藥物治療。
豬瘟:母豬免疫3次/年、仔豬25日齡首免、60日齡二免;偽狂犬?。耗肛i3次/年,仔豬、育肥豬不做免疫;藍(lán)耳病:未做免疫;圓環(huán)病毒?。何醋雒庖摺?/p>
50日齡保育豬外觀被毛粗亂,消瘦,肛門被污染。解剖后發(fā)現(xiàn):肺臟充血明顯,輕微黏連,氣管喉頭有出血點(diǎn);腸道變薄,腸系膜與腸系膜淋巴結(jié)充血;脾臟邊緣呈鋸齒狀,邊緣有出血斑;腎臟表面布滿針尖狀出血點(diǎn),表現(xiàn)腎盂炎,有微量尿酸鹽沉積;膀胱有出血點(diǎn)。采集該病豬頜下淋巴結(jié)、肺臟(病變區(qū))、脾臟、腸道淋巴結(jié),病料混合后作PCR病原檢測(cè)。
20日齡仔豬有犬坐呼吸現(xiàn)象,解剖后肺臟有蝦肉樣病變;脾臟邊緣有出血性梗死;腎臟表面有針尖狀出血點(diǎn),腎盂炎;小腸系膜充血。采集該病豬頜下淋巴結(jié)、肺臟(病變區(qū))、脾臟、腸道淋巴結(jié),病料混合后作PCR病原檢測(cè)。
根據(jù)流行病學(xué)情況及臨床剖檢癥狀,初步判斷為病毒與細(xì)菌的混合感染。50日齡保育豬發(fā)病因?yàn)椴〕梯^長(zhǎng),癥狀表現(xiàn)較為復(fù)雜,暫不作為判斷依據(jù);20日齡仔豬病毒病重點(diǎn)懷疑豬瘟與藍(lán)耳病,但是不能排除圓環(huán)病毒病,細(xì)菌病臨床診斷為氣喘病、大腸桿菌病等混合感染。
圖1 50日齡保育豬剖檢圖片
圖2 20日齡仔豬剖檢圖片
將從上述病例采集的頜下淋巴結(jié)、肺臟(病變區(qū))、脾臟、腸道淋巴結(jié)混合剪碎,取1 mL病料混合物與3 mL雙抗(2 000 IU)混勻后,經(jīng)組織搗碎機(jī)(MM400型)研磨成漿液,反復(fù)凍融3次后進(jìn)行PCR擴(kuò)繁檢測(cè)。
⑴引物設(shè)置:豬瘟病毒引物設(shè)置為通用引物(可擴(kuò)繁檢測(cè)不同毒株),藍(lán)耳病病毒引物設(shè)置為通用引物(可擴(kuò)繁檢測(cè)經(jīng)典VR2332株與高致病性藍(lán)耳病毒株),豬圓環(huán)病毒2型引物設(shè)置為通用引物(可擴(kuò)繁豬圓環(huán)病毒2型2a、2b、2c、2d、2e不同亞型)。
⑵檢測(cè)結(jié)果及分析:由圖3可以看出,豬瘟、藍(lán)耳病、圓環(huán)病毒2型陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照樣品檢測(cè)結(jié)果成立,試驗(yàn)結(jié)果有效,檢測(cè)結(jié)果為圓環(huán)病毒2型陽(yáng)性。
根據(jù)PCR檢測(cè)結(jié)果,判定為圓環(huán)病毒2型感染。圓環(huán)病毒2型是最近幾年給我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)造成重大損失的一種傳染病病原,可造成仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征(PMWS)、豬皮炎腎病綜合征(PDNS)等多種臨床表現(xiàn)的疾病。該病毒可在免疫細(xì)胞內(nèi)寄生,破壞免疫系統(tǒng),造成機(jī)體免疫抑制,發(fā)生各種病原混合感染從而加劇病情。該病例為典型的圓環(huán)病毒2型與細(xì)菌混合感染。在治療過(guò)程中,應(yīng)首先考慮圓環(huán)病毒2型產(chǎn)生的免疫抑制,之后再使用抗生素控制細(xì)菌感染。
圖3 豬瘟、藍(lán)耳病、圓環(huán)病毒2型待測(cè)樣品電泳圖
⑴圓環(huán)病毒?。菏褂脠A環(huán)病毒2型亞單位疫苗,母豬配種前免疫1頭份,仔豬28日齡免疫1頭份。
⑵豬瘟:使用脾淋苗,母豬3次/年,每次免疫3頭份,仔豬25日齡首免1頭份、60日齡二免1頭份。
⑶偽狂犬?。菏褂秒p基因缺失苗,母豬3次/年,每次免疫2頭份,斷奶仔豬35日齡免疫1頭份。
⑷藍(lán)耳?。阂?yàn)樵搱?chǎng)為陰性場(chǎng),不做免疫,注重隔離預(yù)防。
對(duì)于發(fā)病仔豬,使用強(qiáng)力霉素(治療量)、豬脾轉(zhuǎn)移因子注射劑(增加機(jī)體免疫力)2 mL,每天注射1次,使用2天。對(duì)于保育豬,使用泰樂(lè)菌素(治療量)、黃芪多糖拌料,使用1個(gè)療程。
在臨床病例的診斷過(guò)程中,不同疾病臨床表現(xiàn)的相似性、同種疾病不同病程的差異性、混合繼發(fā)感染的復(fù)雜性,使臨床診斷的難度增加,先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)室診斷顯得尤為重要。